感觉神经端侧缝合后神经再生趋化性的实验研究 医学论文

1、    感觉神经端侧缝合后神经再生趋化性的实验研究 医学论文              本文由中国论文范文收集整理。 【摘要】   目的: 探讨感觉神经端侧缝合后神经再生的趋化性 问题 。 方法 : 健康雌性SD大鼠20只，分为神经端侧缝合组和正常对照组，每组10只。端侧缝合组切断前臂内侧皮神经，尺神经后内侧方外膜开窗，将前臂内侧皮神经和开窗的尺神经外膜做端侧缝合，正常对照组仅显露前臂内侧皮神经和尺神经。1年后采用乙酰胆碱酯酶

2、染色和Fluoro-Gold荧光逆行示踪技术，观察和计数前臂内侧皮神经纤维和大鼠脊髓C5T1前角和背根神经节神经元。结果: 乙酰胆碱酯酶染色结果显示，正常组未发现运动神经纤维，端侧缝合组有髓神经纤维数目是正常对照组的23.0（P <0.01），运动神经纤维占有髓神经纤维的比例为0.34±0.16（P <0.01）。神经元逆行荧光示踪结果显示，正常组脊髓前角未发现荧光标记阳性的神经元；端侧组脊髓前角荧光标记神经元数目为150.9±104.8（P <0.01），运动神经元比例为0.27±0.11（P <0.01）。结论: 感觉神经端侧缝合后神经

3、侧方出芽对特定靶器官的趋化性不明显。 【关键词】   周围神经；端侧缝合；趋化性    Abstract:  Objective: To detect whether there is neurotropism following end-to-side neurorrhaphy of sensory nerve. Methods: Twenty female Sprague-Dawley rats were divided into 2 groups: end-to-side neurorrhaphy group and normal con

4、trol group. In the end-to-side group， the cutaneous antebrachii medialis nerve(CAM) was transected， then an 1 mm epineural window was created on the ulnar nerve. Distal end of CAM nerve was sutured to the windowed ulnar nerve by means of end-to-side neurorrhaphy. In the normal control group， CAM and

5、 ulnar nerves were exposed. One year post-operatively，evaluations including acetylcholinesterase（AchE）stain and retrograde Fluoro-Gold neuron tracing were conducted. Results: AchE staining showed that in the end-to-side group myelinated nerve fiber count was 23.0% as compared to normal control group

6、 (P <0.01)， and the percentage of motor fibers in the end-to-side group was 0.34±0.16 (P <0.01). Retrograde neuron tracing demonstrated that the motor neuron counts in CAM end-to-side group were 150.9±104.8 (P <0.01)， and the percentage of motor neuron in the end-to-side group was

7、 0.27±0.11 (P <0.01). Conclusion: Neurotropism in collateral spouting after end-to-side neurorrhaphy of sensory nerve is not significant.    Key words:  peripheral nerve；end-to-side neurorrhaphy；tropism    周围神经损伤是临床常见而恢复效果较差的损伤。周围神经端侧缝合是将断离的周围神经的远侧断端，缝接在附近完

8、整神经干的侧面。1992年巴西学者Viterbo首次通过动物实验证实端侧缝合后受体神经存在新生神经纤维。之后各国学者进行了大量的相关 研究 ，但是对于端侧缝合后的神经趋化性问题，研究较少。我们曾对混合神经端侧缝合后的趋化性问题进行研究，初步证实混合神经端侧缝合后神经再生对特定靶器官的趋化性不明显，现选用纯感觉神经作为受体神经进一步研究该问题。     1   材料和方法     1.1  材料  成年雌性清洁级SD大鼠20只，体重100150 g，实验动物手术和饲养均在复旦大学实验动物部进行（S

9、PF级实验室）。SXP-1B台式手术显微镜（上海医用光学仪器厂产品）。LeicaDWLB2型荧光显微镜（德国Leica公司产品）。3% Fluoro-Gold水溶液(美国Sigma公司产品)。    1.2  动物模型制备与分组  取SD大鼠，用1%戊巴比妥钠（5 mg/100 g）腹腔麻醉后，随机分成2组：神经端侧缝合组。共10只，显露臂丛神经束支部。在前臂内侧皮神经发出点处将其切断，近侧断端用11-0线缝扎，逆向包埋入附近肌肉中。游离尺神经，在距其内侧束发出点5 mm处，用显微镊小心纵向撕开尺神经后内侧方长约1 mm外膜，注意避免损伤尺神经

10、的神经束。然后用11-0线将前臂内侧皮神经远侧断端1针端侧缝合于尺神经后内侧方。正常对照组。同前方法显露前臂内侧皮神经、尺神经，未予特殊处理。各组操作完毕，用生理盐水冲洗神经和创面后，逐层缝合胸大肌、皮肤。动物按组别分笼饲养。    1.3  乙酰胆碱酯酶染色  动物饲养1年后，麻醉固定，显露臂丛神经束支部，正常组距发出点5 mm，端侧组距缝合点远端5 mm处取前臂内侧皮神经，均长约3 mm。经固定漂洗，冷冻切片，采用改良Karnovsky-Roots法孵育，采用VIDS型半自动图像 分析 仪进行图像分析，计数运动纤维含量。 

11、0;  1.4  神经元荧光逆向示踪标记  动物饲养1年后，常规麻醉、固定后，显露前臂内侧皮神经。放大10倍显微镜下用1l微量注射器于神经外膜下注射1l 3% Fluoro-Gold水溶液。FG荧光染色3 d后，动物常规麻醉、固定后，经心脏灌注，切取C5T1节段脊髓及背根神经节，再经固定脱水后，脊髓做横截面连续冰冻切片（Leica 冰冻切片机，德国），片厚50m，背根神经节予以横断面连续切片，片厚40m，用LeicaDWLB2型荧光显微镜观察，荧光滤镜采用2（激发波长330380 nm），神经元胞浆内的Fluoro-Gold激发黄白色荧光（波长440 nm）。对各组的有核前角运动神经元及有核背根感觉神经元进行计数。 关键词:神经,研究,实验,感觉,再生,缝合,医学论文,感觉神