送检时间对脱落细胞形态影响的定量研究

1、    送检时间对脱落细胞形态影响的定量研究        键词脱落细胞；时间因素；像细胞测定中分类号R446.9文献标识码A文章编号1001-7399(2000)04-0345-01 离体的脱落细胞，随着离体时间的增加而逐渐自溶，其细胞形态发生较大改变而影响观察，但离体时间对脱落细胞形态的影响至今缺乏科学定量分析，本实验应用CMIAS-007真彩色象分析仪，对不同时间离体脱落细胞标本进行定量分析，以发现最佳的送检时间，为临床合格地送检脱落细胞标本提供科学的依据。1材料与方法

2、11像分析和切片的制备20例胸腔积液穿刺标本，均为我院1999年2月6月住院患者，并直接在穿刺后取得标本。把标本等量分为5份，分别在15 min、30 min、60 min、90 min和120 min以3000 r/min离心，各制涂片2张，混合固定液（95%乙醇50 ml+乙醚50 ml+冰醋酸1 ml）固定后，常规HE染色后备用。每例标本制片10张，全部共制片200张。12像分析随机取每例的每个时间点的切片1张，在CMIAS-007真彩色像分析仪下，恒定的光源强度、一定的放大倍数（10×40）下，选择细胞较为密集重叠较少的区域，应用像分析仪的自动分割、编辑及统计功能，获得脱落细

3、胞形态的原始数据。对重叠的细胞人工剔除。每张切片在不同区域测定不少于100个不同的细胞，一张切片细胞数不够，可用另一张切片，使被测细胞数每例大于100个。分别测定了脱落细胞的面积 、周长、细胞长径、细胞短径及形状因子。所有原始数据以时间分组输入微机，经SPSS8.0统计软件进行t检验。2结果2.1定性观察送检15 min组的脱落细胞其结构清晰，核染色较深、染色质及核膜清晰。30 min与60 min组细胞略增大，结构尚清晰，核也略增大，染色质结构较模糊，核膜尚清。90 min与120 min组细胞继续增大、变性，结构模糊不清，核进一步增大、淡染，呈均质状，核膜不清，部分核膜破裂，细胞呈均质嗜碱

4、性细胞。另有多少不等的细胞膜破裂，胞质溢出，似裸核细胞。2.2定量结果各时间组脱落细胞的测试值及各组间细胞测试值之间的t检验分别见表1、2。表1各时间组细胞的测试值（±s）组别(min)细胞面积细胞周长细胞长径细胞短径形状因子1516.2495±1.062018.8258±0.87585.0622±0.21853.6032±0.21850.6859±0.00953020.6663±1.595419.7594±1.17309.5215±4.25343.5236±0.17120.9288±

5、0.30216020.1248±1.095525.2016±2.66036.1241±0.230754.4736±50.85930.6157±0.02039024.3725±3.061523.7416±2.18056.5326±0.49764.2015±0.33590.6784±0.032312049.0025±5.911833.1506±2.74057.8294±0.42747.6739±2.64170.6132±0.0148表2各组间细胞测试

6、值之间的t检验的t值组间 (min)细胞面积细胞周长细胞长径细胞短径形状因子15302.305*0.6381.1430.2870.87715602.293*2.834*3.992*1.0003.134*15902.507*2.092*2.832*1.5230.223151205.453*4.979*6.115*1.5364.138*30600.2802.132*0.6161.0020.79830901.1851.7600.5251.995*0.620301204.628*4.492*0.3831.5681.00860901.3350.4220.7950.9601.663601204.803*2

7、.081*3.511*0.9190.099901203.700*2.687*1.977*1.0162.071*P0.05，*P0.01 3讨论从实验结果看，15 min组的细胞面积与其他各时间组的细胞面积存在有明显差异（P<0.05）。也就是说，离体脱落细胞15 min以后就发生了明显变化。虽然30 min、60 min和90 min组的脱落细胞面积均值有微小差异，但它们之间未见明显统计学差异(P>0.05)。细胞周长除15 min与30 min组、30 min与90 min组和60 min与90 min组未见明显差异外(P>0.05),其它各时间组之间也有明显差异(P<

8、;0.05)。离体的脱落细胞，随着时间的延长而逐渐增大，即细胞面积逐渐增大。特别是15 min到30 min组发生明显改变；而30 min、60 min与90 min组则相对稳定，定性观察发现这一时间段内主要是细胞核退变形态变化为主；120 min组的细胞面积是15 min组的2倍。细胞周长也随时间的变化而变化。细胞长径、细胞短径及形状因子的变化则无规律。脱落细胞标本一般要求离体后30 min送检，这是病理工作者长期实践中得出的结论。但本实验结果提示这一时间还应提前到离体15 min。因此，临床科应与病理科密切配合，为提高细胞学的诊断准确率应在15 min内把离体细胞标本送到病理科，而病理科也必须马上固定、制片，以尽量减少细胞退变对准确诊断的影响。（该实验承蒙张继增教授指导，特此致谢!）作者简介：高自芳