DNA的粗提取与鉴定学案

1、§ « DNA勺粗提取与鉴定导学案班级：高二()班姓名：【学习目标】1 .说出DNA勺物理和化学性质。2 .概述DNA1提取和鉴定的原理。3 .尝试对动物或植物组织的 DNAS行粗提取并对其进行鉴定。【自主学习】4 .提取DNA勺方法和原理：(1)提取生物大分子的基本思路 ：选用一定的 方法分离具有不同物理或化学性质的 生物大分子。(2)提取DNA勺方法：利用DNAW、和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA,去除其他成分。的溶解性：(1)DNA在NaCl溶液中的溶解度：DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，其中在NaCl溶液中溶解度最低。(2)在酒精溶液中的

2、溶解性：不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些 溶于酒精溶液。 对酶、高温和洗涤剂的耐受性 ：(1)对酶的而t受性：蛋白酶能水解 ，但对 没有影响。(2)对温度的耐受性：大多数蛋白质不能忍受 的高温，而DNAt 以上才会变性。(3)对洗涤剂白耐受性：洗涤剂能够瓦解 ，但对 没有影响。的鉴定：在 的条件下，DNA与 反应呈现蓝色。二、实验设计5 .实验材料的选取：选用DN蛤量 的生物组织。6 .破碎细胞，获取含DNA的滤液：(1)动物细胞的破碎。选材及方法：选用动物细胞作为实验材料时，由于其无 ,因此可直接采用吸水涨破的方法。过程：以鸡血为例。在鸡血细胞液中加入一定量的 ,同时用 搅拌，细胞会吸水涨

3、破,然后用纱布过滤，过滤后收集滤液即可。(2)植物细胞的破碎。方法：需要先用 溶解细胞膜。过程：以提取洋葱的DNA为例。在切碎的洋葱中加入一定的 ,进行充分地搅拌和,过滤后收集研磨液。7 .去除滤液中的杂质：力杀一利用DNA在不同浓度的去除杂质NaCl溶液中不同,通过控制NaCl溶液的力杀一直接在滤液中加入 够分解蛋白质，反应1015 min,嫩肉粉中的_台匕目匕力呆二将滤液放在 的恒温水浴箱中保温1015 min,注意严格控制温度范围的析出：利用DNM溶于 这一原理,可从DNA§液中析出比较纯净的 DNA,此时DNA的状态为。 的鉴定：将白色丝状物溶解于 5 mL物质的量浓度为 中

4、，再加入4 mL白 试剂,沸水浴加热5 min,冷却后观察溶液的颜色,同时设计不含 DNA勺NaCl溶液作为对照。 三、操作提示1 .以血液为实验材料时，每100 mL血液中需要加入3 g柠檬酸钠，防止。2 .加入洗涤剂后，动作要轻缓、柔和，否则容易产生 ,不利于后续步骤的操作。加入酒 精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧 ,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。3 .鉴定DN刖的二苯力钻式剂要 ，否则会影响鉴定的效果。 四、实验操作 从鸡血细胞中提取 DNA(1)破碎细胞(释放 DNA：在鸡血细胞液中加入一定量的 ,同时用玻璃棒沿一个方向搅 拌(2)过滤：单层纱布过滤，滤液中含有 和其他核物质

5、，如 、RN感。取。(3)溶解核内 DNA向上述滤液中加入物质的量浓度为 mol/L的NaCl溶液，并用玻棒沿 一个方向搅拌(4)过滤：将含DNA勺2 mol/L的NaCl溶液用两层纱布过滤取 。(5)析出DNA向上述滤液中缓缓加入 ,同时用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌，出现白色 絮状物，当絮状物不再增加时，停止加水(此时NaCl溶液的物质的量浓度接近 mol/L。(6)过滤：用多层纱布过滤，含 的粘稠物留在纱布上(7) DNA再溶解：将上述粘稠物再次用 mol/L的NaCl溶液溶解(8)提取含杂质较少的 DNA向上述滤液中加入等体积的、冷却的、体积分数为95%勺酒精溶液，静置2-3 min,出现

6、,用玻璃棒将丝状物卷起。【合作探究】主题1 DNA1提取与鉴定的方法溶解性原理：结合DNA NaCl溶液中的溶解度曲线，分析DNA不同浓度NaCl溶液中的溶解度有何特点。低于mol/L时：DNA的溶解度随NaCl溶液物质的量浓度增加而逐渐 。(2)高于mol/L时：DNA的溶解度随NaCl溶液物质的量浓度增加而逐渐 。 粗提取的操作思路：DNA与蛋白质在NaCl溶液中的溶解情况如下表。2 mol/L 的 NaCl 溶液mol/L的NaCl溶液DNA析出蛋白质不溶，部分发生盐析沉淀探讨通过控制 NaCl溶液的浓度使 DNAS盐溶液中溶解或析出的思路是： 用 的NaCl溶液溶解DNA然后过滤获得

