山东省1999年麻疹实验室监测结果分析

1、    山东省1999年麻疹实验室监测结果分析        摘要：山东省1999年共报告麻疹疑似病例1776例，采集血清标本861份，采集率为48.48。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）捕获法检测麻疹、风疹IgM抗体，阳性率分别为59.12（509861）和10.34（89861），两者全部阴性者占30.54（263861）。1337例麻疹暴发疑似病例，麻疹、风疹IgM抗体阳性率分别为58.81（327556）和14.57（81556）；439例散发疑似病例分别为59.6

2、7（182305）、2.62（8305）。首次在1例典型麻疹确诊病例的咽拭子标本中分离到1株麻疹野病毒株。ELISA捕获法检测IgM抗体用于麻疹的血清学早期诊断敏感性较高，其结果与血清标本采集时间及麻疹疑似病例的最终分类有很大的关系。关键词：麻疹IgM抗体；风疹IgM抗体；麻疹病毒中分类号：R511.1 文献标识码：A 文章编号：1006916X（2000）060348-03Analysis of Laboratory Surveillance for Suspected Measles Cases in Shandong Province in 1999WANG Chang-yin， XU

3、Qing， XU Ai-qiang(Shandong Provincial Epidemic Prevention Station，Shandong，Jinan 250014，China)Abstract：1，776 suspected measles cases were reported in Shandong Province in 1999.Among them，861（48.48） serum specimens were tested for measles and rubella IgM antibodies by Capture-IgM ELISA. The results s

4、howed that 59.12 cases （509861） were laboratory confirmed as measles and 10.34 （89/861） cases were confirmed as rubella。Of the 1，337（75.28） outbreak cases， 556（41.58） serum specimens showed 58.81 （327556） and 14.5（81556） positive to measles and rubella respectively.Of the 439（24.72） sporadic cases，3

5、05（69.48） serum specimens showed 59.67 and 2.62 positive to measles and rubella respectively.One measles wild type virus was isolated from a typical measles case. The capture-IgM ELISA is highly sensitive for early diagnosis of measles and rubella，the results are related to the time of sample collec

6、tion and the final classification of suspected measles cases.Key words：Measles IgM antibody； Rubella IgM antibody； Measles virus1999年，山东省17个市（地区，下同）麻疹实验室监测网络全面启动。按山东省麻疹控制方案的要求，麻疹疑似病例早期血清学检测和咽拭子采集工作由各市卫生防疫站麻疹实验室承担，并统一采用酶联免疫吸附试验（ELISA）捕获法检测血清IgM抗体，省卫生防疫站负责供应检测试剂并对各市麻疹实验室进行年度质量控制。为评价实验室监测在麻疹控制中的作用，进一步完

7、善今后麻疹实验室监测工作，我们对山东省1999年麻疹实验室监测结果进行分析，现报告如下。材料与方法1标本采集由各市麻疹实验室采集疑似病例的血清标本和咽拭子标本。血清标本在3天内完成检测，及时报告结果并反馈省卫生防疫站；咽拭子尽快送省卫生防疫站麻疹实验室，不能及时送检时，30暂时存放市麻疹实验室。2实验方法血清学诊断采用国际通用的ELISA IgM抗体捕获法，检测试剂由上海荣盛生物技术有限公司提供，由省卫生防疫站统一发放。B95a细胞由中国预防医学科学院病毒学研究所提供，用于咽拭子麻疹病毒分离。3判断标准血清标本以酶标仪判定，用波长450nm测OD值，PN2.1为IgM抗体阳性；咽拭子以B95a

8、细胞呈融合病变为判断依据。4结果分析所有资料录入计算机，以Excel软件进行分析。结果1标本采集及结果反馈情况1999年全省监测系统报告麻疹疑似病例1776例，采集血清标本861份，采集率为48.48。除枣庄、聊诚、临沂、菏泽等市血清标本采集率低（30左右）外，其余市均较高（90）。全省3天内血清标本送检率为82.03，检测结果及时反馈率为99.77。共采集咽拭子标本65份，采集率为3.66。2IgM抗体检测结果861例麻疹疑似病例血清标本中，麻疹IgM抗体阳性率为59.12（509861），风疹IgM抗体阳性率为10.34（89861），两者全部阴性者占30.54（263861）。暴发的13

9、37例疑似病例中，采集血清标本556例，其中麻疹IgM抗体阳性率为58.81（327556），风疹IgM抗体阳性率为14.57（81556）；散发的439例病例中，采集血清标本305例，麻疹、风疹IgM抗体阳性率分别为59.67（182305）和2.62（8305）。经实验室确诊，我省的暴发病例中绝大部分为麻疹，但泰安、东营、枣庄、莱芜等市有小范围的风疹流行。3IgM抗体阳性率与采集血清标本时间的关系在所采集的861例血清标本中，对采集时间明确的646例疑似病例进行分析显示，出疹后328天采集，血清IgM抗体检出率为87.79；出疹后3天，IgM抗体检出率为61.46；出疹后28天仍有78.5

10、0的血清标本检出IgM抗体。如果将出疹后328天为合格采集，出疹后3天、28天为不合格采集（IgM抗体阳性率为62.25），两者IgM抗体阳性率之间差异有极显著的统计学意义（257.26，P0.01）（表1）。表1麻疹疑似病例IgM抗体阳性率与采集血清标本时间的关系采样时间检测数阳性数IgM抗体阳性率（）出疹后328天34430287.79出疹后3天28817761.46出疹后28天141178.57合计64649075.854咽拭子标本病毒分离及其与相应血清标本IgM抗体的关系在65份咽拭子标本中，仅对有明确采集时间的59份咽拭子标本进行分析。59份咽拭子标本中同时采集血清标本者30份，占5

