蛋白质翻译ppt课件

1、 Protein Biosynthesis (Translation)蛋白质的生物合成蛋白质的生物合成(翻译翻译)第十二章第十二章 蛋白质的生物合成过程就是将mRNA分子中由碱基序列组成的遗传信息，经过遗传密码破译的方式转变成为蛋白质中的氨基酸陈列顺序，因此称为翻译translation)。 第一节蛋白质合成体系Protein Biosynthesis System l 20种氨基酸作为原料种氨基酸作为原料l 酶及蛋白因子，如酶及蛋白因子，如IF、eIF等等l ATP、GTP、无机离子、无机离子参与蛋白质生物合成的物质包括：参与蛋白质生物合成的物质包括：l 三种三种RNAl mRNAl rRN

2、Al tRNA mRNA mRNA是遗传信息的携带者是遗传信息的携带者 遗传学将编码一个多肽的遗传单位称为顺反子遗传学将编码一个多肽的遗传单位称为顺反子cistroncistron。 原核细胞中数个构造基因常串联为一个转录单原核细胞中数个构造基因常串联为一个转录单位，转录生成的位，转录生成的mRNAmRNA可编码几种功能相关的可编码几种功能相关的蛋白质，为多顺反子蛋白质，为多顺反子polycistronpolycistron。 真核生物一个真核生物一个mRNAmRNA只编码一种蛋白质，为单只编码一种蛋白质，为单顺反子顺反子single cistronsingle cistron。 mRNA构造

3、简图构造简图l mRNA上存在遗传密码上存在遗传密码mRNA分子上从分子上从5至至3方向，由方向，由AUG开场，每开场，每3个核苷酸为一组，决议肽链个核苷酸为一组，决议肽链上某一个氨基酸或蛋白质合成的起始、终上某一个氨基酸或蛋白质合成的起始、终止 信 号 ， 称 为 三 联 体 密 码 止 信 号 ， 称 为 三 联 体 密 码 t r i p l e t codon。53m7GpppAAAAn3非翻译区5非翻译区编码区AUGUAAORF从从mRNA 5端起始密码子端起始密码子AUG到到3端终止密码子之间的核苷酸序列，各个三联端终止密码子之间的核苷酸序列，各个三联体密码延续陈列编码一条多肽链，

4、称为开放体密码延续陈列编码一条多肽链，称为开放阅读框架阅读框架(open reading frame, ORF)。 遗遗传传密密码码表表密密码码子子的的第第一一个个字字母母密码子的第二个字母密码子的第二个字母1. 延续性延续性commalessl遗传密码的特点遗传密码的特点编码蛋白质氨基酸序列的各个三编码蛋白质氨基酸序列的各个三联体密码延续阅读，密码间既无间隔联体密码延续阅读，密码间既无间隔也无重叠。也无重叠。 重叠密码重叠密码非重叠延续的密码非重叠延续的密码不延续的密码不延续的密码基因损伤引起基因损伤引起mRNA阅读框架内的碱阅读框架内的碱基发生插入或缺失，能够导致框移突变基发生插入或缺失，

5、能够导致框移突变(frameshift mutation)。 由于对由于对mRNA外显子的加工，呵斥外显子的加工，呵斥mRNA与其与其DNA模板序列之间不匹配，模板序列之间不匹配，使同一使同一mRNA前体翻译出序列、功能不同前体翻译出序列、功能不同的蛋白质。这种基因表达的调理方式称为的蛋白质。这种基因表达的调理方式称为mRNA编辑编辑mRNA editing)。 mRNA编辑编辑2. 简并性简并性degeneracy遗传密码中，除色氨酸和甲硫氨酸遗传密码中，除色氨酸和甲硫氨酸仅有一个密码子外，其他氨基酸有仅有一个密码子外，其他氨基酸有24个或多至个或多至6个密码子为之编码。个密码子为之编码。遗

6、传密码的简并性遗传密码的简并性密码子简并性的生物学意义：减少有密码子简并性的生物学意义：减少有害突变。害突变。 遗传密码的特异性主要取决于前两位遗传密码的特异性主要取决于前两位碱基。碱基。GCU ACUGCC ACCGCA ACAGCG ACG AlaThr3. 通用性通用性universal 蛋白质生物合成的整套密码，从原核生蛋白质生物合成的整套密码，从原核生物到人类都通用。物到人类都通用。 有少数例外，如动物细胞的线粒体、植有少数例外，如动物细胞的线粒体、植物细胞的叶绿体。物细胞的叶绿体。 密码的通用性进一步证明各种生物进化密码的通用性进一步证明各种生物进化自同一祖先。自同一祖先。 4.

