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文档简介
1、1.(15分)犬细小病毒(Canine Parvovirus,CPV)主要感染幼犬,传染性极强,死亡率极高。犬细小病毒单克隆抗体(CPV McAb)可抑制病毒对宿主细胞的侵染及病毒的复制,进而杀灭犬体内病毒。请回答:(1)在单克隆抗体CPV McAb的制备过程中,所用到的细胞工程技术了有 和 技术。(2)给成年鼠注射CPV ,一段时间后,若鼠血清中抗 的抗体检测呈阳性,说明体内产生了 (填体液或细胞)免疫反应。(3)将小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,获得能分泌CPV McAb的杂交细胞的过程中至少要进行两次筛选,一次是通过 培养基筛选出杂交细胞,另一次是通过 筛选出能分泌CPV McAb的杂
2、交细胞。(4)诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合最常用的方法是 ;对杂交细胞进行培养时,需要_的环境,及营养、温度、pH和 环境适宜的条件。(5)通过上述方法得到的单克隆抗体可快速准确地识别CPV ,其原因是该抗体具有 的特点2. 下图为利用生物技术生产单克隆抗体和经体外受精培育优质奶牛的过程。请回答下列问题: (1)细胞A的形成过程中常用的生物诱导因素_。(2)体外培养杂交瘤细胞的条件包括:无菌无毒的环境、营养、_和气体环境。(3)在I图制备单克隆抗体的过程中,主要应用了_和_两个生物技术。(4)单克隆抗体与常规的血清抗体相比,其最大的优越性是_。(5)过程优质奶牛的培育
3、过程需要进行胚胎移植,胚胎移植可利用激素对供体和受体进行_处理,使受体处于合适的生理状态。收集得到的胚胎要进行检查,培养至_阶段,移植后的胚胎能在受体子宫中存活,其生理基础是_。(6)若要同时获得多头与此优质奶牛相同的小牛,可对中囊胚进行_,该过程需要特别注意的是_。此技术可以看做是动物_繁殖。3. 2013年l2月20日,美国细胞杂志发布,中国科研团队在国际上率先完成了“单个卵细胞的高精度基因组测序”,该技术或可将试管婴儿的活产成功率从30提至60,并检测与遗传疾病有关的DNA序列变异,降低帕金森氏综合症等疾病遗传到下一代的风险。(1)“试管婴儿”技术与克隆人本质的区别是前者为_生殖方式。(
4、2)获得“试管婴儿”需要胚胎工程的技术有_、_和胚胎移植等。胚胎移植通常要将胚胎培养到_阶段。理论上要得到“同卵双胞胎”,采用的技术是_。(3)在医学卜可用_细胞来治疗帕金森氏综合症。该细胞是由_中分离出来的一类细胞。(4)现在大多数人反对设计试管婴儿,其原因是_。4. 人类在预防与诊疗传染病的过程中,经常使用疫苗和抗体。已知某种传染病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白质为主要抗原,其疫苗生产和抗体制备的流程如下图所示,请分析回答:(1)图中所示基因工程的核心步骤是 。(2)若将含有A基因的受体细胞在体外培养,必须满足无菌无毒、营养、 、气体环境等条件,才能使细胞大量增殖;若受体细胞是受
5、精卵,则需将其在体外培养到 时期,然后进行胚胎移植,培育成转基因动物。(3)过程采用的实验技术是 ;获得的X是 。(4)科学家欲对抗A蛋白的单克隆抗体进行改造,生产出效果更好的嵌合抗体,用于癌症治疗。用蛋白质工程技术对抗A蛋白的单克隆抗体进行改造时,首先必须根据预期 ,设计 ,最终通过基因拼接,将抗体基因改造成嵌合抗体基因,然后导入到淋巴细胞中表达。(5)检测该基因在淋巴细胞中是否翻译成蛋白质,可用 技术。与基因工程相比较,蛋白质工程产物具备的特点是 : 。要改造蛋白质结构,最终是通过改造基因来实现的。请说明原因: 。5. 随着科学的发展,现代生物技术已经广泛应用于社会生产的方方面面,请回答下
6、ytJ,fH关问题:(1)植物组织培养技术不仅可以保持优良品种的_,还可以高效快速的实现种苗的大量繁殖。若想获得脱毒苗,可以切取一定大小的_等进行组织培养。(2)科学家利用植物组织培养技术与_技术结合,培育出抗虫棉。这一过程中,获取目的基因常用的方法有_、利用PCR技术扩增、还可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便合成_,若扩增循环四次共需引物_个。(3)培育抗虫棉,需获得抗虫基因,需提取DNA,科学家常利用DNA在_中溶解度不同来提取它,在沸水浴条件下_可作为鉴定DNA试剂。6.(15分)将动物致病菌的抗原基因导入
