7500荧光定量PCR仪使用说明

1、7500荧光定量PCR仪使用说明注意事项：实验过程必须戴干净的一次性乳胶手套 进行操作。PCR反应所用的96孔板、8联管或单管必须为ABI7500专用，凸盖PCR管禁止使用。 使用8联管两侧需用空管支撑，使用单管四角需用空管支撑，以防止板槽受力不均。实验数据用光盘刻录，禁止U盘拷取，数据可暂存于本机电脑硬盘中，各实验室D盘中有指定 文件夹，中心外部人员数据存于FUWU文件夹下的子文件夹中。操作步骤?开机依次打开电脑显示屏、主机，输入开机密码“ 7500”待电脑启动稳定后，按压7500仪器电源按扭，等待仪 器启动（约30 s）。当仪器只显示Power状态指 示灯时，方可按压托盘以打 开它。放入反

2、应板按压此处注:关闭仪器托盘时，应按一个角度推压托盘的右侧。（以下过程按字母顺序a-q进行操作）?创建反应板文件双击电脑桌面上SDS软件图标打开SDS软件;在对话框中选择 Create New Document,或选择菜单栏 File > New; c.单击 Nextb.为反应板文件命名a.从 Assay下拉列表中选择反应板类型1.Relative Quantification （ddCt） Plate（相对定卓里）2.Absolute Quantification （Standard对定量标准曲线）Curve）（绝3.Allelic Discrimination （等位基因鉴别）4.P

3、lus/Minus （阳性/阴性实验）反应板文件类型有以下几种f. 单击Nextd.选择要添加到反应板 文件的探针（引物），单击 Add添加选中探针e.如果在列表中未列出 所需探针，请单击NewDetector创建新探针?为每个反应孔指定探针与任务?为反应孔设置样品名g. 选取探针相同的反应孔h. 点击反应孔对应的探针。i. 单击Task栏的下边指定探 针任务。j. 选择Use （使用）。k. 单击Finish （完成）。BWPIIT 加 XCUE1/PlateEspon 川I Tc 兀叭igimrHnM yslem- p jte ' jr J C:-14乩 船 闵.亠 匕-JB.JL

4、 lh F!2innru-rtA- |L1»_iq占金屉百區1 r n縞甩g := 川屮 Tools-AMljfsisWindowti-dpFswirt Tom*卩和",刊冈n JPF.J.1二 駅 |进行修改）l. 选取反应孔，直接输入相 应样品名（也可右键，调 出反 Well Inspector 对话 框，在 Sample Name 中MH Q-iarflap阳 dyiDilscoiMectedII iw 胡?设定PCR循环参数、运行程序J tiM t J'lJBtrnlZJL医E卿¥InstSvkgft-rnrt stnrtg> 750C SymteF S XftBE - PlalsL 洛lardedp 日1令 过力萨 工gk Jnstrjrnnt Anlyis Wndow HlpELiltM TLlwm. 选择 Instrument 选项卡，默认条件下显示标准PCR条件，可跟据实 验具体情况修改；n. 单击 Add DissociationStage添加溶解曲线循 环；o. 修改PCR反应体积；p. 将反应板文件保存至 指定路径。q. 点击Start运行程序?结束实验1. 实验结束后关闭软件。（确认反应板文件数据已保存）2. 打开拖盘，将反应板取出，关闭拖盘。3. 按下7500仪器电源开关