7、摆动性摆动性wobbletRNA上反密码子的第上反密码子的第1位碱基与位碱基与mRNA密码子的第密码子的第3位碱基配对时，可以位碱基配对时，可以在一定范围内变动，即并不严厉遵照碱基在一定范围内变动，即并不严厉遵照碱基配对规律，这一景象称为摆动性。配对规律，这一景象称为摆动性。摆动配对摆动配对U 二、核蛋白体是多肽链合成的安装二、核蛋白体是多肽链合成的安装 核蛋白体的组成核蛋白体的组成核蛋核蛋白体白体原核生物原核生物真核生物真核生物蛋白质蛋白质 S S值值 rRNArRNA 蛋白质蛋白质S S值值rRNArRNA小亚基小亚基2121种种30S30S16S16S3333种种40S40S18S18S

8、大亚基大亚基3434种种50S50S23S23S5S5S4949种种60S60S28S28S5.8S5.8S5S5S核蛋白核蛋白体体70S70S80S80S原核生物核蛋白体构造方式原核生物核蛋白体构造方式 30S小亚基：有小亚基：有mRNA结合位点结合位点50S大亚基：大亚基： E位：排出位位：排出位Exit site转肽酶活性转肽酶活性大小亚基共同组成：大小亚基共同组成：A位：氨基酰位位：氨基酰位(aminoacyl site)P位：肽酰位位：肽酰位(peptidyl site)三、三、tRNA与氨基酸的活化与氨基酸的活化反密码环反密码环氨基酸臂氨基酸臂tRNAtRNA在翻译过程在翻译过程中

9、起接合体中起接合体adaptoradaptor作用，又是氨基酸的运作用，又是氨基酸的运载体。载体。氨基酸氨基酸 + tRNA氨基酰氨基酰- tRNAATP AMPPPi氨基酰氨基酰-tRNA合成酶合成酶一氨基酰一氨基酰-tRNA合成酶合成酶(aminoacyl-tRNA synthetase)l 氨基酸的活化氨基酸的活化第一步反响第一步反响氨基酸氨基酸ATPATPE E 氨基酰氨基酰-AMP-E-AMP-EAMP AMP PPi PPi 第二步反响第二步反响氨基酰氨基酰-AMP-E -AMP-E tRNA tRNA 氨基酰氨基酰-tRNA -tRNA AMPAMP E E 氨基酰氨基酰-tRN

10、A合成酶对氨基酸和合成酶对氨基酸和tRNA都有高度都有高度特异性。特异性。 氨基酰氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性合成酶具有校正活性(proof-reading activity) 。 氨基酰氨基酰-tRNA的表示方法：的表示方法： Ala-tRNAAla Ser-tRNASer Met-tRNAMet 氨基酸的活化方式：氨基酰tRNA氨基酸的活化部位：羧基氨基酸与tRNA衔接方式：酯键氨基酸活化耗能：2个P真核生物：真核生物： Met-tRNAiMet原核生物：原核生物： fMet-tRNAifMet二起始肽链合成的氨基酰二起始肽链合成的氨基酰-tRNA fMet-tRNAifMet的生成

11、：Met-tRNAifMetfMet-tRNAifMet转甲酰基酶N10-CHO FH4 第二节蛋白质生物合成过程The Process of Protein Biosynthesis蛋白质合成中蛋白质合成中mRNA模板的方向：模板的方向：5 3；蛋白质的合成方向：蛋白质的合成方向：N端端 C端。端。蛋白质合成过程：蛋白质合成过程：起始起始延伸延伸终止终止一、肽链合成起始一、肽链合成起始指指mRNA和起始氨基酰和起始氨基酰-tRNA分别分别与核蛋白体结合而构成翻译起始复合物与核蛋白体结合而构成翻译起始复合物 (translational initiation complex)。参与起始过程的蛋