7、马铃薯制成植物疫苗,饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图示。请根据图示回答下列问题。(1)图2示意的是采用_技术扩增目的基因的过程中,此过程需要使用一种不同于一般生物体内的酶_。(2)图1步骤是_,所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列_(有/没有)专一性要求。重组质粒必须具有的结构除目的基因外还必须有_,_,_。(3)图1步骤是_,此步骤所用的细菌B通常为_。(4) 对符合设计要求的重组质粒T进行酶切,假设所用的酶均可将识别位点完全切开,请根据图1中标示的酶切位点,对以下酶切结果作出判断。 采用EcoRI和PstI酶切,得到_种DNA片段。 采用Eco
8、RI和SmaI酶切,得到_种DNA片段。7. 材料甲:科学家将药用蛋白基因导入母牛的受精卵中,可以在奶牛分泌的乳汁中生产所需要的药品,因而称为乳腺生物反应器。 材料乙:某DNA聚合酶在温度较高时易失去活性,科学家对编码该酶的基因进行改造,使其表达的DNA聚合酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸,在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键,提高了该DNA聚合酶的耐热性。 材料丙:干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。它包括胚胎干细胞和成体干细胞。干细胞的发育受多种内在机制和微环境因素的影响。目前人类胚胎干细胞已可成
9、功地在体外培养。最新研究发现,成体干细胞可以横向分化为其他类型的细胞和组织,为干细胞的广泛应用提供了基础。回答下列问题:(1)资料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入奶牛的受精卵中常用_法。科学家将药用蛋白基因与_等调控组件重组在一起;培育转基因牛的核心步骤的完成是在细胞_(内或外)。(2)资料乙属于_工程范畴。该工程是指以分子生物学相关理论为基础,通过基因修饰或基因合成,对_进行改造,或制造一种_的技术。(3)资料丙属于胚胎工程的范畴。胚胎干细胞属于胚胎工程的重要应用,胚胎干细胞是由囊胚期的_或_分离出来的一类细胞,在体外培养的条件下可以增殖而不分化,如果在培养液中加入_,就可以诱导ES
10、细胞向不同类型的组织细胞分化。8. 克隆猪成功率较低,与早期胚胎细胞的异常凋亡有关。Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因,用PCR技术可以检测该基因转录水平,进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图。请回答:(1)图中过程采用的技术手段称做 技术。克隆猪的成功培育说明
11、160; 。(2)过程所用技术为 ,所用的培养液与植物组织培养的培养基从成分上主要区别是前者必须含有
12、0; 。(3)在PCR过程中可检测出cDNA中Bcl-2 cDNA的分子数,进而计算总mRNA中Bcl-2mRNA的分子数,从而反映出Bcl-2基因的转录水平。图中X表示 过程。在PCR反应体系中应包含的主要成分有扩增缓冲液、4种脱氧核苷酸、模板DNA以及
13、0; 、 。PCR扩增过程第一轮循环的模板是 。9. 请结合所学知识回答下列问题:I通过基因工程培育转基因动物时,需将基因表达载体通过_技术导入受体细胞,常用的受体细胞是_,极大地限制了基因的操作。II目前,我国科学家已成功地建立了小鼠哺乳动物单倍体胚胎干细胞系,这些干细胞可以替代精子或
14、卵子完成受精和胚胎发育,产生健康小鼠,为基因操作找到了新的途径。下图为科学家利用小鼠单倍体胚胎干细胞培育转基因动物过程,请据图回答:(1)单倍体胚胎干细胞取自囊胚的_,和生殖细胞相比,单倍体胚胎干细胞在体外培养的条件下,可以_。(2)在过程中,科学家可能采用两种策略来获得小鼠的孤雄单倍体胚胎:方法一是将受精后获得的受精卵的_去除,方法二是向_中注射成熟精子的头部。(3)过程用到的技术是_,早期胚胎能够在受体内存活的主要生理学基础是_。10. 回答下列有关问题: (1)哺乳动物的卵子发生是在雌性动物的卵巢内完成的。卵原细胞演变为初级卵母细胞并依次经过两次分裂,减数第一次分裂是在_前后
