葡萄糖及葡萄糖注射液的质量分析

1、葡萄糖及葡萄糖注射液的质量分析 实实 验验 目目 的的实验仪器与试剂实验仪器与试剂 实验内容及注意事项实验内容及注意事项讨论与思考题讨论与思考题一、实验目的一、实验目的1 1、了解药品鉴别、检验的目的和意义。、了解药品鉴别、检验的目的和意义。2 2、掌握药品常用的鉴别方法和原理、掌握药品常用的鉴别方法和原理3 3、掌握药品中一般杂质检查的方法原理和限量、掌握药品中一般杂质检查的方法原理和限量计算的方法。计算的方法。4 4、掌握含量测定的方法和原理。、掌握含量测定的方法和原理。二、实验仪器与试剂二、实验仪器与试剂v仪器：可见仪器：可见紫外分光光度仪、旋光仪、钠氏比紫外分光光度仪、旋光仪、钠氏比色

2、管、滴定管色管、滴定管v试剂：碱性酒石酸铜试液、酚酞、标准氯化钠试试剂：碱性酒石酸铜试液、酚酞、标准氯化钠试液、标准硫酸钾溶液、碘试液、磺基水杨酸试液、液、标准硫酸钾溶液、碘试液、磺基水杨酸试液、硫氰酸铵试液、氨试液、碳酸钠、碘化钾、碘滴硫氰酸铵试液、氨试液、碳酸钠、碘化钾、碘滴定液、硫代硫酸钠滴定液、淀粉指示剂定液、硫代硫酸钠滴定液、淀粉指示剂v葡萄糖的质量分析葡萄糖的质量分析v葡萄糖注射液的质量分析葡萄糖注射液的质量分析 三、实验内容三、实验内容鉴别试验鉴别试验 性性 状状杂质检查杂质检查葡萄糖的质量分析葡萄糖的质量分析 v性状：性状： 本品为无色结晶或白色结晶性或颗粒性粉末；本品为无色结

3、晶或白色结晶性或颗粒性粉末；无臭，味甜。本品在水中易溶，在乙醇中微溶。无臭，味甜。本品在水中易溶，在乙醇中微溶。 v鉴别：鉴别： 原理：在加热的情况下，酒石酸铜与还原糖反原理：在加热的情况下，酒石酸铜与还原糖反应生成红色的氧化亚铜沉淀。应生成红色的氧化亚铜沉淀。 操作：取本品约，加水操作：取本品约，加水5ml 5ml 溶解后，缓缓滴溶解后，缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜入温热的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉淀。的红色沉淀。 （一）葡萄糖的质量分析（一）葡萄糖的质量分析 v 检查检查（1 1）酸度）酸度 取本品，加水取本品，加水20ml20ml溶解后，加酚酞指示液溶

4、解后，加酚酞指示液3 3 滴与氢氧滴与氢氧化钠滴定液化钠滴定液(0.02mol/L)0.20ml (0.02mol/L)0.20ml ，应显粉红色。，应显粉红色。 （2 2）氯化物）氯化物 取本品取本品0.6g 0.6g ，依法检查，与标准氯化钠溶液，依法检查，与标准氯化钠溶液6.0ml 6.0ml 制制成的对照液比较，不得更浓成的对照液比较，不得更浓) )。（3 3）硫酸盐）硫酸盐 取本品，依法检查（附录取本品，依法检查（附录 B B），与标准硫酸钾溶液），与标准硫酸钾溶液2.0ml 2.0ml 制成的对照液比较，不得更浓制成的对照液比较，不得更浓) )。 （4 4）亚硫酸盐与可溶性淀粉）亚

