抗IL-2R单克隆抗体——Simulect

1、    抗IL-2R单克隆抗体Simulect        急性排斥反应是移植物失功的最重要因素，因此预防和逆转急性排斥反应就是保证移植成功和提高受者和移植物长期存活率的关键。急性排斥反应是细胞性免疫反应，就是在异抗原刺激下，T细胞的活化、白细胞介素-2(IL-2)的产生和致敏T细胞大量的克隆增殖。本文重点阐述T细胞活化增殖过程中IL-2及其受体(IL-2R)的作用，并介绍一种抗IL-2R单克隆抗体Simulect(舒莱)。一、IL-2与IL-2R1.IL-2：Morgan

2、等1976年发现一种显示有丝分裂原作用的细胞因子，它可引起T细胞增殖和维持T细胞在体外持续生长，开始将其命名为T细胞生长因子(TCGF)，1979年国际会议上统一命名为白细胞介素-2(IL-2)。IL-2是自分泌和旁分泌的因子，不进入血液，不是内分泌生长因子。IL-2的产生与细胞增殖周期有关，是促使T细胞从G1期转至S期的关键因子。IL-2的主要生物活性有：(1)IL-2是T细胞的自分泌和旁分泌生长因子，它能维持T细胞在体外生长，IL-2作用的靶细胞是TH、CTL和TS细胞，因此是维持细胞免疫功能的重要细胞因子。(2)激活NK细胞增殖，增强其溶细胞活性。(3)诱导CTL、LAK等杀伤细胞的分化

3、和效应功能，诱导这些细胞产生IFN-、TNF-等细胞因子。(4)在较高剂量(103104kU/L)IL-2作用下使巨噬细胞活化，吞噬杀伤功能也因此增强。(5)直接活化B细胞，促进其生长和刺激抗体产生。2.IL-2R：静止T细胞表面的白细胞介素-2受体(IL-2R)，由2个多肽链组成IL-2R和IL-2R。IL-2R是一种70-75kD的多肽(CD122)与64kD的多肽IL-2R(CD132)一起形成IL-2R复合体。IL-2R是一种55kD的多肽，仅在T细胞活化之后才能表达。最早被称为T细胞活化抗原(Tac)，而现在被命名为CD25。T细胞活化之后，链(CD25)迅速表达并与链和链一起形成I

4、L-2R复合体，后者以高亲合力与IL-2结合并刺激T细胞增殖。IL-2可以进一步通过自分泌因子的作用促进IL-2R的合成。IL-2单与IL-2R结合并不引起可检出的生物学反应。CD25并不转导信号，但是它与IL-2和、链的快速联系有关，后者依次启动抗原活化T淋巴细胞进入有丝分裂期，并进行克隆扩增。二、抗体在预防移植物排斥反应中的应用1.多克隆抗体：直接针对免疫适格细胞的多克隆抗体制剂已被成功地用于预防和逆转移植物急性排斥反应。多克隆抗体制剂包括兔抗人淋巴细胞抗体(ALG)和马抗人胸腺细胞抗体(ATG)。在将多克隆抗体试剂作为免疫抑制剂使用时应考虑许多因素：(1)过度免疫抑制增加移植受者罹患感染

5、和淋巴细胞增殖性疾病的危险性。(2)制剂的批间变异性。(3)与淋巴细胞无关抗原的广泛反应性。(4)受者发生血清病。(5)与无关细胞(包括红细胞和血小板)表面抗原发生反应。此外，ALG可与单核细胞、NK细胞和B细胞结合，马抗人胸腺细胞抗体(ATG)可能含有直接针对功能性白细胞抗原的抗体，如CD2、CD8、CD4、HLA-DR和LFA-1(淋巴细胞功能相关抗原-1)等。2.单克隆抗体：与多克隆抗体比较，单克隆抗体制剂具有高度特异性，仅识别靶抗原上的一种单一的表位。这样，单克隆抗体的免疫干预就被限制在一个特异的细胞亚群和一种单一的生物学功能方面。结果表明，单克隆抗体具有增强抗体介导的免疫抑制效果的潜

6、在能力。(1)T细胞特异性单克隆抗体：目前，器官移植临床上广泛应用的唯一的单克隆抗体是muromonab-CD3(OrthocloneOKT3)，一种直接针对CD3链的小鼠单克隆抗体。链是CD3/TCR复合体的一部分，存在于末梢血所有的静止的和活化的T细胞表面。OKT3最初被用于逆转耐激素性急性排斥反应，也被用于预防急性排斥反应的诱导疗法。(2)抗IL-2R的单克隆抗体：IL-2R是预防急性排斥反应的单克隆抗体中最具有前途的针对目标之一。正如人们所知，抗体与IL-2R的结合有效的抑制了IL-2与其结合，进而防止了T细胞增殖。许多针对IL-2R的单克隆抗体已经或正在进行器官移植的临床评价。Sim

7、ulect就是其中的一种。(3)嵌合体型和人同源化单克隆抗体：杂交瘤和基因工程技术的联合应用已经产生了即含有人源性也含有鼠源性成分的独特的单克隆抗体。嵌合体型和人同源化抗体由小鼠免疫球蛋白的可变区(抗原结合片段，Fab段)和人免疫球蛋白(IgG)恒定区(Fc段)所组成。Simulect是一种人/小鼠嵌合体型单克隆抗体，由小鼠抗CD25单克隆抗体(RFT5)的可变区和人IgG1重链以及-轻链恒定区经遗传学构建而成。Simulect将小鼠单克隆抗体的特异性与人IgG1的功能性结合为一体。Simulect与未经变化的小鼠单克隆抗体和其它遗传构建产物相比具有许多优越性：Simulect(一种嵌合体型单

