荧光分光光度法测定滴眼液和滴耳液中氧氟沙星的含量

1、    荧光分光光度法测定滴眼液和滴耳液中氧氟沙星的含量        摘要目的:用荧光分光光度法测定氧氟沙星滴眼液、滴耳液中的主药氧氟沙星含量。方法:样品液经蒸馏水稀释后，以330 nm为激发波长，460 nm为发射波长，用荧光分光光度法测定其含量。结果:氧氟沙星在0.012.00 gml-1浓度范围呈良好线性，回归方程为：Y=32.63 C-0.17，r=0.999 9。滴眼液及滴耳液的回收率分别为99.9%(RSD=0.8%，n=5)和99.5%(RSD=0.4%，n=

2、5)。结论:本法简便易行，灵敏度高，重现性好，可用于氧氟沙星滴眼液及滴耳液的含量测定。关键词氧氟沙星；荧光分光光度法；滴眼液；滴耳液中分类号：R927.2文献标识码：A文章编号：1001-5213(2000)04-0216-03Determination of ofloxacin in eye drops and ear drops by fluorospectrophotometryYang Changjin,Mei Ni,Yang Cheng(Institute of Material Medical,Guangdong College of Pharmacy,Guangdong Guan

3、gzhou 510240)ABSTRACTOBJECTIVE：A method with fluorospectrophotometry was established for the determination of ofloxacin in eye drops and ear drops.METHODS：Samples were treated with distilled water.The excitation wavelength was 330 nm,and the emission wavelength was 460 nm.RESULTS：Linear relationship

4、 was found in the ofloxacin concentration ranging from 0.01 g*ml-1 to 2.00 gml-1.The correlation coefficient was 0.999 9.The recoveries of amount for these preparations were individually found to be 99.9%(RSD=0.8%，n=5) and 99.5%(RSD=0.4%，n=5).CONCLUSIONS：The method is simple,accurate and sensitive w

5、ith good reproducibility.This method can be used to determine ofloxacin in eye drops and ear drops.KEY WORDSofloxacin;fluorospectrophotometry；eye drops;ear drops氧氟沙星滴眼液和滴耳液均为医院制剂。滴眼液的处方主要为氧氟沙星、醋酸地塞米松、硼酸、亚硫酸氢钠等，滴耳液的处方主要为氧氟沙星、甲硝唑、甘油、冰片等。氧氟沙星含量测定部颁标准规定用非水滴定法1，但这两种制剂均为含水制剂，故不适用。曾有文献报道用紫外分光光度法2、高效液相色谱法3、

6、一阶导数光谱法4、系数倍率差示光谱法5测定含水制剂，以及HPLC-荧光检测器测定支气管洗液中氧氟沙星6。本文以荧光分光光度法直接测定氧氟沙星的含量，取得了满意的结果。1仪器与试剂日立650-60型荧光分光光度计；日本岛津UV-2201型紫外分光光度计；1×10-4molL-1盐酸溶液(自制)；氧氟沙星对照液：精密称取氧氟沙星对照品(广州医药工业研究所提供)20.00mg，用1×10-4 olL-1盐酸溶解并定容至100 ml，制得200 gml-1储备液，使用时用水稀释至0.6gml-1工作液；氧氟沙星滴眼液(医院制剂)；氧氟沙星滴耳液(医院制剂)；试剂均为分析纯；水为三蒸

7、水。2方法与结果2.1荧光光谱的测定取氧氟沙星对照液，以水为空白(激发、发射狭缝均为5.0nm)扫描，得Ex/Em为330 nm/460nm，见1。1氧氟沙星激发光谱与发射光谱a.激发光谱b.发射光谱(水溶液)c.发射光谱(0.01 molL-1盐酸)2.2荧光强度与介质pH值的关系精密量取氧氟沙星储备液0.200ml，分别用0.1，0.01，1×10-3，5×10-4，1×10-4molL-1盐酸溶液，蒸馏水及pH=9的氢氧化钠溶液稀释并定容至50ml，在ex=330nm，em=460nm(狭缝均为5.0nm)，分别测定荧光强度F值。实验结果表明，盐酸浓度在0.

