TLC常用试剂配制及显色方法

1、TLC常用试剂配制及显色方法常用试剂配制及显色方法（一）通用显色剂1.重倍酸钾一一硫酸一般有机物均能显色，不同化合物显示不同颜色。喷洒剂：5克重铭酸钾溶于100ml, 40%硫酸中。喷洒后加热至150oC斑点出现。2.碘：检查一般有机物（1）碘蒸汽：在一个密闭玻璃皿先放入碘片，使缸内空气被碘蒸气饱和将薄层或纸 层放入缸内数分钟即显色，有时在缸内放一盛水的小杯，增加缸内的湿度，可提高显色 的灵敏度。2 2） 0.5和典的氯仿溶液，取出挥发散过量的碘再喷瑞淀粉的水溶液，斑点转成蓝色。 3.碘一一碘化钾溶液：很我有机物虽黄色（配法见后）。4 . 5%一一磷钳酸乙醇溶液：喷后1200c烤，还原性物质显

2、兰色，再用氨气熏，则背 景变为无色。5 . 20与磷酸乙醇溶液：喷后120oC,还原性物质显兰色。6 .碱性高钵酸钾试剂：还原性物质在淡红背景上显黄色。溶液1:1%高钵酸钾溶液。溶液II： 5%碳酸钠溶液。溶液I和溶液II等量混合使用。7 .中性0. 05%高铳酸钾溶液：易还原性物质在淡红背景上显黄色。8 .硝酸银氢氧化链（Tollen' s-zoffaronl）试剂，喷后105oC烤510分钟,还原性物质显黑色。溶液I： 0.1N硝酸银溶液。 溶液II：氢氧化铉溶液。临用前溶液I和溶液n以L 5混合。注意：放久则形成爆炸性的叠氮化银。9.硝酸银一一高钵酸钾试剂：还原性物质在兰绿色背景

3、上立即显黄色。溶液I： 0.1N硝酸银溶液:2N氢氧化筱溶液:2N氢氧化钠（1： 1： 2） o临用前配制。 溶液H：高镒酸钾0.5g,碳酸钠1g,加水成100ml溶液，临用前溶液I和溶液II等量混10 .四理试剂：还原性物质，在室温或微加热时显紫色。溶液I： 0.5%四喋兰甲醉溶液。溶液n： 6N氢氧化钠溶液。临用前溶液I和溶液II等量混合。11 .铁制化钾：三氯化铁试剂：还原性物质显兰色，再喷射2WL盐酸溶液，则兰色 加深。溶液I:通铁瓶化钾溶液。溶液II： 2%三氯化铁溶液。临用前溶液I和溶液H等量混合。12 .浓硫酸：甲醇（1： 1）溶液，或5%硫酸的乙醵溶液，喷后100oC烤15分钟

4、，各 种不同物质显不同颜色。13 .萤光显色剂溶液：试喷以下一溶液，不同的物质财富在萤光背景上可能显黑色或 其他萤光斑点。A： 0. 2%2. 7一一二氯萤光素乙醇溶液。B： 0.01萤光素乙醇液C： 0.居桑色素乙醇溶 液D： 0. 05罗丹明B乙醇溶液E：萤光素一澳，检不饱和化合物。（1） 0.1%萤光素乙醇 溶液（2） 5驯臭的CCL4溶液。喷洒（1）以后，放置（2）溶液的缸内，可在UV光下检查萤光，萤光素与滨化合成 曙红（ensln）（无萤光），而光饱和化合物则与溟加成，保留了原来的萤光；若点样量 较多，则成黄色斑点，底板成红色。14 .碱式醋酸铅试剂（可做喷洒或沉淀试剂，多种有机化合

