邻苯二甲酸酯污染

1、文章编号:1001-5914(200803-0202-04养殖鱼体邻苯二甲酸酯含量与分布特征李潇1,聂湘平1,潘德博2,李桂英3摘要:目的调查珠江三角洲及香港地区的养殖池塘3种淡水养殖鱼类(草鱼、鲫鱼和罗非鱼体内6种邻苯二甲酸酯(PAEs 的含量与分布特征。方法于2005年11月在珠江三角洲和香港地区采集草鱼、鲫鱼、罗非鱼,鱼肉样品经冻干处理,索氏抽提,氧化铝-硅胶柱净化,气相色谱-氢火焰离子化检测器(GC-FID 检测。结果珠江三角洲地区鲫鱼、草鱼、罗非鱼体内邻苯二甲酸二异辛酯(DEHP 含量分别高达16.10、19.81和11.03mg/kg (体重,干重;邻苯二甲酸二正丁酯(DBP 和邻

2、苯二甲酸丁辛酯(BOP 在3种鱼类体内的含量在310mg/kg 之间。邻苯二甲酸二甲酯(DM P 的含量最低(0.54mg/kg 。香港地区鲫鱼、草鱼、罗非鱼体内DEHP 含量高达35.97、37.98、26.12mg/kg ,而DM P 和DEP 含量较低。结论养殖鱼类受PAEs 的污染情况随地域的不同有较大差异,来自香港地区的养殖鱼类样品中6种PAEs 含量高于珠江三角洲地区样品。关键词:水产养殖,鱼;邻苯二甲酸酯;水污染,化学性;珠江三角洲中图分类号:R181.3文献标识码:AAnalysis of PAEs in Muscle Tissue of Fr eshwater Fish fr

3、 om Fishponds in Pear l River Delta LI Xiao,NIE Xiang-ping,PAN De-bo,et al.Institute of the Hydrobiology,Ji nan University,Guangzhou,Guangdong 510632,China Abstract:Objective To investigate phthalate esters in the muscle tissues of fresh water fish in fishponds in Pearl River Delta and Hong Kong,Chi

4、na,Nov,2005.Methods The samples from Pearl River Delta and Hong Kong,China,were analyzed by capillary gas chromatography with FID detector through the procedure of freeze-dried,soxhlet extraction,decontaminating with alumina-silica gel columniation in Nov,2005.Results The concentration of six sorts

5、of PAEs was detected.The concentration of DEHP was 16.10mg/kg (dry weight,19.81mg/kg and 11.03mg/kg in crucian carp,grass carp and tilapia from Pearl River Delta,while being 35.97,37.98and 26.12mg/kg for the same species from HK respectively,but the DM P show ed the low est value,only about 0.54mg/k

6、g.The concentration of DBP and BOP ranged from 3to 10mg/kg.Conclusion The fresh water fish from Pearl River Delta were polluted by DEHP,DBP and BOP significantly and the level of pollution is different among various areas.Key words:Aquaculture,fish Phthalate esters _Water pollution,chemical _Pearl R

7、iver Delta基金项目:国家自然科学基金资助项目(40471118;国家自然科学基金与广东省联合基金资助项目(U0633006作者单位:1.暨南大学水生生物研究所(广东广州510632;2.中国水产科学研究院珠江水产研究所(广东广州510380;3.中国科学院地球化学研究所(广东广州510640作者简介:李潇(1980-,女,硕士,从事环境生物学研究。通讯作者:聂湘平,E-mail:txpnie【论著】邻苯二甲酸酯(phthalic acid esters,PAEs 是一类重要的工业有机化合物,作为增塑剂被广泛用于塑料工业中,以增大产品的可塑性和提高产品的强度。常见的有邻苯二甲酸二甲酯(

8、DMP 、邻苯二甲酸二乙酯(DEP 、邻苯二甲酸二正丁酯(DBP 、邻苯二甲酸二正辛酯(DOP 、邻苯二甲酸二异辛酯(DEHP 1。PAEs 除用作增塑剂外,还用作农药载体、玩具、清洁剂以及涂料的组分。在人们的日常生活中,广泛应用到PAEs 。因为随时间的推移,塑料中PAEs 可迁移释放到环境中从而造成污染。所以各国政府都高度关注PAEs 这类持久性有机污染的环境影响2-4。PAEs 是酯类化合物中较难降解的一类持久性有毒有害污染物,可在生物体内长期蓄积,并具有环境激素作用5,6。美国国家环保局(EPA 已将DEHP 、DBP 、DEP 等6种PAEs 列为优先控制的有毒污染物4。我国也将DE