7、,能够去除该条件下 (不能、能)溶解的杂质；调节 NaCl溶 液的物质的量浓度为 mol/L ,使DNA析出，然后过滤获得 ,能够去除该条件下仍然(不能、能够)溶解的杂质。不溶于 ,而细胞中的某些 则溶于酒精溶液，此特点对于提取DNA的作用是主题2 DNA勺粗提取与鉴定的实验设计【互动探究】1 .实验材料的选取：哺乳动物的红细胞和鸡的血液提取DNA效果更衣？的是。原因是 细胞核DN*量丰富，材料易得，而 无细胞核，不含 DNA2 .实验操作分析：（1）在鸡血细胞液中加入蒸储水的目的是使鸡血细胞 涨破，释放出。（2）提取菜花的DNA寸，加入洗涤剂和食盐的目的是：加入洗涤剂的目的：洗涤剂能溶解 ,

8、有利于 的释放。加入食盐的目的：食盐的主要成分是 ,有利于 的溶解。（3）探讨在DNA分子的粗提取实验中，两次向烧杯中加入蒸储水的目的：操作项目目的第一次加蒸储水鸡血细胞.涨破,释放出O第二次加蒸储水稀释NaCl溶液, 使DN砥渐析出使其浓度接近_ mol/L ,（2）三次加NaCl溶液:次数实验步骤目的第一次第（3）步溶解,析出蛋白质等杂质第二次第步使DNA再,为了获得含杂质较少的 DNA第三次DNA定溶解DNA以便DNAW反应【当堂检测】一、判断题和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，它们都是有机物但都溶于酒精。（）2 .做DNA®提取实验时，可用新鲜猪血代替鸡

9、血。（）3 .蛋白质和DNA在高温下都会变性，当温度下降后蛋白质不能复性而DNA可以复性。（）4 .在用95%勺冷酒精析出DNA应用玻璃棒沿同一个方向轻轻搅拌。（）5 .在实验中两次加入蒸储水，均是为了析出DNA （）6 .在析出DNA寸，要缓缓加入蒸储水，直到出现絮状物为止。（）7 .洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA NaCl溶液中的溶解度。（）二、单项选择题1 .（2017 连云港高二检测）下列有关“ DNA粗提取与鉴定”实验原理的叙述正确的是（）在NaCl溶液中的溶解度，随NaCl溶液浓度的降低而减小B.利用DNA溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA是大分子有机物，

10、不溶于水而溶于某些有机溶剂D.在沸水中，DNA遇二苯胺会出现紫色反应2 .在DNA®提取与鉴定实验中，将获得的含有DNA勺黏稠物（含较多物质）分别处理如下，其中杂质 所处的位置在（）操作过程黏稠物滤液放入2 mol/L的氯化钠溶液中，搅拌后过滤放入mol/L的氯化钠溶液中，搅拌后过滤放入冷却的95%勺酒精溶液中，搅拌后过滤A.B.C.D.3 .（2017 常州高二检测）下图为“ DNA粗提取与鉴定”实验的相关操作。这些操作目的正确的是（）A.是洗涤红细胞，去除血细胞表面的杂质B.是溶解DNA去除不溶于酒精的杂质C.溶解DNA去除不溶于2 mol/LNaCl溶液的杂质D.稀释NaCl溶

11、液，去除不溶于低浓度 NaCl溶液的杂质4 .在DNA的粗提取实验过程中，对DNA提取量影响较小的是（）A.使鸡血细胞在蒸储水中充分破裂，释放出DNA等核物质B.搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动C.在析出DNA占稠物时，要缓缓加入蒸储水，直到黏稠物不再增多D.要用冷酒精沉淀DNA,甚至再将混合液放入冰箱中冷却6 .（2017 赤峰高二检测）下列关于“ DNA的粗提取与鉴定”实验操作的说法中，正确的是 （）A.该实验中有两次加入蒸储水，均是为了析出DNAB.该实验中多次要求用玻璃棒单向搅拌，目的是搅拌均匀C.该实验中有3次过滤，过滤时使用尼龙布层数与DNA的存在状态有关D.实验3次加入NaCl溶液，第二次的目的是析出DNA7 .回答下列有关“ DN