国产替勃龙的激素活性及药效研究

1、国产替勃龙的激素活性及药效研究    摘要为在国内开发治疗妇女更年期与手术后绝经症 的新药，对国产替勃龙进行了多项生殖内分泌生物实验，结果表明该药兼具雌激素、孕激 素及雄激素活性，并有延迟排卵作用，对大鼠雌激素缺乏性阴道炎也有治疗作用。其药理 特性符合临床治疗女性更年期综合症要求。关键词替勃龙；激素活性；药效；更年期综合征中图法分类号R459.1，R339.34Hormone Activity and Pharmacodynamic Pro perties of Native TiboloneAbstractThe hormonal profile an

2、d pharmacodynamic properties of native Tibolone were tested by various experiments in reproductive endocrinolog y. The results showed that native Tibolone possessed the estrogenic, progestatio nal and androgenic activities. The posting effect on ovulation and therapeutic e ffect on vaginitis were al

3、so demonstrated in rats. It was concluded that the pha rmacodynamic properties of native Tibolone were qualified for clinical use in th e treatment of climacteric syndrome.Key wordsTibolone;hormonal activities;pharmacodynamics;c limacteric syndrome替勃龙（Tibolone）化学名为（7,17）-17-羟-甲基-19-去甲孕甾-5(10)-烯-2 0-

4、炔-3-酮。是荷兰Organon药厂研制的一种甾体激素化合物，国内注册商品名利维爱片 剂Livial tablet，用于治疗妇女更年期与手术后绝经症状，但价格昂贵。为在国内开发该 药，本实验对北京第三制药厂合成的替勃龙（称国产替勃龙）进行了激素活性及药效学实验 ，并与已知参照物进口替勃龙进行对照比较。1材料与方法1.1材料国产替勃龙由北京第三制药厂，北京市天工药物开发中心提供，进口替勃龙（荷兰Orga non药厂利维爱片剂提取物）由湖北省医药工业研究所提供，利维爱片购自湖北省医药公司 。实验动物由同济医大实验动物学部提供。1.2雌激素活性1.3孕激素活性选用未成年大耳白兔，实验前皮下注射苯甲酸

5、雌二醇（2g/d）连续7d。第8d动物分成5组。经口灌胃给予受试物国产替勃龙，阳性对照物炔诺酮进口利维爱连续给药5d。第12d处死动物，取出子宫放入固定液中，做子宫切片，进行组织学检查，按McPhail方法评分。1.4雄激素活性选用未成年雄性大鼠，切除双侧睾丸，一周后将动物分为8组，受试组分别给予国产替勃龙，阳性对照组给予甲基睾丸素或进口替勃龙。每d经口给药一次，连续7d，第8d处死动物。取精囊腺、前列腺、提肛肌称重。1.5对排卵过程的影响选用雌性SD成年大鼠，体重240280g将实验动物每天行阴道涂片检查，选用具有规则的4日一个动情周期的大鼠，在动情期当日开始经口分别给予国产替勃龙，阳性对照

6、组分别给予乙炔雌二醇或进口替勃龙，阴性对照组给予赋形剂。连续给药5d，每d2次，第6d用乙醚麻醉下处死动物，分离双侧输卵管，放置于两玻片之间，显微镜下观察若卵子缺乏表示排卵受到抑制，有粒层细胞围绕着的卵细胞出现表示排卵延迟一天，若为裸露的卵细胞则为正常排卵时间，处理的最后结果评分1，即正常排卵为0分，排卵迟为1分，排卵缺失为3分，各项相加的分数除以实验鼠数×3，即为影响排卵百分比（）。1.6国产替勃龙对“更年期”动物模型大鼠雌激素缺乏性阴道炎的治疗作用首先制备“更年期”大鼠动物模型2。将“更年期”模型大鼠分为6组，阳性对照组：给予乙炔雌二醇，0.25,2.5g/kg，或进口替勃龙25

7、0g/kg，受试药组给予国产替勃龙2.5，25，250g/kg。每天灌胃给药连续4d，在给药第3d开始每天行阴道涂片。观察阴道角化细胞及清洁度。2结果2.1雌激素活性国产替勃龙对幼年大鼠子宫有增重作用（表1），且对摘卵巢小鼠阴道细胞有角化作用。实验表明国产替勃龙有弱的雌激素样作用，雌激素活性是乙炔雌二醇的1/101/100，与进口替勃龙作用相似。2.2孕激素活性国产替勃龙有孕激素活性，但量效关系不明显，与同等剂量进口替勃龙比较结果相近，McPhail评级（x）均为2.3。2.3雄激素活性国产替勃龙对去势雄性大鼠精囊腺、前列腺，提肛肌有不同程序增重作用，与进口替勃龙同等剂量比较结果相近，说明该药