9、P 、DM P 和DOP 确定为环境优先控制污染物1,7。许多国家的大气、水体、动物体内和土壤中均含有PAEs ,我国的湖泊、江河也普遍检出了PAEs 1,7-9。鱼类作为重要蛋白质来源之一,其卫生安全与人的身体健康紧密联系,特别是我国养殖鱼类产量远超过天然捕捞鱼类,养殖鱼类体内污染物的残留状况尤为值得关注。笔者探讨了珠江三角洲地区养殖鱼体内PAEs 的污染状况,为当地环境保护卫生管理部门提供基础数据。1材料与方法1.1仪器与试剂HP 6890N GC 型毛细管气相色谱仪(美国Agilent 公司,德国Martin Christ 公司冷冻干燥机,旋转蒸发仪(瑞士Buchi 公司,上海HSG B

10、-6型数显式恒温水浴锅、索氏抽提器;DMP 、DEP 、DBP 、DOP 、DEHP 和邻苯二甲酸丁辛酯(BOP 标样均购于百灵威化学技术有限公司。分析纯(AR 级无水乙醚、正己烷、二氯甲烷、丙酮购自天津市化学试剂厂。中性氧化铝(100200目,分析纯,上海五四化学试剂厂,硅胶(60100目,分析纯,青岛化学试剂厂。1.2样品采集于2005年11月分别在珠江三角洲(采样点1、采样点2和采样点3的淡水养殖场采集草鱼、鲫鱼和罗表16种PAEs在样品中的加标回收率(n=5PAEs DMP DEP DBP BOP DEHP DOP 本底值(mg/kg0.472.213.275.038.44未检出测定值

11、(mg/kg9.2511.5712.5814.3217.559.48回收率(%87.893.693.192.991.194.8RSD(%0.760.540.600.940.330.12非鱼,每种鱼分别取3尾;香港新界3个样点(采样点4、5、6采集的淡水养殖鱼类(草鱼、鲫鱼和罗非鱼样品由香港浸会大学提供。1.3试验方法1.3.1气相色谱条件HP6890型气相色谱仪,氢火焰离子化检测器(FID;色谱柱为HP530.0m柱;载气为高纯氦气,初始压力为0.56kPa,载气流量为40ml/min;不分流进样,体积为2l;升温程序:初始温度为80,保持1min,以20/min升至150,以4/min升至2

12、90,保留5min,进样口温度为290。1.3.2样品处理取鱼背部肌肉,经冻干处理后磨碎,准确称取24g,以乙醚为提取液,索氏抽提24h,提取液在旋转蒸发仪上以水浴40,90kPa真空度和30 r/min转速的条件浓缩至1ml,再过硅胶-氧化铝复合柱(10mm×500mm净化,柱底填充一层薄玻璃纤维层,该柱以8g中性氧化铝和15g硅胶经120烘箱过夜后填充,上端再填以1cm厚的无水硫酸钠。洗脱条件为:先以50ml二氯甲烷洗脱,再以40ml的丙酮-正己烷(体积比为2080混合液洗脱,两馏分经氮气吹干后以正己烷溶解合并,最终定容至1ml进行气相色谱测定。1.3.3标准样品以正己烷为溶剂,

13、配制100mg/L DMP、DEP、DBP、DOP、DEHP和BOP的单标储备液,再逐级用正己烷稀释至所需浓度。PAEs混合标准溶液:包括DMP、DEP、DOP、DBP、DEHP和BOP共6种化合物。工作标准液质量浓度除DEHP外,其他5种皆为10、5、1、0.5和0.1mg/L,DEHP工作标准液浓度为100、80、40、10和8mg/L。根据标准曲线,用外标法计算样品中PAEs含量。1.4质量控制与质量保证实验中避免使用塑料制品,所用试剂皆为分析纯,除乙醚外均经双蒸处理。所用玻璃仪器经超声波清洗器洗净并在120的条件下烘干后再以正己烷冲洗。在分析过程中以试剂空白、空白加标、基质加标和样品平