15、完成的,减数第二次分裂是在_过程中完成的。当观察到卵细胞膜与透明带之间有_时,说明卵子已受精。_是防止多精入卵的第一道屏障。 (2)哺乳动物卵泡的形成和在卵巢内的储备,是在完成的,这是精子和卵子在发生上的重要区别。刚排出的精子不能立即与卵子结合,必须在雌性动物的生殖道内发生相应生理变化后,才具备受精能力,这一生理现象叫做_。 (3)体外受精是对体内受精的模拟操作,首先对实验动物用_处理,使其排出更多的卵子,待精子获能后,可以在_或者专用受精溶液小滴中完成受精。 (4)精卵体外受精后,应将受精卵移人发育培养液培养,它的成分比较复杂,除了一些无机盐和有机盐类外,
16、还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸、_等物质。 (5)对于“试管动物”的正确理解是_。 A属于无性生殖 B属于有性生殖 C体外受精 D体内受精 E体外发育
17、 F体内发育 G运用基因工程技术 H运用细胞工程技术11. 胚胎工程技术包含的内容很丰富,如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况,其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛,供体2是黄牛,请据图回答下列问题。(I)试管动物和克隆动物的培育过程中均会用到的生物技术有_、_。(2)进行胚胎移植的优势是可以充分_。在这项技术中,供体的主要职能变为只产生_,繁重而漫
18、长的妊娠和育仔任务由受体取代,这就大大缩短了供体本身的繁殖周期。(3)应用2中牛完成体内受精的场所是_,刚种植在子宫内的胚胎其发育程度一般为_,胚胎种植后可以通过_从母体获得正常发育所需要的物质。(4)应用3中细胞C、D分别取自_、_。(5)若想进一步提高胚胎的利用率,可通过应用4的方案,采用_技术。(6)请列举一例克隆技术在医疗方面的应用_。12. 回答动物细胞工程的相关问题:(1)动物细胞原代培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成_,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。分散的细胞在培养瓶中_生长,细胞只能在培养瓶中铺展成_层。(2)贴满瓶壁的细胞需要用_处理,分瓶继续培养,这
19、样的过程称为_。目前使用的冷冻保存的细胞通常为_代以内,以保持细胞正常的二倍体核型。(3)一个B淋巴细胞分泌_种抗体,要制备大量抗体必须克隆单一的B淋巴细胞形成细胞群。B淋巴细胞要想体外大量增殖需要与骨髓瘤细胞进行融合,用特定的_进行筛选得到杂交瘤细胞,再做_检测获得_细胞。13. 抗冻蛋白是一类抑制冰晶生长的蛋白质,能降低水溶液的冰点,从而导致水溶液的熔点和冰点出现差值,这个温度差称为热滞值。昆虫抗冻蛋白的热滞值最高,为36,鱼的热滞值为0.71.5,因此,昆虫抗冻蛋白在实际应用上具有更大的潜力。为了扩展一些植物的生存范围,科学家利用昆虫抗冻蛋白(AFPS)的异源表达,现已成功地提高了烟草的
20、抗冻能力。请分析回答相关问题:(1)基因工程的核心步骤是_,这一过程需要的酶是_。将AFPS基因导人烟草细胞中,常用_法,这是因为烟草属于_ (单双)子叶植物,当植物体受到损伤时,伤口处的细胞会分泌大量的_,此操作过程中使用的运载体是_。(2)若检测AFPS基因是否整合到烟草的染色体上,一般采用_技术,若检测是否产生抗冻蛋白,一般采用_方法检测杂交带;还可以从_生物学水平进行抗冻鉴定。(3)生产上可将上述转基因烟草大范围种植,提高了农民的经济收入,从生态工程角度分析,主要体现了_原理。14. 普通番茄属双子叶茄科植物其细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因,控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶,该酶能破坏细胞
21、壁,使番茄软化,不耐贮藏。科学家们通过基因工程技术,培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种,操作流程如图。请据圈回答:(1)在番茄新品种的培育过程中,将目的基因导入受体细胞最常用的方法是_。筛选出含重组DNA的土壤农杆菌时通常依据质粒上的_的表达。(2)为促使图中、过程的顺利完成,需要向培养基中加人的植物激素主要有_和_。并需要在_条件下进行。(3)要短时间得到更多的转基因抗软化番茄植株,目前常用的技术方法是_。要想获得这种番茄的脱毒苗,应用其_进行培养。(3)除了图示培育方法外,还可通过蛋白质工程技术,对_进行定向改造,从而获得抗软化的番茄品种。(4)为防止转基因番茄通过花粉将抗多聚半乳糖醛
