HCV感染后肝硬化组织中整合素α3和αM的表达水平、部位及其意义(1)

1、HCV感染后肝硬化组织中整合素3和M的表达水平、部位及其意义(1)】 目的：通过观测HCV感染后肝硬化组织中整合素31亚单位和M2亚单位表达水平和部位，研究其在肝硬化发生、发展中的分子标志意义. 方法：在知情同意的前提下，选择3例用于肝移植的正常供肝组织作为正常对照组，选择12例HCV感染后肝硬化门脉高压症患者，其中Child分级A级8例，B级2例，C级2例，术中取肝组织，分为3和M组，分别用免疫组化法检测肝组织中整合素3，M表达水平和部位，比较两者表达水平和部位的变化. 结果：正常肝组织中无整合素3，M表达. HCV感染后肝硬化，整合素M阳性表达高于3，差异有显著性（P0.05）. 结论：整

2、合素3，M与HCV感染后肝硬化肝窦毛细血管化形成过程有密切关系，M可作为重的检测指标.【关键词】 整合素；基底膜；肝硬化0引言我们的研究主针对丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)感染后肝硬化组织的临床病理特征，通过检测整合素31亚单位和M2亚单位表达水平及部位，初步讨论HCV导致肝纤维化和硬化发生的起始原因以及早期临床检测方法.1材料和方法分别选自西安交通大学第二医院普外科和第四军医大学西京医院肝胆外科200405/09住院患者. 正常组为3例肝移植供肝. 肝硬化组为12例HCV感染后肝硬化患者，实验室诊断（ALT，AST水平，抗HCV，Child肝功能分级指标）和术中

3、取材大体标本及病理学诊断标准依据中华医学会联合修订丙型肝炎防治指南1. 取材：均在手术中相同部位取直径1 cm，厚0.5 cm的肝组织标本，40 g/L多聚甲醛固定，石蜡包埋，切片.各组标本石蜡切片分别按照3和M免疫组化试剂盒(武汉博士德生物工程公司)染色. 染色为棕黄色颗粒者为阳性细胞. 采用LEICA图像分析系统软件400倍视野计算阳性细胞分布面积比例和区域，-阴性;阳性表达面积50%.统计学处理： 3和M表达水平和部位数值比较应用Wilcoxon检验，P30（Fig 2A）. 高倍镜下，可见阳性区域主位于肝细胞膜和周围胞质（Fig 2B）.2.3整合素3和M表达水平和部位差异如Tab 1

4、所示，M阳性表达水平高于3，两者比较差异有显著性（P0.05）. 而Child分级A，B和C组间比较差异无显著性. 根据肝腺泡（Liver acinus）理论，将肝小叶分为3个连续的区域，即，和区. 区为临近门管区的肝组织，区为小叶中央静脉周围肝组织，区为前两者之间肝组织. 如Tab 2所示，M阳性表达区域多位于区，而M阳性表达区域多位于区，但是因为免疫组化阳性面积图像分析对微观结构尚不能准确定量，所以两者部位比较差异无显著性.表1不同Child分级肝硬化组织中3和M的表达水平（略）表2不同Child分级肝硬化组织中3和M的表达部位（略）作者：徐心，黎一鸣，吉鸿，候崇智，程颖波，赵晓鸽【关键词

5、】整合素Localization and expression level of integri 本篇论文是由3COME文档频道的网友为您在网络上收集整理饼投稿至本站的，论文版权属原作者，请不用于商业用途或者抄袭，仅供参考学习之用，否者后果自负，如果此文侵犯您的合法权益，请联系我们。3讨论尽管我国肝硬化主病因是乙型肝炎，HCV感染后肝硬化发生率占10%20，但是由于HCV感染隐匿，许多患者已经发展到肝功能失代偿时才得到确诊. 而且HCV导致肝硬化和肝细胞癌（HCC）发生率较高，其中肝硬化失代偿是HCV感染患者最重的死亡原因. 所以找到HCV感染后肝硬化的起始事件，是HCV肝硬化治疗、预防的关键

6、.肝窦毛细血管化是肝硬化发生的中心环节，新生的基底膜组织形成是其主的表现. 细胞外基质（extracellular matrix， ECM）生成/降解平衡紊乱是肝窦毛细血管化的重机制，而整合素是介导肝实质/非实质细胞与ECM之间信号转导、以及星状细胞（HSC，ECM的生成细胞）活化和相互作用的主受体. 目前研究已经证实整合素参与了肝窦毛细血管化这一病理过程. Ouondamatteo等2发现整合素3和6亚单位在肝硬化肝细胞和窦状内皮细胞(sinusoidal epithelial cells, SEC)有较强的表达，与层黏连蛋白（Laminin, LN）表达部位相似. LN是基底膜主的特异性结

7、构成分，起着调控ECM形成的作用，其主的细胞表面受体是肝细胞和SEC的整合素1亚族2，3和6亚单位，这些受体蛋白正常是无表达，肝硬化时LN受体表达上调，并进一步促进肝细胞和SEC产生多种黏附分子，参与ECM生成3.我们的实验结果显示：HCV感染后肝硬化肝细胞和SEC表面就有很强的3及M亚单位表达. 在3和M阳性表达最高的区域，是缺氧、炎症损伤最重和纤维化明显的区域，可见kupffer细胞、淋巴细胞浸润，必将导致SEC和血小板激活. 研究证实激活的SEC和血小板释放多种细胞因子，如肿瘤坏死因子（TNF1，TNF2）、表皮生长因子（EGF）、血小板衍生生长因子（PDGF）等，通过旁分泌的作用使HS

8、C激活、发生表型改变，活化的HSC（即肌成纤维细胞）还有自分泌TNF1和TNF1的作用，进一步激活HSC4. 活化的HSC产生大量ECM，同时ECM降解酶系统相对或绝对不足，产生ECM生成/降解失衡，形成新生的基底膜. 3和M是多种ECM成分，如LN,纤维连接蛋白（FN）的受体. 在肝硬化早期，LN和FN由整合素介导与细胞之间形成疏松的黏连，随着肝硬化的进展，胶原的沉积和成分改变，最终导致肝窦毛细血管化.肝窦毛细血管化的形成，加上同时肝细胞微绒毛减少，SEC窗孔减少，孔径改变，胶原在内皮下沉积，Diss腔缩小，功能性血流量随之减少，物质交换功能障碍5. 此时肝脏物质/血流匹配严重失调，各项功能

9、均受到损害. 所以整合素表达增加可能是肝纤维化或肝硬化的起始因素.【参考文献】1 中华医学会肝病学分会，中华医学会传染病和寄生虫学会. 丙型肝炎的防治指南J. 中华内科杂志，2004；43：551-555.Chinese Society of Liver Diseases, Chinese Society of Infectious Diseases and Parasitology. Prevention and treatment of HCVJ. Chin J Intern Med, 2004；43：551-555.2 Quondamatteo F, Kempkensteffen C,

10、Mlosge N, et al. Ultrastructural localization of integrin subunits 3 and 6 in capillarized sinusoids of the human cirrhotic liverJ. Histol Histopathol, 2004; 19(3): 799-806.3 Olaso E, Friedman SL. Molecular regulation of hepatic fibrogenesisJ. J Hepatol, 1998;29(5):836-847.4 高春芳，陆伦根. 纤维化疾病的基础和临床M. 上海：上海科学技术出版社，2004：278-280.5 Xu B, Broome U, Uzunel M, et al. Capillariz