5、硫酸盐与可溶性淀粉原理：换色为碘试液本身的颜色，证明无亚硫酸盐与可溶性原理：换色为碘试液本身的颜色，证明无亚硫酸盐与可溶性淀粉存在。当有亚硫酸盐与可溶性淀粉存在时，淀粉遇碘淀粉存在。当有亚硫酸盐与可溶性淀粉存在时，淀粉遇碘遍蓝色，亚硫酸盐与碘发生氧化还原反应生成碘离子，变遍蓝色，亚硫酸盐与碘发生氧化还原反应生成碘离子，变为无色。为无色。操作：取本品，加水操作：取本品，加水10ml10ml溶解后，加碘试液溶解后，加碘试液1 1 滴，应即显黄滴，应即显黄色。色。 （5 5）蛋白质）蛋白质原理：当样品中有蛋白质存在时，加入磺基水杨酸后，在略原理：当样品中有蛋白质存在时，加入磺基水杨酸后，在略低于蛋白

6、质的等电点的低于蛋白质的等电点的pHpH值的条件下，蛋白质带有正电荷值的条件下，蛋白质带有正电荷与带有负电荷的磺基水杨酸根结合，形成不溶性的蛋白质与带有负电荷的磺基水杨酸根结合，形成不溶性的蛋白质盐而沉淀。盐而沉淀。操作：操作： 取本品，加水取本品，加水10ml10ml溶解后，加磺基水杨酸溶液（溶解后，加磺基水杨酸溶液（1 1 5 5 ）3ml 3ml ，不得发生沉淀。，不得发生沉淀。 （6 6）铁盐）铁盐 原理：铁盐在盐酸酸性溶液中于硫氰酸铵生成红色的可溶性原理：铁盐在盐酸酸性溶液中于硫氰酸铵生成红色的可溶性的硫氰酸铁配位离子，再与一定量的标准的铁溶液用同法的硫氰酸铁配位离子，再与一定量的标

7、准的铁溶液用同法制备的对照液比较，颜色不得更深。制备的对照液比较，颜色不得更深。操作：取本品，加水操作：取本品，加水20ml20ml溶解后，加硝酸溶解后，加硝酸3 3 滴，缓缓煮沸滴，缓缓煮沸5 5 分钟，放冷，加水稀释使成分钟，放冷，加水稀释使成45ml45ml，加硫氰酸铵溶液，加硫氰酸铵溶液(30 (30 100)3ml 100)3ml ，摇匀，如显色，与标准铁溶液，摇匀，如显色，与标准铁溶液2.0ml 2.0ml 用同一用同一方法制成的对照液比较，不得更深方法制成的对照液比较，不得更深) ) 。 鉴别试验鉴别试验含量测定含量测定杂质检查杂质检查葡萄糖注射液的质量分析葡萄糖注射液的质量分析

8、 性性 状状v性状性状 本品为无色或几乎无色的澄明液体；味甜。本品为无色或几乎无色的澄明液体；味甜。 v鉴别鉴别 取本品，缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中，取本品，缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉淀。即生成氧化亚铜的红色沉淀。 （二）葡萄糖注射液的质量分析（二）葡萄糖注射液的质量分析 v检查检查5-羟甲基糠醛羟甲基糠醛 原理：原理： 葡萄糖水溶液在弱酸性时稳定，但在高温加热灭菌葡萄糖水溶液在弱酸性时稳定，但在高温加热灭菌时，葡萄糖易分解产生时，葡萄糖易分解产生5-5-羟甲基糠醛、乙酰丙酸、甲酸羟甲基糠醛、乙酰丙酸、甲酸等副产物。等副产物。操作：操作： 精密量取本品适量（

9、约相当于葡萄糖），置精密量取本品适量（约相当于葡萄糖），置 25ml25ml量量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，照分光光度法（附录瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，照分光光度法（附录 A A），在），在284nm 284nm 的波长处测定，吸收度不得大于。的波长处测定，吸收度不得大于。 v含量测定含量测定 旋光度法旋光度法 剩余碘量法剩余碘量法（1）旋光度法）旋光度法 （用（用50%的葡萄糖注射液测定）的葡萄糖注射液测定）原理：原理：药用葡萄糖是药用葡萄糖是D-D-葡萄糖，而葡萄糖，而D-D-葡萄糖有葡萄糖有、两种互两种互变异构体，药用葡萄糖是这两种的混合物，两者的比旋度变异构体，药用葡萄糖是这两种的混

