各种培养基的制作方法

1、配方一萨氏（Sabouraud's）培 养基蛋白月东10克 琼脂20克 麦芽糖40克水1000毫升先把蛋白月东、琼脂加水后，加热，不断搅拌，待琼脂溶解后，加入 40克麦芽糖（或葡萄糖），搅拌，使它溶解，然后分装，灭备用O1. 营养肉汤培养基牛肉膏0.3克蛋白月东10克NaCI 0.5 克水100毫升pH 7.0 -7.2在烧杯中加水，称取牛肉膏、蛋白月东和NaCI,加热溶化后，调节pH值至7.07.2。分装，加棉塞，高压蒸汽灭菌即成。常用于培养细菌。2. 营养琼脂培养基在营养肉汤培养基中增加 20克琼脂即成。常用于培养细菌。3. 肉汁蛋白月东液体培养基牛肉500克蛋白月东10克NaCI

2、 5 克pH 7.1 -7.2取新鲜牛肉500克，去净脂肪、筋腱后，绞碎或剁碎，加水1000毫升浸泡，15C下放置12小时或50C下放置半小时。用纱布将肉汁过滤，补足失水。向肉汁中加入蛋白月东和食盐。将肉 汁加热，放入苏打（碳酸钠）至红色，调整pH值。分装，高压蒸汽灭菌。将上述已灭菌的培养基用棉花滤去凝集的蛋白质，制成液体培养基，如需制成固体培养基，可在每100毫升液体中加入2克琼脂，加热溶化后，分装，再次进行高压蒸汽灭菌。常用于培 养细菌。4. 高氏一号培养基（淀粉琼脂培养基）可溶性淀粉2克KsHPO 0.05 克MgSQ 7f0 0.05 克KNOO.1 克NaCI 0.05 克FeSQ

3、0.001 克琼脂2克水100毫升pH 7.2 -7.4在烧杯中加水95毫升，加热至沸腾，取可溶性溶粉2克，用5毫升水调成糊状，倒入沸水屮和匀。再称取其它药品，陆续加入烧杯内（待一种药品溶解后，再加入第二种药品）待全部药品溶解后，停止加热，补足失水，调 pH值至7.27.4。分装后，高压蒸汽灭菌。 本培养基常用于培养放线菌。5. 马铃薯蔗糖培养基马铃薯200克蔗糖10克琼脂20克水1000毫升自然pH称取200克马铃薯片，加水1000毫升，煮沸半小时，用纱布过滤，补足失水。在上述滤汁屮加 入10克蔗糖、20克琼脂，加热使琼脂熔化。分装后，高压蒸汽灭菌。常用于培养酵母菌。6. 麦芽汁培养基将从啤

4、酒厂买来加有啤酒花的麦芽汁，装入锥形瓶中，加塞高压蒸汽灭菌。常用于培养酵母菌。7. 察氏培养基NaNQ2 克&HPQ1 克KCI 0.5 克MgSQ0.5 克FeSQ 0.01 克蔗糖30克琼脂15-20克水1000毫升自然pH分装，加棉塞，高压蒸汽灭菌。常用于培养霉菌。8. 豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）培养基黄豆芽100克葡萄糖50克琼脂15克水1000毫升称取新鲜黄豆芽100克，放入烧杯中，加1000毫升水，煮沸30分钟，用纱布过滤，补足失 水。再加葡萄糖（或蔗糖）50克，琼脂15克，加热至融化，补足失水。分装，加棉塞，高压蒸汽灭菌。常用于培养霉菌。9. 伊红美蓝培养基（E、MB培养基）

5、乳糖10克蛋白月东5克NaCI 5 克&HPQ2 克2%尹红水溶液20毫升0.35%美蓝水溶液20毫升琼脂20克水1000毫升pH 7.21. 配制溶液向容器内加入所需水量的一部分， 按照培养基的配方，称取各种原料，依次加入使其溶 解，最后补足所需水分。对蛋白月东、肉膏等物质，需加热溶解，加热过程所蒸发的水分，应 在全部原 料溶解后加水补足。再将称好的琼脂加入，继续加配制固体培养基时，先将上述已配好的液体培养基煮沸, 热至完全融化。并不断搅拌，以免琼脂糊底烧焦。2. 调节pH值用pH试纸（或pH电位计、氢离子浓度比色计）测试培养基的 pH值，如不符合需要，可用10%HCI或10%NaQ

6、进行调节，直到调节到配方要求的 pH值为止。3. 过滤用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。用纱布过滤时，最好折叠成六层，用滤纸过滤时，可将滤纸折叠成瓦棱形，铺在漏斗上过滤。4. 分装已过滤的培养基应进行分装。如果要制作斜面培养基，须将培养基分装于试管中。如果 要制作平板培养基或液体、半固体培养基，则须将培养基分装于锥形瓶内。分装时，一手捏松弹簧夹，使培养基流出，另一只手握住几支试管或锥形瓶，依次接取培养基。分装时，注意不要使培养基粘附管口或瓶口，以免浸湿棉塞引起杂菌污染。装入试管的培养基量，视试管和锥形瓶的大小及需要而定。一般制作斜面培养基时，每只15X 150毫米的试管，约装34毫升

7、（1/4-1/3试管高度），如制作深层培养基，每只20X 220 毫米的试管约装12-15毫升。每只锥形瓶装入的培养基，一般以其容积的一半为宜。5. 加棉塞分装完毕后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是过滤空气，避免污染。棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作，不要用脱脂棉，以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。制作棉 塞时，要根据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度，揪取手掌心大小一块，铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中，用右手食指插入棉花屮部，同时左手食指与姆指稍稍紧握，就会形成1个长棒形的棉塞。棉塞作成后，应迅速塞入管口或瓶口中，棉塞应紧贴内壁不留缝隙，以防空气中 微生物沿皱折侵入。棉塞不要过紧过松

8、，塞好后，以手提棉塞、管、瓶不下落为合适。棉塞的2/3应 在管内或瓶内，上端露出少许棉花便于拔取。塞好棉塞的试管和锥形瓶应盖上厚纸用绳捆札，准备灭菌。6. 制作斜面培养基和平板培养基培养基灭菌后，如制作斜面培养基和平板培养基，须趁培养基未凝固时进行。（1）制作斜面培养基。在实验台上放1支长0.5-1米左右的木条，厚度为1厘米左右。将试管头部枕在木条上，使管内培养基自然倾斜，凝固后即成斜面培养基。(2)制作平板培养基。将刚刚灭过菌的盛有培养基的锥形瓶和培养皿放在实验台上，点燃酒精灯，右手托起锥形瓶瓶底，左手拔下棉塞，将瓶口在酒精灯上稍加灼烧，左手打开培养皿盖，右手迅速将培养基倒入培养皿中，每皿约倒入10毫升，以铺满皿底为度。铺放培养基后放置15分钟左右，待培养基凝固后，再 5个培养皿一叠，倒置过来，平放在