硫脂致敏的实验性变态反应性神经炎病理和电生理特点

1、硫脂致敏的实验性变态反应性神经炎病理和电生理特点摘要目的探讨硫脂诱导的实验性变态反应性神经炎病理和电生理特点。方法以硫脂免疫豚鼠，观察其周围神经电生理、病理及免疫细胞化学的变化。结果被致敏动物坐骨神经、脊神经根发生脱髓鞘改变，神经鞘膜IgG荧光沉积明显，有的同时伴有髓鞘再生，病损区CD11b+细胞显著增加而CD5+细胞增加不明显，坐骨神经传导阻滞及传导速度减慢。结论硫脂致敏的实验性变态反应性神经炎与慢性格林-巴利综合征更相似。关键词硫脂实验性变态反应性神经炎脱髓鞘豚鼠 The features of experimental allergicalneuritis immunized again

2、st sulfatideGuan Yangtai,Qin Zhen,Cao Xiaoding. Institute of Neurology,Shanghai Medical University,Shanghai 200040AbstractObjectiveTo investigate the features of experimental allergical neuritis immunized against sulfatide. MethodsGuinea-pigs were immunized with sulfatide,and their electrophysiology

3、 and pathology were compared with animals injected simple Freund,s adjuvant. ResultsDemyelination of peripheral nerves and immunoglobulin deposits at peripheral nerves myelin sheath were found in symptomatic animals only,the phenomenon of remyelination occured in a few of the animals. Inflammatory c

4、ellular infiltration was not obvious,but immunolabeling revealed the number of CDbll+ cells increased significantly in demyelinating areas. F-wave latency became prolonged with a fall in the amplitudes of the compound muscle action potential evoked by promixmal verus distal stimulation of the sciati

5、c nerves of symptomatic animals. ConclusionExperimental allergical neuritis immunized against sulfatide was similar to chronic GBS.Key wordsSulfatideExperimental allergical neuritisDemyelinationGuinea-pig诱导实验性变态反应性神经炎(Experimental allergic neuritis,EAN)的免疫原，从最初用整个周围神经组织匀浆来诱导EAN逐步发展到用周围神经髓鞘、P2蛋白、P2蛋白

6、特异性细胞株、从P2蛋白中提取的肽段及人工合成肽段等。我们的前期研究发现，相当部分的格林-巴利综合征(Guillain-Barre Syndrome,GBS)患者血清和脑脊液中存在高滴度的抗硫脂抗体1。这一结果启发我们用硫脂免疫动物，探讨硫脂诱导实验性变态反应性神经炎的可能性及其病理和电生理特点。1材料与方法22结果2.1一般形态学变化HE和Fast-blue染色及单神经纤维剥离术见动物免疫14周后，其周围神经有髓纤维明显减少，髓鞘广泛节段性脱失，严重者髓鞘崩裂(见1)，轴突损害及炎性细胞浸润不明显。透射电镜下：施旺细胞变性，胞质内空化，髓鞘板层松散，严重者髓鞘消失与轴突融为一体(见2)，破坏

7、的髓鞘被吞噬细胞分解、吸收。1例脊神经根中可见淋巴细胞浸润。有的粗神经纤维轴突表面包绕着薄的发育尚不成熟的髓鞘(见3)。对照组电镜下无病理变化。1髓鞘呈节段性脱失。(400)2一轴突髓鞘完全脱失。(6000)3部分神经轴突表面包绕着薄的再生髓鞘(4000)2.2免疫荧光在症状明显的动物脊神经根、坐骨神经的神经鞘膜有强荧光沉积(见4)，对照组神经鞘膜无荧光沉积。4致敏动物神经鞘膜有强荧光沉积。(400)2.3免疫细胞化学坐骨神经、腰神经根中CD11b+细胞均显著增加，而CD5+细胞增加不明显(见表1)。表1硫脂致敏豚鼠病损区CD11b+及CD5+细胞变化致敏组对照组CD11b+细胞CD5+细胞C

