人教版教学课件基因工程的基本操作顺序课件

1、人教版教学课件基因工程的基本操作顺序 1.2基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序人教版教学课件基因工程的基本操作顺序原核细胞的基因结构非编码区非编码区非编码区非编码区编码区编码区编码区上游编码区上游 编码区下游编码区下游 与与RNA聚合聚合酶结合位点酶结合位点人教版教学课件基因工程的基本操作顺序真核细胞的基因结构编码区编码区非编码区非编码区非编码区非编码区与与RNA聚合聚合酶结合位点酶结合位点内含子内含子 外显子外显子 能够编码蛋白质的序列叫做外显子能够编码蛋白质的序列叫做外显子 不能够编码蛋白质的序列叫做内含子，内含子能不能够编码蛋白质的序列叫做内含子，内含子能转录为信使转录为信使R

2、NA 编码区上游编码区上游 编码区下游编码区下游 内含子内含子 外显子外显子 一个基因含有多个外显子和内含子人教版教学课件基因工程的基本操作顺序 基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序一、目的基因的获取一、目的基因的获取二、基因表达载体的构建二、基因表达载体的构建三、将目的基因导入受体细胞三、将目的基因导入受体细胞四、目的基因的检测与鉴定四、目的基因的检测与鉴定人教版教学课件基因工程的基本操作顺序一、目的基因的获取一、目的基因的获取主要是编码蛋白质的基因主要是编码蛋白质的基因初始目的基因的来源初始目的基因的来源从生物中直接分离人工合成人教版教学课件基因工程的基本操作顺序1、从基因文库中获

3、取目的基因、从基因文库中获取目的基因 将含有某种生物不同基因的许多将含有某种生物不同基因的许多DNADNA片断，片断，导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。这种生物的不同基因，称为基因文库。基因文库基因文库 基因组文库基因组文库部分基因文库部分基因文库(CDNA文库文库)人教版教学课件基因工程的基本操作顺序基因组文库：基因文库中包含了一种生物基因组文库：基因文库中包含了一种生物所有的基因所有的基因部分基因文库：基因文库中包含了一种生部分基因文库：基因文库中包含了一种生物的一部分基因物的一部分基因人教版教学课件基因工程的

4、基本操作顺序某生物体内全部某生物体内全部DNA DNA 许多许多DNADNA片段片段受体菌群体受体菌群体限制酶限制酶与运载体连接与运载体连接 导入导入基因组文库基因组文库某种生物某个时期的某种生物某个时期的mRNAmRNAcDNAcDNA反转录反转录受体菌群体受体菌群体与运载体连接与运载体连接 导入导入部分基因文库部分基因文库（cDNA文库）文库）人教版教学课件基因工程的基本操作顺序人教版教学课件基因工程的基本操作顺序2、利用、利用PCR技术扩增目的基因技术扩增目的基因 聚合酶链式反应，在生物体外复制特定聚合酶链式反应，在生物体外复制特定DNADNA片段的核酸合成技术。片段的核酸合成技术。人教

5、版教学课件基因工程的基本操作顺序条件条件：已知序列的已知序列的DNADNA模板、引物、模板、引物、 热稳定热稳定DNADNA聚合酶、四种脱氧核苷酸聚合酶、四种脱氧核苷酸原理：原理：DNADNA复制复制过程过程：热解旋（热解旋（90 90 9595）引物与单链引物与单链 互补结合（互补结合（55 55 6060） DNADNA聚合聚合 酶作用下延伸（酶作用下延伸（70 70 7575）人教版教学课件基因工程的基本操作顺序循环循环变性变性退火退火延伸延伸人教版教学课件基因工程的基本操作顺序基因比较小且已知其序列基因比较小且已知其序列人教版教学课件基因工程的基本操作顺序二二.基因表达载体的构建基因表

6、达载体的构建-核心核心人教版教学课件基因工程的基本操作顺序基因表达载体的构建过程基因表达载体的构建过程质粒质粒DNADNA分子分子限制酶处理限制酶处理两个切口两个切口获得目的基因获得目的基因DNADNA连接酶连接酶重组重组DNADNA分子（重组质粒）分子（重组质粒）同一种同一种一个切口一个切口两个黏性末端两个黏性末端人教版教学课件基因工程的基本操作顺序复制原点复制原点+启动子启动子+目的基因目的基因+终止子终止子+标志基因标志基因基因表达载体的组成人教版教学课件基因工程的基本操作顺序三、将目的基因导入受体细胞三、将目的基因导入受体细胞转化转化 有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、有大肠杆菌、枯草

