地塞米松对脂多糖诱导急性肺损伤大鼠的保护作用

1、地塞米松对脂多糖诱导急性肺损伤大鼠的保护作用         09-08-17 10:03:00     作者：程水珍    编辑：studa20【摘要】  目的通过地塞米松对脂多糖（Lipopolysaccharides，LPS）诱导的大鼠急性肺损伤时炎症介质的影响作用，探讨其对肺脏的保护机制。方法 健康雄性S-D大鼠随机分成A、B、C、D组，各组分别按1、2、4h三个时间点再设立3个亚组。A组经腹腔注射地塞米松;B组经腹腔

2、注射LPS，C组在腹腔注射LPS前1h经腹腔注射地塞米松，D组为对照组。在到达各时间点后，经腹腔注射加倍剂量的硫喷妥钠处死，切开气管，并予00.9%氯化钠注射液（normal saline，NS）作肺泡灌洗。采用酶联吸附免疫法（ELISA）测定肺泡灌洗液（broncho alveokar lavage fluid，BALF）中的肿瘤坏死因子-（tumor necrosis factor-，TNF-）、白介素-1（iaterlrukin-I，IL-1）与巨噬细胞炎性蛋白-2（macrophafe inflamnatovy protein-2，MIP-2）。另外12只大鼠按上述分组法随机分成4组，

3、每组3只，动物模型同上，作肺组织病理观察。结果在病理形态学上与D组比较，B组肺损伤严重。BALF中TNF-、IL-1、MIP-2在A、B、C、D组间比较差异均有统计学意义（F分别=15.51、47.37、19.94、134.27、65.44、57.29、18.44、85.31、89.13，P均<0.05）。B组与D组比较，TNF-差异有统计学意义（t分别=5.37、8.69、6.43，P均<0.05）、IL-1差异有统计学意义（t分别=7.25、9.77、11.51，P均<0.05）、MIP-2差异有统计学意义（t分别=6.84、12.38、15.52，P均<0.05）

4、;C组与D组比较，TNF-差异有统计学意义（t值分别为2.43、2.67、1.98，P均<0.05）、IL-1差异有统计学意义（t分别=3.58、4.15、4.81，P均<0.05）、MIP-2差异有统计学意义（t分别=1.87、3.73、7.55，P均<0.05）;C组与B组比较，TNF-差异有统计学意（t分别=3.15、4.19、4.03，P均<0.05）、IL-1差异有统计学意（t分别=3.71、5.27、5.81，P均<0.05）、MIP-2差异有统计学意义（t分别=4.33、6.89、7.14，P均<0.05）。结论地塞米松可降低炎症介质水平，提示

5、对肺脏具有保护作用。 【关键词】  地塞米松 脂多糖 肺损伤 炎症介质    【Abstract】 Objective To study the protective effects of dexamethasone on lipopolysaccharide（LPS）-induced lung injury in rats.Methods SeventytwoS-Dratswererandomlydividedinto4groups（groupA，B，C，D），andeachgroup dividedinto3subgroups at1，2and4ho

6、urs.GroupDwas control，groupAreceivedDEX（1mg/kg）byintraperitoneallyin-jection，groupBreceivedLPS（5mg/kg）byintraperitoneallyinjection，andgroupCreceivedDEX1hourbeforeLPSbyin-traperitoneally injection.All the animalswere killedwithoverdose of sodiumpentathol at1，2and4hours respectively.The bronchoalveola

7、rlavage（BAL）wasperformedthroughatrachealcannulawith8mlice-salineeachrat，andthewithdrawalrate ofbronchoalveolarlavagefluid（BALF）wasmorethan70%.The concentrationoftumornecrosisfactor-（TNF-），in-terleukin-1（IL-1），andmacrophageinflammatoryprotein-2（MIP-2）weremonitoredinBALFbyELISA.Another12ratswererandom

8、lydividedinto4groups，3ratsineachgroupforhistologicalstudy.Results Lunginjurywasseriousingroup BcomparedwithgroupD.Therewerenosignificantdifferences inthe concentrationofTNF-，IL-1andMIP-2between groupAandD（P>0.05）.TheseparametersweresignificantlyhigheringroupBandCthanthatofgroupAandD（P<0.05），an

9、dincreasedmoresignificantlyingroupB（P<0.05）.The concentrationofIL-1andMIP-2wereincreasingasthetime elongation，andpeaked at4hours;TNF-peaked at2hours inthesetwogroups.IL-1，MIP-2andTNF-were sig-nificantlyloweringroupCthanthatofgroupB（P<0.05）.Conclusion DexamethasonecouldprotectLPS-inducedlung in

10、jurythroughinhibitinflammatorymediators.    【Keywords】dexamethasone;lipopolysacchride;lunginjury;inflammatorymediators     致其发生。目前，ALI的发病机制尚未完全阐明，但普遍认为，炎症介质的大量产生和释放以及中性粒细胞的激活是其重要的发病机制 1，2 。巨噬细胞炎性蛋白-2（macrophage inflammatory protein-2，MIP-2）、肿瘤坏死因子-（tumornecrosisfac

11、tor-，TNF-）和白介素-1（interleukin-1，IL-1）均为反映早期炎症反应的产物。地塞米松具有明显的抗炎作用，但在临床上应用于治疗ALI则一直存在争议。本次研究采用脂多糖诱导的大鼠ALI模型，研究在给予地塞米松后肺泡灌洗液（broncho alveolar lavage fluid，BALF）中的炎症介质变化及其对肺脏的保护作用。    1材料与方法    1.1 材料 健康雄性S-D大鼠72只，体重195270g，平均（231±38）g（由浙江医学科学院提供）。采用随机排列表法分成4组，即地塞米松组（A组

12、）、脂多糖（lipopolsacc ahride，LPS）组（B组）、LPS+地塞米松（C组）和对照组（D组），上述各组分别按1、2、4h时间点再设立3个亚组（共12个亚组），每亚组大鼠数为5只。另外12只大鼠按上述分组法随机分成4组，每组3只，均为4h时间点，作肺组织病理观察。    1.2模型制作及取材动物模型制作参照文献 3，4 。采用硫喷妥钠30mg/kg腹腔注射麻醉。A组在予以无菌0.9%氯化钠注射液（normal saline，NS）0.5ml腹腔注射1h后，再重复一次;B组在腹腔注射NS0.5ml前1h经腹腔注射地塞米松1mg/kg（由浙江仙居制药股份有限公司生产，批号030507）;C组在腹腔注射脂多糖5mg/kg（LPS，美国Sigma公司，Eschrichia coli055:B5，L2880）前1h经腹腔注射NS0.5ml;D组在腹腔注射LPS前1h经腹腔注射地塞米松1mg/kg。所有动物在到达各实验时间点后，均经腹腔注射加倍剂量的硫喷妥钠处死。行气管切开术，插入自制14G血管留置导管，深度约1cm，缝线结扎固定以防BALF溢出。经导 管缓慢注入无菌冰NS8ml，并回抽，反复进行5次（最后将动物置于头低足高位），BALF回收率&g