10、合物，两者的比旋度相差甚远，而在水溶液中两者逐渐达到互变平衡状态，一相差甚远，而在水溶液中两者逐渐达到互变平衡状态，一般加热、加酸或加弱碱可加速其平衡，上述加入氨液后摇般加热、加酸或加弱碱可加速其平衡，上述加入氨液后摇匀放置就是让其变旋而达到平衡。匀放置就是让其变旋而达到平衡。操作操作：精密量取本品适量（约相当于葡萄糖：精密量取本品适量（约相当于葡萄糖5g5g），置），置50ml 50ml 量瓶中，加氨试液（量瓶中，加氨试液（1010或或1010以下规格的本品可直接取以下规格的本品可直接取样测定），用水稀释至刻度，摇匀，静置样测定），用水稀释至刻度，摇匀，静置1010分钟，依法测分钟，依法测定

11、旋光度，与相乘，即得供试量中含有定旋光度，与相乘，即得供试量中含有C C6 6H H1212O O6 6.H.H2 2O O的重量的重量(g) (g) 。 旋光管的操作与读数：旋光管的操作与读数：计算公式：计算公式：CLCLDD1001002020%1002.0852%20Dm标示量（L:L:旋光管长度，为旋光管长度，为2dm2dm；C C：溶液浓度：溶液浓度g/100mlg/100ml；：旋光度；：旋光度；为比旋度；为比旋度；m m质量质量(g)(g)）注意事项：注意事项： 读数、调零、公式单位换算读数、调零、公式单位换算（2）剩余碘量法）剩余碘量法v原理：原理： 在供试品中先加入一定量的碘

12、滴定液，待在供试品中先加入一定量的碘滴定液，待I I2 2与待测组分反与待测组分反应完全后，再用应完全后，再用NaNa2 2S S2 2O O3 3滴定液滴定剩余的碘，同时做空白试滴定液滴定剩余的碘，同时做空白试验对照，根据与药物作用的碘的量来计算药物含量的方法。验对照，根据与药物作用的碘的量来计算药物含量的方法。64232222232424222223365)()(23(23OSNaNaIOSNaIOHIHIIOOHICOOCHOHOHCHOHIOCHOCHOHOHCHIIOIOOHIIOOHI1mol C6H12O6.H2O1mol I22mol Na2S2O3v 操作操作 精密量取本品适

13、量（约相当于葡萄糖精密量取本品适量（约相当于葡萄糖75mg75mg）置碘量瓶）置碘量瓶中，加水稀释至中，加水稀释至5ml5ml，加含碳酸钠，加含碳酸钠14.3%14.3%及碘化钾及碘化钾4.0%4.0%的缓的缓冲溶液冲溶液25ml25ml，再精密加入碘滴定液，再精密加入碘滴定液25ml25ml，密塞，在，密塞，在2020准准确放置确放置30min30min后，加后，加2mol/L2mol/L盐酸盐酸35ml35ml，并立即用硫代硫酸，并立即用硫代硫酸钠滴定液滴定至近终点时，加入淀粉指示剂，继续滴定至钠滴定液滴定至近终点时，加入淀粉指示剂，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正。每蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml1ml碘滴定碘滴定液（）相当于的无水葡萄糖（液（）相当于的无水葡萄糖（C C6 6H H1212O O6 6）或相当于的葡萄糖）或相当于的葡萄糖（C C6 6H H1212O O6 6.H.H2 2O O）。）。 v计算公式计算公式%10075FT)%0mgVV（标示量其中：其中： V V0 0：空白试验消耗的：空白试验消耗的NaNa2 2S S2 2O O3 3滴定液的体积滴定液的体积mlml； V V：样品测定消耗的：样品测定消耗的NaNa2 2S S2 2O O3 3滴定液的体积滴定液的体积mlml； T=9.909mg(C T=9.909mg(