12、白质因子称起始参与起始过程的蛋白质因子称起始因子因子initiation factor，IF。参与起始过程的蛋白质因子称起始因参与起始过程的蛋白质因子称起始因子子initiation factor，IF。原核生物起。原核生物起始因子有三种：始因子有三种：IF-1：占据：占据A位防止结合其他位防止结合其他tRNA。IF-2：促进起始：促进起始tRNA与小亚基结合。与小亚基结合。IF-3：促进大小亚基分别，提高：促进大小亚基分别，提高P位对位对结合起始结合起始tRNA敏感性。敏感性。一原核生物翻译起始复合物构成一原核生物翻译起始复合物构成核蛋白体大小亚基分别；核蛋白体大小亚基分别；mRNA在小亚基

13、定位结合；在小亚基定位结合；起始氨基酰起始氨基酰-tRNA的结合；的结合； 核蛋白体大亚基结合。核蛋白体大亚基结合。IF-3IF-11. 核蛋白体大小亚基分别核蛋白体大小亚基分别A U G53IF-3IF-12. mRNA在小亚基定位结合在小亚基定位结合S-D序列：序列：在原核生物在原核生物mRNA起始密码起始密码AUG上上游，存在游，存在49个富含嘌呤碱的一致性序列，个富含嘌呤碱的一致性序列，如如-AGGAGG-，称为，称为S-D序列。又称为核序列。又称为核蛋白体结合位点蛋白体结合位点ribosomal binding site，RBS) S-D序列序列 IF-3IF-1IF-2GTPA U

14、 G533. 起始氨基酰起始氨基酰tRNA与小亚基结合与小亚基结合IF-3IF-1IF-2GTPGDPPiA U G534. 核蛋白体大亚基结合核蛋白体大亚基结合IF-3IF-1A U G53IF-2GTPIF-2-GTPGDPPi起始过程耗费起始过程耗费1个个GTP。二、肽链的延伸二、肽链的延伸指按照指按照mRNA密码序列的指点，依密码序列的指点，依次添加氨基酸从次添加氨基酸从N端向端向C端延伸肽链，直端延伸肽链，直到合成终止的过程。到合成终止的过程。 肽链的延伸是在核蛋白体上延续性循环式肽链的延伸是在核蛋白体上延续性循环式进展，又称为核蛋白体循环进展，又称为核蛋白体循环ribosomal

15、cycle)，每次循环添加一个氨基酸，分为，每次循环添加一个氨基酸，分为以下三步：以下三步： 进位进位entrance 成肽成肽peptide bond formation 转位转位translocation原核延原核延长因子长因子生物功能生物功能对应真核对应真核延长因子延长因子EF-Tu促进氨基酰促进氨基酰-tRNA进入进入A位，位，结合分解结合分解GTPEF-1-EF-Ts调节亚基调节亚基EF-1-EFG有转位酶活性，促进有转位酶活性，促进mRNA-肽酰肽酰-tRNA由由A位前移到位前移到P位，位，促进卸载促进卸载tRNA释放释放EF-2肽链合成的延伸因子肽链合成的延伸因子 一进位一进位指

16、根据指根据mRNA下一组遗传密码指下一组遗传密码指点，使相应氨基酰点，使相应氨基酰-tRNA进入核蛋白进入核蛋白体体A位。位。 延伸因子延伸因子EF-T催化催化进位原核生物进位原核生物 Tu TsGTPGDPA U G53TuTsGTP二成肽二成肽是由转肽酶是由转肽酶transpeptidase催化的肽催化的肽键构成过程。键构成过程。三转位三转位延伸因子延伸因子EF-G有转位酶有转位酶translocase 活性，可结合并水解活性，可结合并水解1分分子子GTP，促进核蛋白体向，促进核蛋白体向mRNA的的3侧挪动。侧挪动。fMetA U G53fMetTuGTP进进位位转转位位成肽成肽 三、肽链合成的终止三、肽链合成的终止当当mRNA上终止密码出现后，多肽链上终止密码出现后，多肽链合成停顿，肽链从肽酰合成停顿，肽链从肽酰-tRNA中释出，中释出，mRNA、核蛋白体等分别，这些过程称、核蛋白体等分别，这些过程称为肽链合成终止。为肽链合成终止。 终止相关的蛋白因子称为释放因子终止相关的蛋白因子称为释放因子 (release factor, RF) 识别终止密码，如识别终止密码，如RF-1特异识别特异识别UAA、UAG；而而RF-2可识别可识别UAA、UGA。 诱导转肽酶改动为酯酶活性，使肽链