紫外-可见光分光光度法2ppt课件

1、2.3 吸光光度法的灵敏度与准确度吸光光度法的灵敏度与准确度2.3.1 灵敏度的表示方法灵敏度的表示方法 摩尔吸光系数摩尔吸光系数 () A= b c =A/bc (Lmol-1cm-1) 越大越大, 灵敏度越高灵敏度越高: 105为高灵敏度为高灵敏度. 2. Sandell(桑德尔桑德尔)灵敏度灵敏度 (S)定义：截面积为定义：截面积为1cm2的液层在一定波长或波段的液层在一定波长或波段处，测得吸光度为处，测得吸光度为0.001时所含物质的量。时所含物质的量。用用S表示，单位：表示，单位：gcm-2A= bc=0.001 bc 0.001/ S小灵敏度高小灵敏度高; 相同的物质相同的物质,

2、M小则灵敏度高小则灵敏度高.3210=( g/cm ) 1 0.00MMS 变换单位变换单位: bcmcmol/L=bcM106 g/1000cm2例例1 邻二氮菲光度法测铁邻二氮菲光度法测铁(Fe)=1.0mg/L, b=2cm , A=0.38 计算计算 、S 和和解：解： c(Fe)=1.0 mg/L=1.010-3/55.85 =1.810-5(molL-1)4-1-1-50.38=1.1 10L molcm2 1.8 10 （）S=M/ =55.85/1.1104=0.0051 (g/cm2)321 g/cm2cm 0.001=0.0051 g/cm0.38S 或或 c =1.0mg

3、/L=1.010-3 g /1000mL = 1.010-4 g/100mL1%1cm=AEb c -111%cm-431= 0.38/2.0 10=1.9 10100mL gcmE （）1%1cm53=10=1.1 10 /55.85 /M=9 10 1.E 或或例例2 比较用以下两种方法测比较用以下两种方法测Fe的灵敏的灵敏度度.B. 用用4,7-二苯基邻二氮菲光度法测定铁二苯基邻二氮菲光度法测定铁5332.2104 Lmol-1cm-1S = 55.85/(2.2104)0.0025 (gcm-2)B方法比方法比A方法的灵敏度高方法的灵敏度高.A. 用邻二氮菲光度法测定铁时，用邻二氮菲光

4、度法测定铁时，5081.1104 Lmol-1cm-1S = 55.85/(1.1104)0.0051 (gcm-2)2.3.2 准确度准确度仪器测量误差仪器测量误差100806040200T/% c1 c2 c3 T T T-透光率读数误差透光率读数误差 c c1c1 c2c2 c3c310 4;选择性好选择性好;显色剂在测定波长处无明显吸收显色剂在测定波长处无明显吸收, 对照性好对照性好, max 60 nm;反应生成的有色化合物组成恒定，稳定反应生成的有色化合物组成恒定，稳定;显色条件易于控制，重现性好显色条件易于控制，重现性好.2.4.2 显色条件的确定显色条件的确定c(R)c(R)c

5、(R)1. 显色剂用量显色剂用量c(M)、pH一定）一定）Mo(SCN)32+ 浅红浅红Mo(SCN)5 橙红橙红Mo(SCN)6- 浅红浅红Fe(SCN)n3-n2. 显色反应酸度显色反应酸度c(M)、 c(R)一定）一定）pH1pH * *n * * n *跃迁跃迁 max(nm) *150(200)n *200100300n *20080010100 *200104190CH2CH2 CH2 （CC）CH3CH2CH3 （CC）CH3CH3125 （CH）CH4maxnm）饱和烃类饱和烃类 *跃迁跃迁(饱和烃类饱和烃类)（作溶剂）（作溶剂） max(nm) max(nm) H2O1671

6、480CH3OCH31842520CH3OH183150CH3NH2215600CH3Cl173200(CH3)2NH220100CH3Br204200(CH3)3N227900CH3I258365 n * 跃迁含具n电子的杂原子）n* 跃迁带孤对电子的杂原子与其他跃迁带孤对电子的杂原子与其他键共轭）键共轭）280300饱和醛酮饱和醛酮1000( n*)16( n*)186280CH3COCH3异辛烷异辛烷22280CH3NO2EtOH5339CH3NNCH3H2O60214CH3CONH2EtOH41204CH3COOH max(nm）介质介质* 跃迁不饱和烃类跃迁不饱和烃类)6000173