8、D11b+细胞CD5+细胞坐骨神经腰神经根3.40.61*3.71.10.280.090.320.10.170.050.120.080.160.070.210.1与对照组相比*P0.05,P0.012.4电生理检查与对照组相比，动物免疫14周后。下肢近远段的肌肉复合动作电位(CAMP)的波幅比值显著降低、运动神经传导速度(MNCV)明显减慢，F波的潜伏期明显延长(见表2)。表2硫脂致敏豚鼠坐骨神经的电生理变化组别例数运动神经传导速度(m/s)F-波潜伏期(ms)近远端波幅比值对照组致敏组81354.62.535.85.8?6.70.311.41.8*0.80.10.40.2*与对照组相比*P0

9、.013讨论硫脂是硫酸与脑苷脂的半乳糖3-羟基形成的酯，是周围神经组织中的重要酸性鞘糖脂之一，其在周围神经组织中的含量是神经节苷脂GM1的100倍以上3。在一些与免疫异常有关的神经系统疾病中，鞘糖脂可能作为抗原参与其发病机制4。Stoll等2用从牛的中枢神经组织中提取的半乳糖脑苷甙或GM1作为致敏原免疫动物曾诱导出典型或不典型的EAN，提示鞘糖脂可能是一种致敏原，但到目前为止尚未见用硫脂诱导EAN的研究报道。本研究中，从Fast-blue、HE及单神经纤维剥离切片看，颈神经根、腰神经根及坐骨神经均有不同程度的髓鞘脱失，神经根重于坐骨神经；光、电镜检查未见明显的轴突损伤及炎性细胞浸润，有的粗神经

10、纤维轴突表面包绕着薄的再生髓鞘，表明硫脂致敏的EAN病理变化以神经根为主，主要侵犯神经髓鞘，在髓鞘破坏的过程中同时存在髓鞘再生；硫脂致敏的EAN与慢性GBS更相似。硫脂致敏EAN动物下肢近远端CAMP波幅比值显著降低，提示存在神经传导阻滞5，加之运动神经传导速度明显减慢，表明动物外周神经有脱髓鞘改变，反射波F波的潜伏期延长，提示传入神经根有损害。这与病理发现基本相符。免疫荧光显示，神经鞘膜上有IgG沉积，提示自身抗体在EAN发病过程中可能起一定的作用。其作用机理尚不明了，但有研究发现6，7，它们能引起郎飞氏结旁髓鞘发生细微结构性改变或通过干扰郎飞氏结区钠、钾离子通道而影响动作电位的产生。免疫组

11、化示：硫脂致敏豚鼠坐骨神经、腰神经根中CD11b+细胞均显著增加而CD5+细胞增加不明显，提示单核-巨噬细胞系统在髓鞘的破坏过程中起重要作用。脑脊髓检查基本正常。中枢神经系统不受累可能与周围神经髓鞘中硫脂含量较高、被接种的动物种属差异、接种的免疫原剂量及接种的时间等有关。本课题为国家自然科学基金资助项目(No 39470264)作者单位：管阳太秦震200040上海医科大学神经病学研究所曹小定神经生物国家重点实验室参考文献1 管阳太，秦震，朱国行，等.格林-巴利综合征患者血清和脑脊液中的抗硫脂抗体.中华神经科杂志，1997，30：135.2 Stoll G,Schwendemann G,Hein

12、inger K,et al. Relation of clinical,serological,morphological and electrophysiological finds in galactocerebroside induced experimental allergical neuritis. J Neuro Neurosurg Psychiatry,1986,49:258.3 Svennerholm L,Fredman P. Antibody detection in Guillain-Barre syndrome. Ann Neurol,1990,27(Suppl):36

13、.4 Nobile-Orazio E. Multifocal motor neuropathy. J Neurol Neurosurg Psychiatry,1996,60:599.5 Truck RR,Pollard JD,Mcleod JG. Autonomic neuropathy in experimental allergic neuritisan electrophysiological and histological study. Brain,1981,104:187.6 Wang NP,Ritter E,Yucel E,et al. Specficity and structure of murine monoclonal antibodies against GM1