8、有雄激素活性（表2）。2.4对排卵过程的影响国产替勃龙有延迟大鼠排卵作用与进口替勃龙同等剂量比较作用相近（表3）。表1国产替勃龙与进口替勃龙对幼年大鼠子宫重量的影响(n=8) 分 组 剂量(g/只) 子宫重量（mg） 子宫液明显增加鼠数 阴性对照 35.0±7.2 0 阳性对照 0.01 77.0±14.6* 4 乙炔雌二醇 0.1 107.0±75.5* 7 进口替勃龙 0.1 49.0±10.4* 2 1.0 69.0±24.7* 3 10 86.0±47.0* 7 国产替勃龙 0.1 50.0±6.1* 2

9、1.0 67.0±24.5* 4 10 103.0±34.1* 8与阴性对照组比较* P<0.05表2国产替勃龙对雄性大鼠附性腺的影响 分组 剂量（mg/d） 提肛肌（mg） 精囊腺（mg） 前列腺（mg） 阴性对照 30.7 9 2.5 甲基睾丸素 0.80 40* 11 8.0* 0.16 46* 14* 16.5* 0.32 48* 14.8* 14.7* 0.64 60* 16.2* 21.0 进口替勃龙 0.64 67* 22.0 17.0* 国产替勃龙 0.16 34 15.2 13* 0.32 36 16.6* 14* 0.64 50* 18.

10、9* 15* 1.28 54* 20.8* 17*与阴性对照组比较* P<0.05表3国产替勃龙对大鼠排卵的影响 分 组 经口给药总量（g） 排卵鼠数 影响排卵百分比（） 正常 延迟 抑制 阴性对照 6 0 0 0 乙炔雌二醇 4×2 2 2 2 44 8×2 1 2 3 61 进口替勃龙 250×2 1 4 1 39 国产替勃龙 62.5×2 3 3 0 16 125×2 0 6 0 33 250×2 0 5 1 442.5国产替勃龙对“更年期”动物模型大鼠雌激素缺乏 性阴道炎的治疗作用国产替勃龙25，250g对“更

11、年期”大鼠模型阴道炎有一定治疗作用。表现为角化细胞有明显显效关系的增加，清洁度明显改进（表4）。表4国产替勃龙对“更年期”大鼠模型阴道炎的影响 分 组 剂量(g/kg) 动物数（n） 给药前（动物数） 给药后（动物数） 阴道清洁 角化细胞 阳性 阴道清洁 角化细胞 阳性 度 度 度 度 乙炔雌二醇 0.25 10 5 5 0 9 1 9 2.5 10 4 6 0 10 0 10 进口替勃龙 250 10 4 6 0 9 1 9 国产替勃龙 2.5 10 4 6 0 2 8 2 25 10 5 5 0 7 3 7 250 10 4 6 0 10 0 103讨论更年期综合征是由于卵巢激素

12、分泌减少而引起的紊乱。临床多补充雌激素治疗，但是雌 激素刺激内膜增生，要定期用孕激素，而在停用这些激素后将引起撤退性出血。而替勃龙是 一种“模仿性腺”甾体激素。本实验结果表明，国产替勃龙兼具孕激素，雌激素和雄激素活 性，对大鼠“更年期”动物模型雌激素缺乏性阴道炎有治疗作用。国产替勃龙也适用于治疗 老年性阴道炎。为治疗绝经症状提供了有前景的治疗方法。根据文献报道，替勃龙对治疗更 年期症状4，改善情绪、提高性欲5，治疗阴道萎缩6，预 防绝经后骨质丢失7，临床应用满意，是值得重视的绝 经后替代疗法用药。参考文献1， Devisser J, Coert A, Feenstra H et al. End

13、ocrinological studies wit h (7, 17)-17-Hydroxy-7-methyl-19-norpreg-en-5(10)-en-5(10)-en-20 -yn-3-one(Drg OD 14). Drug Res, 1984, 34: 10102，李玉柱.“更年期”动物模型试剂. 佳木斯医学院学报，1997，14（3）：1 983，Van der vies. Pharmacological studies with (7,17 0-17-hydroxy-7- methyl-19-norpregn-5(10)-en-20-yn-3-one rg OD 14). 18

14、87,Maturitas suppl. 1:154，白文佩，柏欣，郑淑等. 结合雌激素和F-4导酮对绝经期妇女脂蛋白截胎 蛋白的影响，中华妇产科杂志，1999, 34（5）： 2935，Eagrter C, Huber J, Leikermoser T et al. Tibolone versus conjug ated estrogens and sequential progestogen in the treatment of climacteric compla ints. Maturitas, 1996, 23: 556，Botsis D, Kassanos D, Kalogirou D et al. Vaginal ultrasound of the endometrium in postmenopausal women with symptoms of urogenital atrophy on low-dose estrogen or tibolone treatment: a comparison. Maturitas 1997, 26: 5 77，Lippuner K, Haenggi W, Birkhaeuser M H et al. Prevention of post menopau