14、行样的测定进行质量控制,以监测样品处理与分析过程对测定结果的影响。每种PAEs加标10mg/L,每个样品重复5个平行。6种PAEs在样品中的加标回收率及色谱图见表1和图1。2结果2.1珠江三角洲地区养殖鱼体内6种PAEs的含量表2可见,草鱼体内主要检出DMP、DEP、DBP、BOP和DEHP,其中采样点3地区草鱼PAE s含量较高,除DM P的含量较低(只有0.36mg/kg外,其它5种PAEs 含量均在2.00mg/kg以上,其中DEHP和BOP的含量分别为8.47、4.93mg/kg;采样点2地区草鱼体内检出的DEP(4.11mg/kg和DEHP(12.46mg/kg含量较高,其他3种PA

15、Es的含量均低于0.60mg/kg;采样点1地区草鱼体内只检出DMP、DEP和BOP,且含量均较低。经方差分析,不同采样点之间草鱼体内PAEs含量差异有统计学意义(P<0.05。鲫鱼体内主要检测到DM P、DEP、DBP、BOP和DEHP。采样点2地区鲫鱼体内含量最高的是DBP(7.68 mg/kg,其次是BOP(5.26mg/kg,含量较少的DM P和DEHP只有0.12和0.06mg/kg,未检出DOP;采样点1地区鲫鱼中的DEP(3.62mg/kg和DEHP(3.57mg/kg含量相对较高,其他几种PAEs含量较低。采样点3地区鲫鱼体内含有侧链较长的PAEs,如BOP、DEHP和D

16、OP,其中只有采样点3地区检出DOP(1.66mg/kg。采样点2地区罗非鱼PAEs含量最高,BOP和DEHP的含量高达12.39、10.87mg/kg,DMP、DEP和1DMP;2DEP;3DBP;4BOP;5DEHP;6DOP图16种PAEs的气相色谱图123456时间t/min表2珠江三角洲和香港地区养殖鱼类体内PAEs的含量(n=3,mg/kg干重采样点采样点1采样点2采样点3采样点4采样点5采样点6DMP0.480.530.360.571.140.56DEP1.724.112.800.252.311.24DBP0.000.173.262.436.493.36BOP2.280.544.

17、932.043.852.55DEHP0.0012.468.473.2537.2337.64DOP0.000.000.001.450.891.00DMP70.941.211.15DEP3.620.790.750.820.451.24DBP0.237.680.820.0011.6627.27BOP0.605.264.042.910.9315.16DEHP3.570.061.9823.3531.6935.97DOP0.000.001.660.480.411.57DMP0.580.640.470.030.310.52DEP1.920.822.451.430.480.17DBP0.

18、054.444.305.6411.732.65BOP0.4212.395.910.081.511.16DEHP1.0510.873.322.2526.1222.55DOP0.000.971.30草鱼鲫鱼罗非鱼DOP含量较低(<1.00mg/kg;采样点3地区罗非鱼PAEs含量也较高,6种PAEs均被检出,其中BOP的含量较高(5.91mg/kg,DBP、DEHP和DEP的含量分别为4.30、3.32和2.45mg/kg,DMP最少(0.47mg/kg;采样点1地区罗非鱼体内PAEs含量较低,虽然检出DMP、DEP、DBP、BOP和DEHP,但含量最高的DEP的含量

19、仅有1.92mg/kg,其它3种的含量在0.401.10 mg/kg之间。经方差分析,不同采样点之间罗非鱼体内含量差异有统计学意义(P<0.05。2.2香港地区养殖鱼类体内6种PAEs含量表2可见,草鱼体内检测到6种PAEs,其中采样点5草鱼DEHP含量很高,达37.23mg/kg,其次为DBP(含量为6.49mg/kg,其他4种的含量均在1.00 4.00mg/kg之间;采样点6草鱼6种PAEs含量类似于采样点5,略低于采样点5的PAEs含量,其中DEHP 含量最高(37.64mg/kg,其次为DBP(3.36mg/kg,最低为DMP(0.56mg/kg;采样点4的草鱼PAEs含量是3

20、个采样点中含量最低的,虽然也检测出6种PAEs含量,但含量最高的DEHP也只有3.25mg/kg,含量最低的是DEP(0.25mg/kg。方差分析,采样点4与采样点5、采样点6之间差异有统计学意义(P<0.05,采样点5与采样点6之间差异无统计学意义(P>0.05。鲫鱼体内PAEs含量较高,6种PAEs均可检出。其中采样点6鲫鱼的PAEs含量较高,DEHP、DBP和BOP的含量高达35.97、27.27、15.16mg/kg,其他3种PAEs的含量在1.101.60mg/kg之间;采样点5鲫鱼DEHP和DBP的含量分别为31.69、11.66mg/kg,其它4种PAEs的含量相对较

