糖耐康颗粒对胰岛素抵抗3T3–L1脂肪细胞炎症因子的影响 医学论文_第1页
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文档简介

1、    糖耐康颗粒对胰岛素抵抗3T3L1脂肪细胞炎症因子的影响 医学论文                                           &

2、#160; 作者:牛洁 刘铜华 王志程 杨丽霞本文由中国论文范文收集整理。【摘要】   目的:探讨糖耐康颗粒对胰岛素抵抗3T3L1 脂肪细胞炎症因子的影响。方法:通过地塞米松与胰岛素共同诱导3T3L1 脂肪细胞建立胰岛素抵抗模型,检测中药糖耐康对细胞上清中TNF、IL6、CRP 水平的影响。结果:与正常组比较,模型组TNF、IL6、CRP 水平明显升高;经中药糖耐康以及西药吡格列酮干预后,TNF、IL6、CRP 水平显著下降,与模型组比较有显著差异。结论:TNF、IL6、CRP 参与胰岛素抵抗的发生,中药糖耐康可能通过降低炎症因子的水平发挥改善胰岛素抵抗的作用。 【关键词】 

3、0; 糖耐康;3T3L1 脂肪细胞;胰岛素抵抗;炎症    Abstract Objective To study the effect of Tangnaikang granule on inflammatory factor of insulin-resistant3T3-L1 adiopocytes. Methods After utilizing dexamethasone and insulin to establish insulin-resistant modle byinduced 3T3L1 adipocyte, the levels of tu

4、mor necrosis-alpha(TNF),interleukin6(IL6) and Creactive protein(CRP) of cell supernatant were detected. Results The levels of TNF, IL-6 and CRP of model group weresignificantly increased compared with those of normal group.After intervention of Tangnaikang and Pioglitazone, thelevels of TNF, IL6 and

5、 CRP were obviously decreased compared with those of model group. Conclusion Theinflammatory factor of TNF, IL6 and CRP participated the formation of insulin resistance,Tangnaikang coulddegrade the inflammatory factor levels to improve the insulin resistance.    Key Words Tangnaikang;

6、 3T3L1 adipocyte; Insulin Resistance; Inflammation    胰岛素抵抗(Insulin Resistance, IR)是2 型糖尿病(Type 2 Diabetes Mellitus,T2DM)发病中的主要环节,其形成机制复杂,近年来研究提示IR 是个慢性非特异性炎症过程,慢性炎症参与了IR 的发生与 发展 。因此,干预炎症过程,改善IR 将成为防治T2DM 的新趋势。故本实验以炎症IR 为切入点,通过观察中药复方糖耐康对胰岛素抵抗3T3L1脂肪细胞中炎症因子水平的影响,为其防治IR 及T2DM 提供可靠依据。

7、60;    1 材料与方法     1.1 主要材料    3T3L1 前脂肪细胞株购自ATCC;DMEM 高糖培养基,新生牛血清均购自GIBCO 公司;牛胰岛素,3 异丁基1 甲基黄嘌呤(IBMX),地塞米松(DEX),油红“O”染剂均购自Sigma 公司;葡萄糖检测试剂盒购自国药集团化学试剂北京有限公司;TNF 抗体试剂盒,IL6 抗体试剂盒,CRP 抗体试剂盒均购自美国RB 公司。    1.2 实验药品    糖耐康颗粒(人参、夏枯草、女贞子、番

8、石榴叶、三白草组成):9 g/ 袋,由四川美大康佳乐药业有限公司生产提供;盐酸吡格列酮片(艾汀):15 mg/ 片,购自北京太洋药业有限公司。    1.3 主要仪器    CO2 孵育箱:BB16/BB5060 型, 德国Heraeus公司;超净工作台:半导体设备一厂生产;台式高速冷冻离心机:ST21 型,美国索福公司;高压蒸汽消毒器:HVE50 型, 日本HIRAYAMA 公司;电热恒温培养箱:HHB11420 型,天津实验仪器厂生产;低速自动平衡微量离心机:LDZ40.8 型,北京医用离心机厂生产;倒置显微镜:日本Nikon 公

9、司;酶标仪:Multiscan MK3 型;实验耗材:美国COSTAR 公司。    1.4 方法    1.4.1 3T3L1 前脂肪细胞诱导分化 将3T3L1 前脂肪细胞置于含10% 新生牛血清的DMEM 高糖培养基中,37,5%CO2 饱和湿度下培养。细胞状态良好时接种于培养板,待细胞融合2 d 后,换用含10% 新生牛血清、0.5 mmol/L IBMX、10 g/mL 胰岛素、0.25 mol/L DEX 的DMEM 高糖培养基(即诱导溶液1)培养48 h,后换用含10% 新生牛血清、10 g/mL 胰岛素(即诱导溶液2)再

10、培养48 h,随后以10% 新生牛血清的DMEM 高糖培养基继续培养,2 d 换1 次培养液,诱导分化812 d 的3T3L1前脂肪细胞90% 以上可分化为成熟的脂肪细胞,进行油红“O”染色鉴定为脂肪细胞后,方可用于实验。    1.4.2 脂肪细胞鉴定 采用油红“O”染色法,具体过程如下:将诱导分化结束的脂肪细胞,先用PBS 洗3 次以除去培养基;中性甲醛固定10 min,然后水洗,将细胞晾干20 min;加入油红“O”染液染色30 min(密封);再用60% 异丙醇冲洗,以除去多余的染料,然后水洗;加入苏木素复染细胞核2 min,用水冲洗;稍干后以甘油明胶封固;在倒置显微镜下观察。 关键词:细胞,因子,影响,脂肪,抵抗,医学论文,糖耐康颗粒对胰岛素抵抗3T3L1脂肪细胞炎症因

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