8、克隆抗体)保留未经变动的小鼠分子的本来的特异性而不丢失其亲和性；由于以人的恒定区代替了小鼠的恒定区(Fc段)，十分显著地减低了人抗小鼠抗体(HAMA)反应；应用Simulect的患者体内极少产生对抗Simulect的人抗独特型抗体。三、Simulect的、期临床研究1.Simulect不同剂量的/期临床实验研究已圆满完成，实验对象为95例首次肾移植受者，实验设计的目的是对Simulect的药代动力学、药效动力学、安全性和耐受性进行评价。同时评价急性排斥反应的发生率和Simulect抗独特型抗体的发生情况。术前静脉给予Simulect，剂量范围为2.5mg60mg,以确定达到治疗有效血浓度所需要

9、的剂量。95例中，42例接受三联免疫抑制方案(环孢素、硫唑嘌呤和皮质激素)；余者接受二联方案(环孢素和皮质激素)。(1)Simulect的安全性和耐受性：在这些实验研究中，Simulect的耐受性很好，临床上未见显著的或严重的副反应。进一步讲，没有细胞因子释放综合征的临床表现。最常报告的副反应实质上是一些代谢、营养和血管方面的问题，与Simulect的应用无明显关系。(2)Simulect的免疫抑制作用：Simulect对IL-2R表达的持续抑制作用，与其浓度保持在阈值水平200g/L以上的时间有密切关联。总量40mgSimulect足以达到移植后3040天的免疫抑制效果。(3)移植物排斥反应

10、：与传统的方法对照比较，Simulect与三联和二联的联合应用均可降低急性排斥反应的发生率。(4)Simulect用药的简便性：2次20mg剂量的Simulect(手术当日和手术后4日)是提拱3045天免疫抑制功效的最佳剂量和给药时间。2.Simulect的期临床实验(1)目的：两个多中心、随机、双盲、安慰剂对照的期临床研究已在欧洲/加拿大和美国完成。这些实验的首要目的是评价Simulect的预防性应用临床效果。患者接受二联免疫抑制剂(新山地明和皮质激素)，观察移植术后6个月和12个月之内急性排斥反应的发生率，受者死亡率和移植物失功率。第二个目的是观察12个月时第一次经活检证实的排斥反应、第一

11、次需要抗体治疗的排斥反应和用药的安全性指标。在欧洲/加拿大的(B201)研究中，治疗人群为380例首次尸体肾移植受者；193例随机应用Simulect；187例应用安慰剂。美国的(B352)研究中，治疗人群为346例接受尸体和活体供肾的肾移植受者；173例接受Simulect，另173例接受安慰剂。实验排除HLA无错配、再次移植、多器官移植和高敏患者。(2)免疫抑制剂的用法和用量：Simulect总量40mg分2次静脉给药；首次20mg于移植前2小时内静脉输入，第二个剂量20mg于手术后第4天给予。根据/期临床实验资料，该剂量可达到3045天的免疫抑制效果。静脉用皮质激素于手术当天开始；口服皮

12、质激素根据各研究中心的方案开始于手术后第一天(欧洲/加拿大组)或第三天(美国组)，剂量逐渐递减，至3个月时达维持量。所有病例于手术当日开始口服新山地明，根据各种方案的治疗窗水平给予维持量。(3)免疫抑制效果：6个月时急性排斥反应的发生率在两个期临床实验研究的结果相似。与对照组相比，接受Simulect的患者移植后6个月之内急性排斥反应的发生率显著降低。在(B201)研究中，Simulect组与安慰剂对照组比较，经活检证实的急性排斥反应的发生率降低32%，在(B352)研究中，Simulect组经活检证实的急性排斥反应的发生率降低28%。12个月时急性排斥反应的发生率在两个研究中，2组之间的结果

13、也相似。资料显示在附加应用Simulect免疫抑制剂的3045天之后排斥反应发生率没有增加。(4)安全性和耐受性：Simulect的急性耐受性十分良好；没有发生任何细胞因子释放综合征的征象(如发热、寒战、高血压、肺水种和头痛等)。多数病例所发生的副反应均由移植后免疫抑制剂的应用所引起。最常发生的副反应(20%)有便秘、尿路感染、疼痛、恶心、四肢浮肿、高血压、贫血、头痛和高钾血症等。在Simulect和对照组之间，副反应的类型、像和严重程度均无任何差别。两组间感染的发病率相似(81%)，严重感染的发生率也基本相同(分别为27.5%和27.3%)，值得注意的是，Simulect并没有增加巨细胞病毒(CMV)感染的危险性；Simulect组CMV疾病的发病率为14%，而对照组为18%。没有证据表明肾移植术后应用Simulect增加移植后淋巴细胞增殖性疾病(PTLD)的危险性。只有3例(0.8%)患者发生PTLD；1例应用Simulect，2例接受安慰剂。两组间非淋巴瘤性恶性肿瘤的发病率相似：Simulect组4例；对照组7例。移植后5个月，采用酶联免疫