11、0.85。其中血清学确诊麻疹24例，IgM抗体阳性率为80.00（2430），分离麻疹病毒1株（暴发病例，出疹当天采样，麻疹IgM抗体阳性、风疹IgM抗体阴性）。而另外29份病毒分离阴性的咽拭子标本，因未采集血清标本，无法进行血清学诊断（占49.15）。其中，暴发病例和散发病例的咽拭子中未采集血清标本者，分别占51.11（2345）和42.86（614）。另外，从咽拭子标本采集时间分析，咽拭子标本合格（出疹当天或出疹3天内）采集率仅为55.93（3359），亦直接影响麻疹病毒的分离结果（表2）。 表2咽拭子标本病毒分离情况与相应血清标本IgM抗体的关系咽拭子标本数 出疹后不同时间采集咽拭子数

12、麻疹病毒分离株 血清IgM抗体 0天 13天 4天阳性 阴性 未采样暴发4542021119323散发140950536合计5942926124629讨论 血清学检测在麻疹的早期诊断和鉴别诊断中，具有灵敏性高、特异性强的特点，尤其在控制暴发疫情方面，起到很重要的作用13。1999年，山东省报告麻疹疑似病例1776例，采集血清标本861份，经实验室血清学检测，麻疹IgM抗体阳性率为59.12，风疹IgM抗体阳性率为10.34（部分市风疹流行）。全省3天内血清标本及时送检率、结果反馈率均达到较高水平，说明我省市级麻疹实验室的监测灵敏度逐步提高，在麻疹疫情控制方面能及时、准确的发挥作用。随着控制麻疹

13、工作的进展，实验室确诊和排除病例应逐渐提高到较高的比例4。但从我省麻疹疑似病例分析，经实验室确诊的病例在所有疑似病例中所占比例仍较低，仅28.66。这一方面是由于血清标本采集率低，另一方面是血清标本的合格采集率低，对结果有一定影响。从血清IgM抗体检测结果分析，ELISA捕获法检测IgM抗体有较高的灵敏性，出疹后328天采集，IgM抗体阳性率达87.79，但采集时间对其有一定影响。采集不合格标本所占比例的大小，影响IgM抗体阳性率的高低，并最终影响到麻疹病例的分类，尤其是散发病例。我省麻疹疑似病例的咽拭子标本采集率及合格采集率不高，麻疹病毒分离率低，仅为1.54（165），低于国内有关文献的报

14、道5。其原因是多方面的：首先，与咽拭子标本的采集质量和采集时间有很大关系。因咽拭子标本的采集工作主要由县级来完成，在采集方法上尚不规范，致使咽拭子标本的采集率低，质量不高，特别是部分咽拭子标本采集时间过晚，影响病毒的分离率。1999年，全省共采集咽拭子标本65份，在有明确采集时间的59份咽拭子标本中，在出疹当天或出疹3天内合格采集的咽拭子标本仅占55.93（3359），有44.07（2659）的咽拭子标本因采集时间过晚，错过病毒分离的最佳时间。其次，由于采用无菌华氏管进行病毒分离，其细胞接种量少、接触面过小等，估计对麻疹病毒的分离亦有较大影响，再加上咽拭子标本在保存、运送等环节方面的因素，都影

15、响了麻疹病毒的分离。另外，在所采集的咽拭子标本中，未采集血清标本的比例较高，对病毒分离阴性的标本来说，因缺乏血清学诊断联系，给进一步明确诊断带来困难。值得注意的是，在861例血清标本中，有263例其临床症状为发热、出疹，但麻疹、风疹IgM抗体全部阴性，占30.54。这是否为其它小DNA病毒引起的出疹性病例在其中（如B19病毒）？因本次未做相关实验，不好定论。但因其临床症状与轻型风疹极为相似，近年来已被引起重视。另外，不排除因采集血清标本时间过早，IgM抗体尚未出现而造成漏诊的可能。从采集时间分析，出疹后3天采样130例，占49.43（130263）。这些标本因未进行复检，将有部分IgM抗体被漏

16、检（出疹后3天采样IgM抗体阳性率61.46），从而造成漏诊。因此，为保证实验结果的准确性，必须严格血清标本的采集，对于采集时间过早（3天内）而IgM抗体阴性者，必须复检，有条件时可开展B19病毒检测，以更好地指导麻疹的控制工作。综上所述，实验室监测在麻疹的控制工作中具有很重要的作用，但标本的采集质量对实验结果有很大的影响，并最终影响麻疹病例的分类，因此，必须逐级加强对各专业人员在标本采集方面的培训，提高标本采集的质量，保证实验室检测的准确性。基金项目：山东省卫生厅资助项目（9908）作者简介：王常银（1963），男，山东省济宁市人，山东省卫生防疫站检验技师，主要从事计划免疫针对疾病的病毒学、血清学实验室研究工作。王常银(山东省卫生防疫站，济南250014)许青(山东省卫生防疫站，济南250014)徐爱强(山东省卫生防疫站，济南250014)王同展(山东省卫生防疫站，济南250014)宋立志(山东省卫生防疫站，济南250014)肖作奎(山东省卫生防疫站，济南250014)张丽(山东省卫生防疫站，济南250014)李漫时(山东省卫生防疫站，济南250014)许文波(中国预防医学科学院病毒学研究所，北京100050)参考文献：1郭可謇，宋光运，张礼璧，等.应