5、物均反应）。取Pbol4g置乳钵内，加蒸锵水10ml,研后成糊状后，倾入玻璃瓶中，乳钵用10ml蒸 储水洗净,洗液并入瓶中,加醋酸铅溶液（取醋酸铅22g,加蒸锵水70ml制成）70ml,用 力振摇，放置七天，滤过，并白滤器中添加适量新沸过的冷蒸饰水使成100ml即得。（二）生物碱显色剂通用显色剂：1 .改良碘化铅钾（Dragendorff）试剂：生物碱和某些含氯化合物显橙红色。溶液I: 碱式硝酸锂0.85g,溶于冰乙酸10ml和40mL溶液H：碘化钾0. 8g溶于水20ml.储存液：溶液I和溶液H等量混合（置棕色瓶中杨以长期保存）。显色剂：储存 1ml与冰乙酸2nli和水70ml混合，用前配制

6、。2 .碘化钳钾（碘钳酸）试剂，不同的生物碱显不同的颜色。10%六氯化钳酸溶液3ml 和水97ml混合，加6%碘化钾溶液100ml,混合均匀，临用前配制。3.碘一碘化钾（Wagner ）试剂：生物碱显棕褐色。碘1g和碘化钾10g溶于50ml水中，加热，加冰醋酸2ml用水稀释到100ml。4.改 良碘化钝钾：碘，碘化钾（1： 1）试剂：生物碱显紫棕色或灰黑色。5 .硫酸锦硫酸试剂（改良sonnensclein试剂）：喷后llOoC烤几分钟，不同的生物碱显不同的颜色。硫酸针i 0.1g悬浮于水4ml中，加三氯化乙酸1g,加热煮沸，放冷， 逐滴加入浓硫酸直到混浊消失为止。6 .碘化氯钾（vmayer

7、）试剂（沉淀试剂）：取HgCL2 （毒）1. 35g加蒸镭水60ml溶 解后，量取碘化钾5g,加碘饰水10ml使溶解将两液混合，加蒸馈水稀释使成100ml即得。 7.硅鸨酸（Bertrand）试剂（沉淀试剂）：5g硅铝酸溶于100ml蒸储水中，加稀盐酸使 呈酸性反应即得。（三）强心甘显色剂1.碱性3. 5一二硝基苯甲酸试剂：强心苜显紫红色、几分钟后褪色。2%3.5一一二 硝基苯甲酸甲醛溶液与2N氢氧化钾溶液，用前按劳1： 1混合。2.碱性三硝基苯：在浅 橙色背景上显橙红色。溶液谷间三硝基苯100mg°溶于二甲基甲酰胺401nL加浓HCL34滴，加水至100ml, 避光能长期保存。溶液

8、II： 5%碳酸风溶液先喷溶液I,再喷溶液口,喷后90103.0oC烤5分钟。3.三氯乙酸试剂：喷后llOoC烤710分钟，紫外光下观察萤光。试剂I： 25%三氯乙酸的乙醇或氯仿溶液，配制后可放置数日。或用试剂II：上述乙 醇溶液用前每10ml加过氧化氢溶液4滴或新配3与氯钺T水溶液按4： 1混合。4.三氯化 睇试剂：喷后100oC烤5分钟，日光下或紫外光下观察。25%或饱和的三氯化锦氯仿溶液。 5.磷酸一一澳试剂溶液I： 10与磷酸溶液。溶液口：浪化钾饱和溶液：25%盐酸溶液（1： 1： 1） °薄层用溶液I喷洒后，在1250c烤12分钟（薄层太湿时则烤的时间可适当延长），在紫 外

9、光下观察一次，将薄层再烤热，趁热喷溶液H,再在紫外光下观察。6. KellerKllianl试剂：（检查a去氧糖）试液:100ml冰HAC和FeCL3试液0. 5ml混匀，试样1ml混匀。试样1ml加试液2ml 溶解后，沿试管壁滴入浓硫酸2接触面即显棕色。渐变浅绿，兰色。最后HAC层全部染成 兰色。（四）黄酮甘显色剂黄酮类成份在紫外光下大多显出不同颜色，用氨熏，喷三氯化铝溶液或喷氢氧化钠等 碱性溶液，则颜色变深或变色。1.氨气2 . 10%氢氧化钠或氢氧化钾溶液。3.遇或5%碳酸钠溶液。4. 1%或5*三氯化铝乙 醇溶液。5. 2%乙酸镁甲醇溶液。6 .饱和三氯化锌的氯仿溶液，100oC烤5分

