葡萄糖注射液的无菌检查_第1页
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文档简介

1、葡萄糖注射液的无菌检查一、实验说明中国兽药典葡萄糖注射液项下规定对其进行无菌检查时，采用薄膜过滤法，以金黄色葡萄球菌为阳性对照菌，依法检查，应符合规定。通过本实验的训练，初步掌握无菌检查的操作技能。二、仪器与试剂（1）恒温培养箱及生化培养箱，恒温烘箱、高压蒸汽灭菌器，开放式或封闭式薄膜过滤器（滤膜孔径应不大于0.45 m，直径约为50 mm；根据供试品及其溶剂的特性选择滤膜材质；滤器及滤膜使用前应采用适宜的方法灭菌；使用时，应保证滤膜在过滤前后的完整性）。（2）无菌室 应准备好盛有消毒用5%甲酚或其他适宜消毒溶液的玻璃缸、乙醇灯、火柴、镊子、75%乙醇棉、碘伏棉等。（3）玻璃器皿 试管，量筒，

2、三角瓶，移液管，刻度吸管（1、5、10 mL），注射器（2、5、10 mL），双碟等。（4）无菌衣、裤、帽、口罩等 洗净晾干，配套，用牛皮纸包严，灭菌待用或用一次性的无菌物品代替。（5）试剂 葡萄糖注射液，0.9无菌氯化钠溶液，pH 7.0 NaCl-蛋白胨缓冲液，硫乙醇酸盐流体培养基，改良马丁培养基，金黄色葡萄球菌对照菌悬液。三、检查方法按检验数量的有关规定选择一定数量的样品，取供试品（装量10 mL）最少检验数量10支，另增加5支作为阳性对照用。将供试品外表面经过适宜的方法消毒处理后，直接通过装有孔径为 0.45 µm的一般薄膜过滤器过滤， 或加入0.9%无菌氯化钠溶液或其他适宜

3、的无菌溶液（至少100 mL）中，混合后，立即通过装有孔径不大于 0.45 µm的薄膜过滤器，然后用pH 7.0 NaCl-蛋白胨缓冲液冲洗滤膜至阳性对照菌正常生长。每次冲洗量一般为100 mL，冲洗次数一般不少于3次。冲洗后，如用封闭式薄膜过滤器，分别将100 mL硫乙醇酸盐流体培养基、改良马丁培养基加入相应滤筒内；如采用一般过滤器，则取出滤膜分成3等份，分别加入含50 mL上述两种培养基中，按规定温度和时间培养。阳性对照管应根据供试品的特性加入已制备的金黄色葡萄球菌对照菌液1 mL，阳性对照管培养4872 h，应生长良好。另取0.9无菌氯化钠溶液，pH 7.0 NaCl-蛋白胨缓冲液同法操作，作为阴性对照。阴性对照不得有菌生长。4、 数据记录与报告样品名称： 规格： 批号： 培养基培养天数/d需气菌、厌气菌(硫乙醇酸盐流体培养

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