HAS快速脱钙液的研制和应用

1、    HAS快速脱钙液的研制和应用        水杨酸溶液具有松解胶原、溶解脂肪的作用1，临床上常用于疣和鸡眼病的治疗。由于骨组织中的主要成分是无机盐和胶原，故我们试验将水杨酸（salicylic acid）与盐酸(hydrochloric acid)、醋酸(acelic acid)制成快速脱钙液（简称HAS液），用于钙化和骨组织标本的快速脱钙，结果显示其具有脱钙作用迅速，组织结构保存良好，切片染色清晰的优点。我们对HAS液的研制及应用进行总结，现介绍如下。一、材料与方法

2、1HAS液的配制：取36%38%的盐酸8 ml，99%醋酸5 ml，水杨酸10 g，蒸馏水87 ml，按盐酸、醋酸、水杨酸的顺序依次加入蒸馏水中搅拌混合使成混悬液。2标本：我院1996年7月1998年6月，2年内骨髓穿刺标本22例，骨肉瘤髋关节离断术后送检下肢12例，股骨头无菌坏死的股骨头8例。（1）骨髓穿刺标本：呈短柱状，长条形，长0.40.8 cm，直径0.20.3 cm；（2）骨肉瘤标本：取肿物边缘骨组成，体积（1.01.5）×(0.50.8）×（0.30.4）cm3；（3）股骨头无菌性坏死标本：取病损处股骨头横截面，体积同上；（4）长管骨：髋关节离断术后送检的下肢，

3、取无病变的股骨或胫骨横截面，体积同上。3. 方法与步骤：将待脱钙标本置于有HAS液的塑料容器内，容器体积是HAS液量的3倍，HAS液量不少于待脱钙标本总体积的10倍。（1） 室温脱钙：将待脱钙标本置于HAS液中，室温条件下每隔30分钟检查脱钙效果，以注射针头轻松穿入标本为完全脱钙标准。（2） 微波内脱钙：应用sharp3A65型，最大功率850 W，将待脱钙标本置入500 ml HAS液中，入微波内加热高档（850 W）5分钟，达100。骨髓穿刺标本继续留机10分钟，其他标本留置30分钟为一循环，检查脱钙效果，按脱钙情况决定是否重复以上操作。 二、结果1骨髓穿刺标本：室温0.51小时可达脱钙效

4、果；微波内一个循环即可。2其余病变骨：室温下326小时均可达脱钙效果。3HAS 液与Jenkins液室温下脱钙比较：取骨肉瘤标本12例，其中股骨11例，胫骨6例分别置入HAS液和Jenkins液中室温下脱钙，定期观察脱钙效果，记录达完全脱钙的时间，数据进行t检验（表1）。统计显示两种脱钙液的标本脱钙时间差异有非常显著性。 表1两种脱钙液脱钙时间比较标本例数h，±st值P值HAS液Jenkins液骨肉瘤127.5±3.737.0±11.48.52<0.005股骨头无菌性坏死813.7±9.242.7±17.44.17<0.002 5长

5、管骨1717.2±8.949.5±23.65.280.0054HAS液脱钙标本染色：HAS液脱钙后的标本，无须流水冲洗，可直接入自动脱水机与当日取材的其它软组织标本同步固定、脱水、透明、浸蜡、切片，HE染色显示组织结构完整，染色清晰（1-4）。1骨髓恶性淋巴瘤标本HAS液微波内脱钙1个循环HE ×4002颅骨转移癌标本HAS 液微波内脱钙1个循环，免疫组化标记细胞角蛋白LSAB法 ×1003骨化纤维瘤标本，用HAS液微波内脱钙1个循环HE ×1004骨瘤标本，用HAS液微波内脱钙2个循环HE ×100三、讨论骨组织或钙化标本中固有难溶

6、于水的羟磷灰石成分而使标本坚硬，不能直接用于制作切片，以往的脱钙液常用Jenkins液，使羟磷灰石转化为可溶于水的酸式磷酸盐、氯化钙等，使标本软化。但是醋酸具有溶解胶原1，可能脱钙和溶解胶原同时进行妨碍钙离子析出。HAS液中加入水杨酸后，由于水杨酸具有松解胶原和溶解脂肪的作用2。使强酸较容易穿透组织，而且转化的可溶性钙盐也较易析出，故HAS液可显著加快脱钙作用。应用微波辐射可加速组织内分子运动2 ，加速升温（水杨酸溶于热水和醇，水溶液化学作用大于醇溶液）到100更好发挥作用，而且微波还可以破坏蛋白质的交联，使组织间隙通畅，有利于钙盐析出。HAS液100条件下脱钙不影响染色效果，我们自1996年7月以来已应用该液处理各种骨组织或钙化标本470例，显示有明显缩短脱钙时间，组织结构保存完整，染色清晰的优点，100快速脱钙缩短了标本在酸性溶液中的滞留时间，减少了酸性溶液对染色效果的影响。HAS液具有快速脱钙，组织结构保存完整，染色清晰的特点，具有很好的应用价值。作者单位：250021 济南，山东省立医院病理科参考文献1叶松柏.消毒防腐药，药理学北京：