21、低(<1.0mg/kg;采样点4鲫鱼的PAEs含量最低,没有检测到DBP,只有DEHP的含量较高(23.35mg/kg,其次为BOP(2.91mg/kg,其他3种PAEs的含量均在1.00mg/kg以下。经方差分析,采样点4与采样点6之间差异有统计学意义(P<0.05,采样点5与采样点6之间差异有统计学意义(P<0.05。采样点5罗非鱼体内检测到DEHP和DBP的含量高达26.12、11.73mg/kg,而其他4种PAEs的含量较低,含量最低的DMP只有0.31mg/kg;采样点6罗非鱼体内未检出DOP,含量最高的是DEHP(22.55 mg/kg,其次为DBP(2.65mg

22、/kg,而含量最少的DEP 仅0.17mg/kg;采样点4罗非鱼PAEs含量最低,体内只检测到DEP、DBP、DEHP和DOP,其中DBP含量最高(5.64mg/kg,含量最低的是DM P(0.03mg/kg。采样点4与采样点5、6之间差异有统计学意义(P<0.05,采样点5与4之间差异无统计学意义(P>0.05。3讨论PAEs可以通过不同途径(如大气沉降和雨水淋溶进入水体中。即使微量的PAEs进入水体中,也可能会在不同生物体内蓄积,并通过食物链逐级放大,最后在较高营养级如鱼类体内不断蓄积到较高浓度2,10。所以对鱼体内PAEs的分析对于了解一个地区PAEs 污染状况是一个重要的内

23、容。本实验中检测的6种PAEs是工业生产中使用最广泛也是环境中最常见的。分析表明,鲫鱼、草鱼、罗非鱼主要受到DEHP、DBP和BOP的污染,与我国环境主要受到的DEHP和DBP等PAEs污染的相关报道相一致7-9。但是不同采样点养殖鱼类体内DMP和DOP的含量很低,多数样品中未检出DOP。由此可以看出珠江三角洲地区养殖水体中几乎没有受到DOP 的污染。生物体内PAEs的含量不仅与环境中暴露的浓度相关,而且和PAEs本身的理化性质有关。DMP、DBP、DEHP和DOP的水生生物富集因子分别为13.7, 4.2×105,1.9×109和3.2×1091。因为DEHP和

24、DBP的生物富集因子较高,这两类PAEs在鱼类体内含量较高并不一定表明养殖水体DEHP和DBP含量一定比其他PAEs如DMP高;反之,DMP的生物富集因子很小,在鱼类体内含量较少也不代表养殖水体中DMP的含量就低。所以,了解养殖水体中各种PAEs的含量还需要对水样进行进一步的分析。养殖鱼类PAEs的含量与采样点的不同有很大区别。DBP和DEHP在香港地区采样点5、采样点6的含量明显高于其他采样点;而DEP在采样点2、采样点3和采样点1的含量高于其他地区;这说明PAEs的污染情况表现为明显的点状分布,表现为珠江三角洲中小城市地区较采样点1(大型城市污染情况严重,如采样点2、采样点3比采样点1地区

25、污染情况严重,采样点1地区的污染情况最轻。这可能与各地区塑料加工业的分布情况和塑料制品的使用量有关,如采样点2、采样点3地区的塑料、PVC管线制品加工企业分布密集,而且该地区人口密集,塑料等含有PAEs的制品的使用量大,这可能是PAEs污染情况较严重的原因之一。本实验表明,养殖鱼类体内PAEs含量与养殖品种之间没有显著的相关性,但不同地点养殖鱼类体内含量差异有统计学意义,这和养殖地区环境中PAEs污染状况有一定相关性。参照美国EPA和欧盟规定的PAEs安全日摄入量(TDI,即每公斤体重2037g/d 的标准7,10,按照体重为60kg的成年人,日摄入100g 鱼类食物估算,珠江三角洲池塘养殖鱼

