NPA-32半自动核酸纯化仪操作指导

1、NPA-32半自动核酸纯化仪操作指导 一 作用 NP A-32半自动核酸纯化仪可与磁珠式核酸提取试剂盒配合提取各种生物样本中的核酸。在通过手工或其它方式完成样本裂解、结合液及磁珠加入后，有仪器自动完成将结合了核酸的磁珠与裂解混合液分离、洗涤结合有核酸的磁珠、洗脱核酸、将磁珠与纯化的核酸溶液分离。二 工作前准备1. 将仪器接通电源、工作电脑上安装上位机操作软件、使用232数据线与工作电脑连接、打开电源开关。上位机软件只需拷贝到工作电脑2. 将塑料护套装好3. 在完成手工操作部分后，将96孔深孔板放入注意两边各有1个弹性卡锁放板时先一端抵住弹性卡锁， 然后再将另一端放入卡口 对96孔板工作区域说明

2、：NPA-32可同时使用2块96孔深孔板。分为4个工作区域。分别为左边板的1至6列，7至8列，右边板的1至6列，7至8列。在工作时都被设备视作1至6列，同时进行平行操作。三 工作原理 NPA-32工作原理为内磁式原理，利用磁棒和护套，将结合有核酸的磁珠，在装有不同试剂的反应孔内转移，来实现核酸-磁珠的分离、洗涤、核酸洗脱，从何获得纯化的。核心结构示意图：工作原理示意图：如需多种洗液或多次洗涤，可在第三、四列孔中重复第二列孔操作。提取步骤说明：1. 提取完成后，纯化的核酸溶液在第五列孔中，可直接用于绝大部分下游应用实验（不可以直接用于电转化实验）。2. 最后的消毒液并不是必须的，如果不在实验最后

3、设计将磁珠留在消毒中，可将其仍然吸附于护套表面（磁棒和护套都停留于最高位置），实验完成后将磁珠与护套一起丢弃。3. 如最后一步洗涤步骤中使用的洗涤液含有乙醇或其他醇类，可设计将磁棒与护套升起后，停留510分钟，以使乙醇或其他醇类挥发。四 上位机软件操作及提取程序编写。1. NPA-32需要与电脑联机工作，由联机电脑上安装的上位机软件控制工作。其软件操作十分简单易学，但对于指定是提取工作，可能需多次实验调整程序细节来优化最后的纯化效果。2. 上位机软件为单个文件，不需要另行安装，只需复制到硬盘任何位置，用鼠标双击即可运行。双击后软件界面如下3. 双击后软件界面如下分为指令条（最上）反应孔选择栏（

4、左）部件状态图示栏（右上）编程栏（右下）注意指令条的右端有一个串口选择下拉菜单（用于选择232串口）4. 编程A 首先鼠标单击选择要编程的孔的列数。设备运行时，是按照16列的顺序，依次这行各孔程序。如某列孔未编写程序，则直接跳到下一列。 B 然后进行程序动作编写。在程序栏中有3列内容，分别是动作，位置，时间（秒）。动作：为一个下拉菜单，可选择磁棒运动或Tip（护套，以后都以Tip表示）动作。位置：为一个下拉菜单，数字代表高度位置，0是最高位置，5是最低位置磁棒运动对应的位置是指磁棒相对Tip的位置。磁棒运动位置0 磁棒运动位置5Tip运动对应的位置是指Tip相对孔的位置 Tip运动位置0 Ti

5、p运动位置5时间：部件在运动目标位置上停留的时间，单位是秒，鼠标点击后用键盘输入数字。最小数字为0，但由于通讯所需时间，当设置0秒时，实际停留时间为0.5秒。C 指令条上的各案按键为：新建，打开，保存，剪切，复制，粘帖，打印，关于，在所选行的上面插入一行，在所选行的下面插入一行，删除所选的行，驱动一起工作，暂停/恢复，取消本次运行。鼠标移至该按键图标，会显示说明。其操作类似windows，也可进行快捷键操作，如：Ctrl+C是复制，Ctrl+V是粘帖。例：点住鼠标左键，拖动选取需要复制的动作行，并复制。鼠标左键点击需粘帖的位置，并粘帖。D 注意，点击开始运行程序，如系统显示“无法联系下位机”，

6、很可能是串口选择与实际连线的232串口不一致，请更换选择一个串口。五 编程参考实例实例文件为:“实例1.rib”。该文件不能双击打开，必须先运行上位机软件，从“文件”“打开”选取要打开的文件。程序简单说明第一孔：先通过Tip在3和5之间多次上下运动，使得混合液中磁珠悬浮分散，以便以游离的核酸充分接触结合。接着将Tip运动到5，磁棒也跟着运动到5，并停留12秒，以吸附磁珠于Tip外表面。最后升起Tip与磁棒，分离出磁珠。第二孔：先磁棒运动到5，是磁棒与Tip分离。然后通过Tip上下运动，使得磁珠分散于洗液中，以便充分洗涤。最后的吸附磁珠及升起动作与第一孔相同第三孔的动作程序完全是第二孔的重复第四孔的动作程序基本与第二、三孔相同，只是升起后停留5分钟，以挥发乙醇。第五孔，由于本例中洗脱液