10、钟。以上六种试剂在喷前喷后将薄层置 日光与紫外光下观察。7.2%三氯化铁乙醇溶液。8.居中性乙酸铅或碱式乙酸铅溶液。 9. 0. 1N硝酸银溶液。10 .铁制色钾一一三氯化铁试剂。溶液I： 2用铁制化钾溶液。溶液H： 2%三氯化铁溶液。临用前溶液I与溶液II等量混合。11 .硼氢化钾试剂：双氢黄酮化合物显红、橙红色。溶液I：2%硼氢化钾（钠）异丙醇溶液，必须新鲜配制。溶液II：浓盐酸先喷I、 5分钟后放入盐酸蒸气槽内。12 . Shinoda试剂：在混有锌粉的硅胶薄层上喷盐酸，黄酮醇显红紫色。制备硅胶薄 层时，加入2%w/w锌粉混合，薄层展开后盐酸溶液，如展开剂为酸性，可在展开后先喷 锌一一丙

11、酮混悬液，再喷盐酸溶液。罗丹明一一氨试剂。溶液I： 0. 1%罗丹明B的4%盐酸溶液。溶液II：浓氨溶液。先喷溶液I，然后再将薄层放入氨汽槽内。14.对氨基苯磺酸试剂。溶液I：对氨基苯磺酸盐溶液。溶液II： 5%亚硝酸钠溶液。将对氨基苯磺酸0. 3g溶液对8%盐酸溶液100ml中，到紫溶液25ml用冰冷却，加预冷 的溶液Hl. 5mL15 .硼酸柠檬酸试剂溶液L饱和硼酸的丙酮溶液。溶液II：柠檬酸丙酮溶液。先喷溶液I,再喷溶液H。16 .福林试剂（Folin Ciocalteu 试剂）铝酸钠10g和钳酸钠2. 5g溶于70ml水中，再缓缓加85%磷酸5ml和浓盐酸10ml,将 混合液回流煮沸1

12、0小时，然后加硫酸锂15g,水51nl及澳1滴，再回去流煮沸15分钟， 所得溶液冷却后移置100ml溶量瓶中并用水稀释到刻度（贮备液），溶液应不显绿色。 溶液I： 20%碳酸钠溶液。溶液口：临用前上述贮备液1份用水三分稀释。先喷溶液I，稍干再喷溶液II。（五）皂甘灶显色剂17 2谕磷钳酸乙醇溶液：喷后在140oC加热5ro分钟皂甘元均呈深兰色。18 三氯化睇浓盐酸或氯仿溶液：喷后在90oC烤10分钟（应在通风厨中进行），不 同的皂昔元在可见光或紫外光下显出各种颜色。19 硫酸：甲醇（1： 2）溶液，喷后加热，不同的皂仃元可显红褐色、紫色、黄色或 黑色，所显颜色与温度无关。20 氟磺酸：乙酸（1

13、： 1）溶液，喷后130oC加热5分钟。各种皂甘元可显天兰紫、 粉红、淡棕等色，在紫外光下也显不同萤光。21 碘蒸汽：薄层置于碘蒸汽筒中，皂行无皆显棕黄色斑点。22 三氯快乙酸或三氯乙酸：乙酸（1： 2）溶液，喷后在lOOoC加热20分钟皆显黄色。 7. 2%血球生理盐水混悬液（溶血试验、检皂苜）。取新鲜免血（由心脏或静脉取血）适量，用洁净小毛刷迅速搅拌除去纤维蛋白，并用 生理盐水反复离心洗涤至上清液无色后，量取沉降红血球（可以管的离心管通接读取）用 生理盐水配成2%混悬液贮冰箱内备用（贮存期23天）。（六）葱醍甘显色剂慈醍及其首本身在日光下显黄色，在紫外光下则显黄，红橙色萤光。在薄层上用氨熏 或喷氢氧化钾与碱溶液，则颜色变深或变色。1.氨气23 10%氢氧化钾、甲醇溶液。3