22、酸酶基因传播给其它植物而造成基因污染,可将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导人番茄植物细胞的_ (结构)中。15. 下图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。请据图回答下列问题:(1)生产单克隆抗体的基础技术是_。制备单克隆抗体依据的基本原理列是_。(2)利用小鼠制备甲型HlNl流感病毒单克隆抗体的过程中,需先给小鼠注射一种纯化的H1N1流感病毒核衣壳蛋白,再从已免疫的小鼠脾脏中获得_。在过程中,常采用_诱导融合。再经过筛选最终可获得,该细胞群的特点是_。(3)若要大量制备单克隆抗体,可将细胞注射到小鼠的腹腔中使其增殖,再从_中提取、纯化获得单免隆抗体也可将细胞置于培养液中进行体外培养,在培养液中通常需加入
23、_等天然成分。(4)通过上述方法得到的单克隆抗体的优点是_。16.继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后,膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近,科学家培育出一种转基因小鼠,其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答:(1)将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞,常用方法是 。(2)进行基因转移时,通常要将外源基因转入 中,原因是 。(3)通常采用 技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。(4)在研制膀胱生物反应器时,应使外源基因在小鼠的 细胞中特异表达。(5)为使外源基因在后代长期保持,可将转基因小鼠体细胞的 转入 细胞中构成重组细胞,使其发育成与供体具有相同性状的个体。该技术称为
24、 。1.动物细胞融合 动物细胞培养CPV (2分) 体液免疫 (2分)选择(2分) 克隆化培养和抗体检测(抗原-抗体杂交)(2分)灭活的病毒 无菌无毒 气体 特异性强、灵敏度高(2分)2.(1)灭活的病毒(2)温度和PH(3)动物细胞融合 动物细胞培养 (4)特异性强,灵敏度高(2分)(5)同期发情 桑椹胚或囊胚(2分) 受体子宫对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应(2分) (6)胚胎分割(胚胎分割移植) 将囊胚的内细胞团进行均等分割
25、 (2分) 无性3. (1)有性生殖(2分)(2)早期胚胎培养(2分) 体外受精(2分) 囊胚或桑椹胚(2分)胚胎分割(2分)(3)胚胎干细胞(ES细胞、EK细胞)(2分 )早期胚胎或原始性腺(2分)(4)对生命不尊重,违反伦理道德(1分)4. (1)基因表达载体的构建(2分) (2)温度和pH(2分) 囊胚(或桑椹胚)(1分)(3)动物细胞融合(1分) 杂交瘤细胞(1分) (4)(嵌合)抗体的功能(1分) (嵌合)抗体的结构(1分)(5)抗原抗体杂交(2分) 可生产出自然界不存在的蛋白质(2分)改造基因操作更容易,且改造后可以遗传(2分)5. (1)遗传特
26、性(1分) 茎尖 (2)基因工程 从基因文库中获取 引物 30(3)不同浓度NaCL溶液 二苯胺6.(1)PCR;(1分) 热稳定DNA聚合酶(Taq酶);(2分)(2)基因表达载体的构建;(2分) 没有;(1分) 启动子,终止子,标记基因。(3分)(3)将目的基因导入受体细胞;(2分)土壤农杆菌。(2分)(4)2;(1分) 1 (1分)。7.(1)显微操作技术,乳腺蛋白基因启动子,外(2)蛋白质工程,现有蛋白质,全新的蛋白质(3)内细胞团(1分),原始性腺(1分),分化诱导因子(1分)8. (1)体细胞核移植 高度分化的动物细胞核具有全能性 (2)早期胚胎培养 动物(猪)血清 (3)逆转录 引物 TaqDNA聚合酶(耐高温DNA聚合酶) Bcl-2 cDNA (1分)9. I显微注射 受精卵(1分)II (1)内细
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