7、CH三三CH14000175CH2CH2 max(nm）* 跃迁的跃迁的max短，短， 大大, n* 跃迁的跃迁的max长，长， 小小.电荷迁移跃迁荷移光谱）电荷迁移跃迁荷移光谱）特点：谱带宽特点：谱带宽, ,吸收强度大吸收强度大,max,max处的处的可大于可大于104 104 。Fe3SCN- Fe2SCN （分子内氧化还原）（分子内氧化还原）hRN1R2RhDADA-e e给予体给予体 e e接受体接受体e e给予体给予体e e接受体接受体N1R2-+hCROCRO-+h2.6.2 有机分子中的生色团与助色团有机分子中的生色团与助色团严格地说，只有含有不饱和基团或孤对电子的基团，严格地说

8、，只有含有不饱和基团或孤对电子的基团，才是生色团（才是生色团（ nn* *， * *）CC，CH ， * 150nmn*， *:CO CCO:n*， *CO，CSn* ,* 200nm:CN，CCl：:CC ,C C * ,* 200nm （孤立双键（孤立双键 200nm）生色团生色团类类 型型生色团举例生色团举例-1-1221000275190(CH3)2C=O12.51000289182蒸气蒸气H3CCHO CO4500172蒸气蒸气C2H2 C三三C15530171气态气态C2H4 CC125CH4CHC2H6CCmax溶剂溶剂例例生色团生色团生色团举例生色团举例-2-2 max溶剂溶剂

9、例例生色团生色团15.84400279202己烷己烷CH3NO2NO2160295MeOH乙酰胺乙酰胺CONH260204204水水乙酸乙酯乙酸乙酯COOR34240庚烷庚烷CH3COClCOCl41200EtOHCH3COOHCOOH200COH， CSHCN，CCl生色团举例生色团举例-3-3 max溶剂溶剂例例生色团生色团2257000261206.5水水甲苯甲苯2057400254203.5水水苯苯200238异辛烷异辛烷C2H5CHNC5H6 CN25343水水反式偶氮甲烷反式偶氮甲烷NN7417乙醚乙醚重氮甲烷重氮甲烷NNCH3不饱和基团助色效应大不饱和基团助色效应大256 261

10、 264 282 320 276(K带带) 苯环苯环B带带max(nm)CH3ClCH=CH2C CH3O常见助色团及其助色效应常见助色团及其助色效应(红移红移max增大增大):FCH3ClBrOHOCH3NH2NHCH3 N(CH3)2 NHC6H5O例：例： CH3Cl CH3Br CH3Imax(nm) 172 204 258反助色团反助色团大多是吸电子基团蓝移）大多是吸电子基团蓝移）NH3SO2NH2COOCNCOOHCOOCH3 COCH3 max蓝移蓝移水水乙醇乙醇己烷己烷A 溶剂极性增大，溶剂极性增大， * 吸收红移吸收红移O3 2-C-CH=C(CH )CH3溶剂效应溶剂效应无

11、溶剂效应无溶剂效应 E1 E2 E2 E1 max红移红移 异亚丙基丙酮异亚丙基丙酮例：例： 异亚异亚丙基丙基丙酮丙酮305309315329n *243237238230 *水水甲醇甲醇氯仿氯仿正己烷正己烷溶剂溶剂极性增大极性增大 max蓝移蓝移 max红移红移溶剂极性影响的结论溶剂极性影响的结论:1. 非极性溶剂可见精细结构非极性溶剂可见精细结构;2. pH影响分子构型影响分子构型, 因此影响物质对光的吸收因此影响物质对光的吸收.3. 利用溶剂效应可区别利用溶剂效应可区别 *(红移红移) 还是还是 n *(蓝移蓝移);4. 比较光谱时比较光谱时, 溶剂要相同溶剂要相同.常用溶剂的光学透明区常用溶剂的光学透明区CHCl3245乙醚乙醚210苯苯280环己烷环己烷210己烷己烷210CCl4265正丁醇正丁醇210庚烷庚烷210DMF270二氯甲烷