实验三、细菌芽孢及荚膜染色观察._第1页
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文档简介

1、实验三细菌芽砲及荚膜染色观察一、实验目的：1学习并掌握芽抱及英膜的染色方法；2、初步了解芽抱杆菌及细菌英膜的形态特征.二. 实验原理：芽葩是某些细菌生长到一定阶段在g体内形成的休H民体, 通常呈圆形或椭圆形.细菌能否形成芽砲以及芽葩的形状、芽 葩在芽葩囊内的位i,芽葩囊是否膨大等特征是鉴定细菌的依 据之一。由于芽抱壁厚、透性低、不易着色，用石碳酸复红、结晶 紫等进行单染色时，®体和芽葩囊着色，而芽葩囊内的芽葩不 着色或仅显很淡的顏色，游高的芽范呈淡红色或淡蓝紫色的圆 形或椭圆形的圈，为了使芽葩着色便于观察，可用芽范染色法.芽葩染色的原理是：用弱磁性染色剂孔雀绿，在加热条件 下染色，使

2、染料不仅进入菌体也可进入芽抱内，进入菌体的染 料经水洗后被脱色，而芽抱一经着色难以被水洗脱，当用对比 度大的复染剂染色后，芽抱仍保留初染剂的颜色，而菌体和芽 抱囊枚染成复染剂的颜色，使芽抱和茵体更易于区分.英膜是包围在某些细菌细胞外的一层粘液状物质，其成 分为多糖.糖蛋白或多肽.由于英膜与染料的亲和力弱，不易 着色，易在用水冲洗时被除去，所以通常用衬托染色法染色， 使菌体和背景着色，而英膜不着色，在菌体周围形成一透明圈, 由于英膜含水童高，制片时通常不用热固定，以免变形影响观 察.三、实验材料:g 种：苏云金芽抱杆菌.钾细菌染色剂：5%孔雀绿水溶液，0.5%番红水溶液;石炭酸复红，黑色素等四、

3、实验方法：一）、芽匏染色1、制片（涂片-干燥-固定）2、染色加数滴孔雀绿染液于涂片上，用木夹夬住栽玻片一端， 在微火上加热至染料冒蒸气并开始计时，维持Smin （其间补 充染液防蒸干）3.4、缓流水洗复染用番红染液复染2分钟.5.6、缓流水洗.干燥镜检；用油镜观察（芽抱呈亮绿色，菌体呈红色）凿体二）、荚膜染色1、制片：取一滴无菌水于载玻片上，用接种环取钾细菌在 水滴中，制成涂片，晾干.2.染色：用石碳酸复红染色液染色3-4分钟，用水轻轻冲洗, 晾干.3、刮片：在玻片一端加一滴黑色素，另外取一块干净的栽 玻片与黑色素接触，将黑色素在涂片上轻轻刮过，形成一薄 层，自然干燥.4镜检：菌体呈红色，英膜无色，背景灰色./钾细菌菌体五、实验结果;1、绘图表示芽抱杆菌的形态特征.2、绘图说明你所观察到的细菌的菌体和英膜的形态.思考题:1、为什么芽葩染色要加

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