8、011×10-3molL-1范围内F值变化很微，而盐酸浓度大于0.1molL-1后，F值下降；当pH值在6.57.5范围内F值增强且稳定，发射波长均为460nm；当pH值大于7.5时，F值逐渐下降。本文采用水作稀释剂测定。2.3稳定性试验取氧氟沙星对照液，于5h内每隔0.5h测定其荧光强度。结果表明，在5h内其荧光强度基本不变，光线对测定也无明显影响。2.4精密度试验以水为空白，连续测定0.6gml-1工作液的F值，其RSD为0.8%(n=7)。2.5线性范围和检测限精密量取氧氟沙星储备液2.50ml，用水定容至100ml，配成5.0gml-1溶液。精密量取0.05，0.25，0.5

9、0，2.50，5.00，10.00ml，分别置6个25ml量瓶中，用水定容，其浓度分别为0.01，0.05，0.1，0.5，1.0，2.0gml-1，以水作参比，于ex=330nm，em=460nm(狭缝均为5.0nm)测定F值。结果表明，氧氟沙星浓度在0.012.00gml-1范围内F值与浓度呈良好的线性关系，回归方程为：Y=32.63C-0.17，r=0.9999。2.6回收率试验按处方配制空白介质(滴眼液：醋酸地塞米松、硼酸、尼泊金乙酯、亚硫酸氢钠、蒸馏水；滴耳液：95%乙醇、甘油、甲硝唑、冰片、蒸馏水)，于3个100ml量瓶中各加入1.00ml，精密吸取氧氟沙星储备液1.0，5.0，1

10、0.0ml分别置上述量瓶中，以水定容。摇匀后各吸取5.0ml于3个100ml量瓶中，加水空容，摇匀后按2.7项下测定。测得量与已知加入量比较求得回收率，见表1。表1回收率测定结果(n=5)样 品加入量gml-1实测值gml-1回收率%平均回收率/%RSD%平均RSD%滴眼液0.1000.09999.199.50.50.5000.49899.50.80.61.001.00100.00.5滴耳液0.1000.100100.099.60.50.5000.49899.50.50.41.000.99399.30.22.7样品处理及测定精密量取样品1.0ml于100ml量瓶中，用水定容。摇匀后吸取2.0m

11、l于100 ml量瓶中，用水定容，摇匀。以水为空白，330nm为激发波长，460nm为发射波长，测定F值。另配制0.6gml-1氧氟沙星对照液同时测定。样品F值与对照液F值比较求得含量。以本法测定滴眼液的同时，用紫外分光光度法进行对照试验，结果基本相符，测定结果见表2。 表2样品测定结果(相当于标示量%，n=5)样品样品号FS法RSD/%UV法滴眼液198.30.597.6298.80.698.03100.00.499.2滴耳液1104.20.62104.00.33108.90.53讨论 激发波长亦可用293nm，本文采用了330nm的目的是为了减少样品光分解的可能。本法在pH值小于6.5的介

12、质中，发射波长红移到508nm，且pH值大于7.5灵敏度下降。由于滴耳液中甲硝唑在293nm和330nm处均有较大吸收，且含量高于氧氟沙星，对测定造成极大的干扰，故未采用紫外分光光度法对滴耳液进行对照实验。本法简便，灵敏度高，专属性强，基质及辅料对主药的测定无干扰，结果准确。氧氟沙星检出限为0.01gml-1。杨昌金（广东药学院药物研究所，广东 广州 510240）梅霓（广东药学院卫检94级毕业生，广东 广州510240)杨程（广州何济公制药厂，广东 广州 510170）参考文献1，卫生部药品标准S.WS-78(X-61)-932，陈云，陈国芳，李小慧等.紫外分光光度法测定氧氟沙星制剂的含量J.中国药科大学学报，1994，25(6)：3393，宗莉，张秀芝，李康乐.氧氟沙星滴耳液的高效液相色谱分析和稳定性研究J.中国医院药学杂志，1995，15(5)：2134，管明英，杨永升.一阶导数光谱法测定氧氟沙星滴眼液的含量J.中国医院药学杂志，1996，16(4)：1685，刘金来.复方氧氟沙星滴耳液的系数倍率和差示分光光度法测定J.中国医药工业杂志，1997，28(11)：5146，Kyuichi M,Tsutomu U,Tasuaki O.Deter