不同型别肺炎克雷伯菌的毒力基因,ESBL,血清杀菌效果与生物膜形成的关系

1、不同型别肺炎克雷伯菌的毒力基因，ESBL， 血清杀菌效果与生物膜形成的关系1 .呼吸道感染病人临床分离c K所口 hv KP的毒力基因、超广谱B -内酰胺酶、血清杀菌效果与生物膜形成的关系背景: 临床常见的肺炎克雷伯菌被医生和微生物学家称之为普通肺炎克雷伯菌(c KP) 。高毒力肺炎克雷伯菌(hv KP) 以荚膜多糖等为主要毒力因子, 具有较强的抗血清杀伤作用的能力和生物膜形成能力。本研收集呼吸道感染病人临床分离的 c KP和hv KP菌株，检测毒力基因、超 广谱B-内酰胺酶、血清杀菌效果与生物膜形成的关系。 材料和方法：本实验共收 集到肺炎克雷伯菌96 株 , 分离于呼吸道感染患者的痰液。对

2、菌株进行了拉丝试验、药敏试验和 ESBL确证试验。PC就应检测毒力基 因。NHS佥测血清杀菌作用，微孔板法检测生物膜形成能力。结果:96株临床分离肺炎克雷伯菌株有39 株 (40.6%) 通过拉丝试验被确定hv KP 菌株 ,57 株为 c KP菌株。药敏实验显示,c KP 菌株的耐药程度明显高于hv KP 株。 c KP 株携带 ESBL的菌株数量(28/5749.1%) 高于 hv KP 株 (11/3928.2%) 。此外,在c KP菌株中检测到一种或多种类型的 ESBL®因,而在hv KP菌株只 检测到单一的ESBLXHo在hv KP菌株中多种肺炎克雷伯菌毒力基因如 K1、K

3、2、 Rmp A、 Uge、 Kfu 和产气菌素等的检出率高于c KP 菌株。但是,FIM-1基因和Mr KD3基因的检出率没有很大差异。在 c KP株和hv KP 株中,ESBL的产出与生物膜形成(both P<0.05)密切相关，与血清杀菌作用(both P<0.05) 也高度相关。但是,在产生ESBL的c KP菌株和hv KP菌株之间生物膜形成和血清杀菌作用没有表现明显差异（both P>0.05） 。结论 : 虽然 hv KP 株中包含更多的毒力基因，但与产生ESBLB c KP菌株相比,生物膜形成能力和血清杀菌作用并没有任何明显的区别。2 .

4、测定水杨酸钠和N-乙酰半胱氨酸对荚膜多糖生物合成、生物膜形成以及K1型和K2型hm Kp菌株已形成的生物膜的影响背景：肺炎克雷伯菌携带大量的 CPSfg防止细菌免受吞噬细胞的吞噬和血清因子的杀伤作用并且可以富集细菌 形成生物膜。因此，我们需要一个可以减少CPS产生的一种化学药剂，可以作为 hv KP 细菌感染的一个有效的辅助治疗手段。实验的主要目的是评估水杨酸钠和 N-乙酰半胱氨酸对荚膜多糖生物合成、生物膜形成以及K1型和K2型hv KP菌株已形成的生物膜的影响。材料和方法： 临床分离hv KP的K1和K2型菌株被用于以下研究：SAL和NACft高黏液表型肺 炎克雷伯菌、CPSf成、K1和K2

5、基因表达、生物膜形成和对已形成的生物膜的 影响。结果:SAL可以明显降低细菌黏性和 CPSa度。止匕外，实时定量PC期析表 明,SAL下调了 CPS成基因的m RNAC平。而NACE不影响细菌黏度也不影响 CPS成基因的表达。SAL和NACffi可以 抑制生物膜形成并清除已成熟的生物。SAL在浓度为48%（5仙g/ml）和84%（100仙g/ml）时可以抑制生物膜形成，在浓 度12%（5仙g/ml）和浓度51%（100仙g/ml）时可以清除已成熟的生物膜。NACE浓 度为 9%和 26%（0.5 and 1 mg/ml） 时可以抑制生物膜的形成, 在浓度38%和 49%（0.5and 1 mg/ml） 时可以清除已成熟的生物膜。可见，比起抑制生物膜形成，NAC对成熟生物膜的消除作用占主导地位。SAL 和NAC®合应用对于抑制生物膜的合成和对成熟生物膜的消除作用有更加显著的效果。结论:SAL可以抑制hv KP菌株生物膜的形成但是对于已成熟生物膜的消除 作用较小