HBV-DNA的定量检测对乙肝父婴与母婴传播的研究

1、HBV-DNA的定量检测对乙肝父婴与母婴传播的研究 作者：潘大虎，翟海燕，宋农，张丽丽，周军，罗芝莹【摘要】 目的 测定HBV阳性父亲和母亲及新生儿HBV-DNA的含量，研究父婴和母婴传播与HBV-DNA含量的关系。方法 运用实时荧光定量PCR方法检测HBV表面抗原（HBsAg）阳性的父亲和阳性的孕妇血液中HBV-脱氧核糖核酸（HBV-DNA）以及脐血HBV-DNA且新生儿给予乙肝疫苗全程接种至1岁时，检测HBV-DNA，并根据父母HBV-DNA含量的不同分别分为A1(HBV-DNA1.0103 Copies/ ml)、B1(HBV-DNA为1.01031.0107 Copies/ ml)、C

2、1(HBV-DNA1.0107 Copies/ ml)组，父母为A2(HBV-DNA1.0103 Copies/ ml)、B2(HBV-DNA 1.01031.0105 Copies/ ml)、C2(HBV-DNA 1.0107 Copies/ ml)组。结果 脐血HBV-DNA阳性率：A1组为24.32%、B1组为38.71%、C1组为44.83%，A2组为14.70%、B2组为26.67%、C2组为39.29%。结论 父婴传播与母婴传播均与血清 HBV-DNA含量的高低有关，其HBV-DNA含量越高垂直传播的风险越大。 【关键词】 父亲；母亲；血传病原体；HBV感染；婴儿，新生；疾病传播，

3、垂直慢性乙型肝炎病毒(HBV)是全世界关注的公共卫生问题，我国是乙肝高流行区，其携带者高达10%15%HBV的围生期传播是重要的传播途径1，且母婴传播的发生率和发生机理已早有人报道2，为探讨父婴的传播率和传播机理，我们分别选择了97例母亲和92例父亲进行HBV-脱氧核糖核酸(HBV-DNA)检测并随访婴儿，找出父婴和母婴传播的机率和原因，现报道如下。1 资料和方法1.1 一般资料 收集本院2006年1月2006年10月门诊及住院的HBsAg阳性的父亲92例，母亲97例，其中母亲年龄2330岁，平均24.3岁，父亲年龄2431岁，平均26.5岁。根据母亲血清HBV-DNA含量分为A1、B1、C1

4、组，根据父亲血清HBV-DNA含量分为A2、B2、C2组。婴儿分别采集脐血和1周岁时采血，并分别做HBV-DNA测定。1.2 HBV-DNA测定 HBV-DNA定量采用广州达安基因诊断中心提供的7600型荧光定量PCR扩增仪及其配套试剂检测，表面抗原定性采用ELISA法检测，试剂购自于上海科华公司。1.3 统计学处理 计数资料采用2检验。2 结果2.1 母亲血清HBV-DNA水平与新生儿脐血HBV-DNA水平的关系 见表1，其中A1、B1、C1组的HBV-DNA阳性率各组间比较差异有显著性（P0.05)，这与文献3报道的基本一致。表1 母亲血清HBV-DNA水平与新生儿脐血HBV-DNA的关系

5、（略）2.2 父亲血清HBV-DNA水平与新生儿脐血HBV-DNA水平的关系 见表2，其中A2、B2、C2组，HBV-DNA阳性率各组间比较差异有显著性（P0.05），这与文献3报道的基本一致。表2 父亲血清HBV-DNA水平与新生儿脐血HBV-DNA的关系（略）3 讨论3.1 HBV易母婴传播，而且多数发生在无症状HBV携带者，据估计全世界大约有3亿5000万HBV携带者，因此HBV母婴传播倍受关注，HBV母婴传播率各报道差异甚大4，5。本组就脐血的阳性率进行研究可知，随着母血HBV含量的增加感染的几率增加，宫内感染随孕妇血清HBV-DNA含量增加而增高。当母血HBV-DNA108 Copi

6、es/ml时，即使注射高效免疫球蛋白（HBIG）仍可能有高达43%的宫内感染率，提示孕妇血清HBV-DNA含量的高低是宫内感染的重要因素6，因此，用孕妇血清中HBV-DNA含量来衡量其母婴传播的危险性更为可靠，降低血清HBV-DNA含量有望降低母婴传播率7。乙肝疫苗联合HBIG效果更好，单纯疫苗需34年加强注射，HBIG加乙肝疫苗45年也必须加强注射8，但应注意到即使这样仍有20%30%的新生儿接种者未能产生HBsAb或呈现病毒血症及慢性病毒携带状态9。 3.2 有报道10，在父亲HBV阳性而母亲HBV阴性的引产胎儿发现HBV感染；在父亲HBV阳性而母亲HBV阴性的活产婴儿出生时即检出HBV感

7、染标志。我们通过分组研究定量检测胎儿的脐血HBV-DNA含量可知，的确存在父婴传播并随着HBV-DNA含量的增加感染率增大。乙肝患者的精子中带有乙肝病毒，HBV-DNA可存在于精子头部的细胞浆中，通过受精，就可以在子代细胞中继续复制，发生子代细胞感染，引起乙肝的父婴传播，父婴传播的发生都是在生命的早期。当父亲表面抗原、e抗原双阳性者，其所生婴儿的感染几率可达80%以上，当父亲e抗原体阳性时，其后代的感染率为20%左右。这与本组所研究的随着HBV-DNA含量的增加，其后代的感染率几率增加基本相符。且研究结果显示，父婴间的传播是可以阻断的，父亲的HBV-DNA含量越低越易阻断。由此可知，我们可以通

8、过抗病毒治疗来降低父亲或母亲的HBV-DNA含量，从而降低父婴和母婴的乙肝传播几率，这对乙肝的防治、控制乙肝的垂直传播有着极为重要的价值。【参考文献】 1 中华医学会传染病与寄生虫病学会.肝病分会，病毒性肝炎防治方案J.中华肝脏病杂志，2000，8（6）：324-329.2 牟瑞丽，马玉燕，王磊一，等.孕妇乙型肝炎病毒携带状态与母婴传播的研究J.现代妇产科进展，2004，13(1)：22-24.3 马静，白宝敏，万波，等.母亲血清及新生儿脐血HBV-DNA水平与乙肝免疫失败的关系J.中国医师杂志，2005，7(12)：1718-1719.4 Hill JB.Sheffield JS，Kim M

9、J，et.Risk of hepatitis B transmission in breast-fed infant of chronic hepatitis B carriersJ.Obstet Gynecol，2002，99(6)：1049-1052.5 林坚，廖莳，郭广洲，等.乙型肝炎病毒定量在母婴传播中的意义J.中华儿科杂志，2002，40(2)：85.6 李小毛，施敏凤，杨越波，等.孕妇注射乙肝免疫球蛋白阻断宫内传播的研究J.中国优生与遗传杂志，2002，10(1)：63.7 Van Zonneveld.Treatment during pregnancy to prevent perinatal transmission of heapatitis B virus infection J.J Viral Hepat 2003，10(4)：294-294.8 Goncales FL Jr，Stucchi RS，Pavan MH，et al.Hepatitis Cvirus in monozygotic twins J.Rev Inst Med Trop Sao Paulo，2004，42 (3)：163-165.9 Cacciola I，Cerenzia G，Pollicino T，et al.Genomic heterogeneity