HPLC法测定奥美拉唑的血药浓度

1、    HPLC法测定奥美拉唑的血药浓度        摘要目的：建立人血浆中奥美拉唑(OME)浓度的HPLC测定方法。方法：以格列哔嗪为内标，乙腈磷酸盐缓冲液(0.02 mol.L1磷酸二氢钾，pH3.5)(30：70)为流动相，检测波长302 nm。结果：OME与内标分离良好，血浆中平均回收率为106.17%，日内、日间RSD小于10%，浓度在204000 ng.ml1范围内线性关系良好。结论：本法灵敏度高，专一性强，血样提取简便，适于临床血药浓度监测的要求。关键词奥美拉

2、唑；HPLC法中分类号：R917文献标识码：B文章编号：1006-0103(2000)03-0209-02 奥美拉唑(omeprazole,OME)是一种高效抑制胃酸分泌药物。现建立了反相HPLC法测定人血浆中的OME浓度的方法。1材料与方法1.1仪器、药品与试剂美国Waters公司HPLC系统，包括510泵，484紫外检测器，TC9300色谱数据工作站，U6K进样阀；高速离心机(北京医疗设备厂)；液体快速混合器(江西医疗器械厂)。OME对照品(扬州制药厂)；格列哔嗪对照品(GB，北京四环制药厂)；市售奥美拉唑注射剂(瑞典Astra公司，商品名洛赛克，批号199805，每支40 mg)。乙腈(

3、色谱纯，Fisher Chemicals)；磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、甲醇、二乙胺、叔丁基甲醚等均为分析纯；正常人空白血浆(307医院血站)。1.2实验方法1.2.1 色谱条件色谱柱为美国Waters Bondapak ODS柱(10 m，3.9 mm×150 mm)。流动相为乙腈磷酸盐缓冲液(0.02molL1磷酸二氢钾，pH3.5)(3070)。流速为1.0 mlmin-1，灵敏度为AUFS0.01，检测波长302 nm，柱温25。1.2.2对照溶液及内标液的配制分别精取OME和GB标准品各5 mg，用甲醇溶解，使成浓度为1 mgml1的标准贮备液，置-20冰箱冷冻备用。另取GB标

4、准贮备液(1 mgml1)用水稀释成40 gml1作为内标液，置4冰箱冷藏备用。1.2.3血浆样品的提取与测定精取血样1 ml于10 ml试管中，加内标液100 l，摇匀后加磷酸二氢钠缓冲液(pH=7)600 l，摇匀，加提取液叔丁基甲醚3 ml，旋涡混合1 min，离心10 min(3 000rmin1)，取有机相于尖底刻度试管中，于37水浴中氮气流吹干。加入50200 l流动相富集，进样210l。测得OME与内标峰高之比，根据标准曲线方程计算血浆中OME浓度。色谱见1。1空白血浆(A)与样本血浆(B)色谱奥美拉唑tR4.333min，内标tR6.909min2结果2.1标准曲线的制备精取O

5、ME标准贮备液(1 mgml1)，分别加水稀释至浓度为1000 ngml1和100 gml1的对照溶液A和B。另取10 ml试管，分别加入A液20、60、100、200、400 l，B液6、10、15、20、40 l及空白血浆1 ml，使其终浓度分别为20、60、100、200、400、600、1000、1500、2000、4000 ngml1，按血浆样品相同方法提取与进样分析。求出OME与内标峰高比(R)对OME浓度(C)的回归方程。结果表明，OME血浆浓度在204000 ngml-1范围内线性关系良好，标准曲线方程为C=203R+7.88，r=0.9987(n=10)。2.2回收率和精密度

6、2.2.1回收率按“2.1”法用OME对照贮备液配制成浓度为60、600、2000 ngml1的血浆样品各5份，按样品测定方法从标准曲线求得血浆浓度，计算回收率及RSD(%)，结果见表1。表1OME回收率试验(n=5)加入量ngml1测得量/ngml1回收率/%(±s)RSD/%20002346.44117.32±7.666.53600641.24106.87±9.198.606056.6094.33±12.5013.252.2.2精密度按上法配制浓度为60、600、2000ngml1的血浆样品，于1日内不同时间及连续5日内测定，求得日内、日间回收率、R

7、SD(%)，结果见表2。 表2OME日内、日间精密度结果(n=5)加标量ngml日内日间测定量平均回收率/%RSD/%测定量平均回收率/%RSD/%20002135.88106.793.742128.70106.448.91600649.28108.218.90641.24106.875.606054.8791.459.0755.6092.679.753讨论 3.1现建立了HPLC法测定OME血浆药物浓度，方法简便、灵敏度高，最低检测浓度可达20 ngml1，每次测定需血样0.51 ml，适用于药代动力学及血药浓度监测的需要。3.2奥美拉唑在碱性条件下稳定，在酸性环境极易分解。为避免血浆中提取的OME分解，经提取后的残渣宜在进样前再加流动相溶解。如果过早富集，则影响测定结果。3.3本法以叔丁基甲醚为提取溶剂，易于分离、提取率高，并可减少血浆中杂质干扰，优于文献报道的提取方法1。作者简介：刘丽萍(1963-)，女，副主任药师，从事医院药学、临床药学工作。刘丽萍（北京解放军302医院药学部，北京 100039）魏振满