26、类体内PAEs 含量接近或低于此标准,但长期食用含有这种低剂量污染物质的鱼类,是否会对人体健康造成不利的影响值得进一步调查研究。参考文献:胡晓宇,张克荣,孙俊红.中国环境中邻苯二甲酸酯类化合物污染的研究J.中国卫生检验杂志,2003,13(2:9-14.Franco M,Prevedouros K,Alli R,et al.Comparison and analysis of different approaches for estimating the human exposure to phthalate12estersJ.Environment International,2007,33

27、:283-291.赵亢.持久性有机污染物的特性及其在我国的使用和管理现状J.环境与健康杂志,2005,22(6:480-483.周文敏.环境优先污染物M.北京:中国环境科学出版社,1989: 11-13.张征,吴振斌.酞酸酯对水生生物的生物学效应J.淡水渔业, 2006,36(1:57-59.Patyna PJ,Brown RP,Davi RA,et al.Hazard evaluation of diisononyl phthalate and diisodecyl phthalate in a Japanese medaka multigenerational assayJ.Ecology

28、 and Environmental Safety,2006,65:36-47.张蕴晖,陈秉衡,郑力行,等.环境样品中邻苯二甲酸酯类物质的测定与分析J.环境与健康杂志,2003,9:283-286.郑和辉,赵立文,刘玉敏,等.饮用水中邻苯二甲酸酯的气相色谱-质谱测定法J.环境与健康杂志,2005,22(5:377-378.郑力行,诸建辉,张蕴辉,等.水产品中3种邻苯二甲酸酯类物质的测定J.复旦学报医学版,2003,30(2:158-163.Latini G.Monitoring phthalate exposure in humansJ.Clinica Chimica Acta,2005,36

29、1:20-29.(收稿日期:2007-12-29(本文编辑:杜宇欣789103456文章编号:1001-5914(200803-0205-04煤浮选剂对Balb/c小鼠免疫毒性的初步评价包巍1,刘小真2,黄海潮3,梁越2,蒋曼1,张碧云1,刘烈刚1摘要:目的探讨煤浮选剂对Balb/c小鼠免疫系统功能的损害作用。方法选择清洁级雌性Balb/c小鼠,共48只,随机分为溶剂对照组(阴性对照组,灌胃大豆油、低、中、高剂量煤浮选剂染毒组,每组12只,经口灌胃,染毒组灌胃剂量从低到高依次为100、300、1000mg/kg。连续染毒28d。染毒期满,记录体重和肝、肾、脾脏、胸腺重,每只脾脏均留置1/2用作

30、组织病理学检查,另1/2制备脾脏单细胞悬液,进行T、B淋巴细胞增殖试验和NK细胞活性测定。结果1000mg/kg 组胸腺系数低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01,各组脾脏系数差异无统计学意义,但1000和300mg/kg组的脾脏在组织水平上表现出脾窦淤血改变。与对照组比较,1000和300mg/kg组的T淋巴细胞增殖活性降低,差异有统计学意义(P<0.01;B淋巴细胞增殖活性升高,差异有统计学意义(P<0.01。1000和300mg/kg组的NK细胞活性降低,差异有统计学意义(P<0.01,中剂量组的NK细胞活性未观察到显著改变(P>0.05。结论煤浮选剂对

31、Balb/c小鼠具有免疫毒性作用。关键词:煤浮选剂;免疫毒性;Balb/c小鼠;评价中图分类号:R994.6文献标识码:AEvaluation of Immunotoxicity of Coal Flotation Reagent to Mice BAO Wei,LIU Xiao-zhen,HUANG Hai-chao,et al. Department of Nutrition and Food Hygiene,Tongji Medical College,Huazhong University of Science&Technology,Wuhan, Hubei430030,Chi

32、naAbstract:Objective To study the adverse effects of coal flotation reagent on the immune system in Balb/c mice.Methods Balb/c mice were weighed and randomly divided into four groups,the solvent control group(negative control group,low,moderate and high dose group(coal flotation reagent treated grou

33、p,12in each,the mice were treated with coal flotation reagent through gavage at doses of0mg/kg,100mg/kg,300mg/kg and1000mg/kg respectively for28consecutive days.In the end of experiment, the weight of body,liver,kidney,thymus,spleen was determined.Half of the spleen was used for histopathological ev

34、aluation, another half was prepared as spleen single cell suspensions for T/B lymphocyte proliferation test and nature killer cell assay.The statistical analysis of data was performed by using SPSS12.0software.Results Compared with the solvent control,thymus body w eight ratio in the high dose group decreased significantly(P<0.01,no significant change w as obser