7、杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。酵母菌和动植物细胞等。借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。人教版教学课件基因工程的基本操作顺序三、将目的基因导入受体细胞三、将目的基因导入受体细胞1.1.将目的基因导入植物细胞将目的基因导入植物细胞-农杆菌转化法农杆菌转化法人教版教学课件基因工程的基本操作顺序2.2.将目的基因导入动物细胞将目的基因导入动物细胞显微注射技显微注射技术术提纯基因表达载体提纯基因表达载体体外显微注射入受精卵体外显微注射入受精卵受精卵培养一段时间受精卵培养一段时间移入输卵管或子宫内移入输卵管或子宫内具有新性状的个体具有新性状的个体人教版教学课件基因工程的

8、基本操作顺序3 3、将目的基因导入微生物细胞、将目的基因导入微生物细胞原核生物特点：繁殖快、单细胞、原核生物特点：繁殖快、单细胞、 遗传物质少遗传物质少方法：方法：用用Ca2+处理细胞处理细胞 感受态细胞感受态细胞 表表达载体与感受态细胞混合达载体与感受态细胞混合 感受态感受态细胞吸收细胞吸收DNA分子分子人教版教学课件基因工程的基本操作顺序四、目的基因的检测与鉴定四、目的基因的检测与鉴定检测检测鉴定鉴定检测转基因生物染色体的检测转基因生物染色体的DNA DNA 上是否插入了目的基因上是否插入了目的基因检测目的基因是否转录出了检测目的基因是否转录出了mRNAmRNA检测目的基因是否翻译成蛋白质

9、检测目的基因是否翻译成蛋白质抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等DNADNA分子杂交分子杂交分子杂交分子杂交（注意与上不同之处）（注意与上不同之处）抗原抗原抗体杂交抗体杂交人教版教学课件基因工程的基本操作顺序基基因因工工程程的的基基本本操操作作程程序序目的基因的获取目的基因的获取基因表达载体的构建基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定目的基因的检测与鉴定1、从基因文库中获取目的基因、从基因文库中获取目的基因2、利用、利用PCR技术扩增目的基因技术扩增目的基因3、化学方法人工合成、化学方法人工合成复制原点复制原点 + + 目的基

10、因目的基因 + + 启动子启动子 + + 终止子终止子 + + 标记基因标记基因农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法、显微注射法、农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法、显微注射法、CaCa2+2+处理法处理法DNADNA分子杂交技术、分子杂交技术、抗原分子杂交技术、分子杂交技术、抗原抗体杂交技术抗体杂交技术分子检测外的个体水平鉴定分子检测外的个体水平鉴定人教版教学课件基因工程的基本操作顺序巩固练习巩固练习:1.人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗生素抗性基因人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗生素抗性基因,该该抗性基因的主要作用是抗性基因的主要作用是 ( )A.提高受体细胞在自然环境中的耐

11、药性提高受体细胞在自然环境中的耐药性B.有利于对目的基因是否导入进行检测有利于对目的基因是否导入进行检测C.增加质粒分子的分子量增加质粒分子的分子量D.便于与外源基因连接便于与外源基因连接2.在遗传工程技术中在遗传工程技术中,限制性内切酶主要用于限制性内切酶主要用于 ( )A.目的基因的提取和导入目的基因的提取和导入B.目的基因的提取和检测目的基因的提取和检测C.目的基因与载体的结合和导入目的基因与载体的结合和导入D.目的基因的提取与载体结合目的基因的提取与载体结合BD人教版教学课件基因工程的基本操作顺序以下说法正确的是以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷、所有的限

12、制酶只能识别一种特定的核苷酸序列酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来、基因控制的性状都能在后代表现出来C人教版教学课件基因工程的基本操作顺序4.1976年年,美国的科学家首次将人的生长抑制美国的科学家首次将人的生长抑制素释放因子的基因转移到大肠杆菌素释放因子的基因转移到大肠杆菌,并获得了并获得了表达表达,此文中的表达是指该基因在大肠杆菌此文中的表达是指该基因在大肠杆菌 ( )A.能进行能进行DNA复制复制B.能传递给细菌后代能传递给细菌后代C.能合成生长抑制素释放因子能合成生长抑制素释放因子D.能合成人的生长素能合成人的生长素C人教版教学课件基因工程的基本操作顺序5.基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的,在基因操作的基本步骤中,不进行减基互补配对的步骤是 ( )A.人工合成目的基因B.目的基因与载体结合C