执业兽医资格考试免疫学免疫防治

1、鲁东大学鲁东大学王晓通王晓通天然被动免疫天然被动免疫天然主动免疫天然主动免疫人工被动免疫人工被动免疫人工主动免疫人工主动免疫第一节第一节 主动免疫和被动免疫主动免疫和被动免疫动物在感染某种病原微生物耐过后产生的对该病原体再次动物在感染某种病原微生物耐过后产生的对该病原体再次侵入的抵抗力称为天然主动免疫侵入的抵抗力称为天然主动免疫动物通过母体胎盘、初乳或卵黄从母体获得某种特异动物通过母体胎盘、初乳或卵黄从母体获得某种特异性抗体，从而获得对某种病原体的免疫力，称为天然性抗体，从而获得对某种病原体的免疫力，称为天然被动免疫。被动免疫。采用人工方法向机体输入由别人或动物产生的免疫采用人工方法向机体输入

2、由别人或动物产生的免疫效应物，如免疫血清、淋巴因子等，使机体立即获效应物，如免疫血清、淋巴因子等，使机体立即获得免疫力人工被动免疫得免疫力人工被动免疫接种抗原而获得的免疫力人工主动免疫接种抗原而获得的免疫力人工主动免疫 第二节第二节 疫苗的特征与制备疫苗的特征与制备疫苗如何起作用疫苗如何起作用?它们如何生长繁殖它们如何生长繁殖?它们如何被使用它们如何被使用?v指抗原疫苗 给无免疫个体接种v优点：v - 长期保护v - 花费少v - 平安性高理想疫苗：有免疫原性提供长期保护 - 加强间隔长没有反响原性，必须有免疫原性(免疫原性，是指可以刺激机体形成特异抗体或致敏淋巴细胞的才能。反响原性又称抗原性

3、，是指能与由它刺激所产生的抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反响)稳定疫苗接种：保护个体保护群体 群体保护可以铲除疾病有宏大的花费节省好处v测试免疫原性v衡量免疫原性v临床实验放射免疫参加指示剂酶联免疫参加底物和 颜色改变v血清转换率：指的是血清抗体免疫成功率，是指接种某种疫苗后能检查到血清抗体的人数占总人数的百分比。v血清保护： - 接种疫苗后产生保护抗体接种者的百分率v几何平均滴度：GMT=个体滴度的对数接种者人数一期临床：安康人群的首次实验20个左右的志愿者疫苗是否平安？疫苗是否有免疫原性？三期临床：100-1000个人疫苗是否平安？疫苗是否有保护性？ - 疫苗的免疫原性与现存疫苗的比较？ -

4、 保护效果怎么样？不同批次间是否有相似效果？二期临床：50-200个安康志愿者什么是最好的： - 配方？ - 剂量？ - 规程？ - 方法？不同人群是如何被影响的？副反响监控 四期临床：上市后实验副反响监控补中数据 - 新适应症 - 比较实验 - 新规程v疫苗接种v疫苗接种副反响v疫苗存储与发放v皮下 - 麻腮风、水痘v肌肉 - 甲肝、乙肝、白百破v口服 - 脊灰v部分反响v - 在注射部位疼痛v - 红斑v - 肿胀v全身反响v - 发热v - 不适v注射危险由于技术差v超敏反响v - 使用肾上腺素v - 被接种者在附近观察30分钟v急性发热疾病v怀孕v - 接种预防狂犬病除外减毒活疫苗：弱

5、毒苗保存于冰箱冷冻室(0以下)冻结保存溶解后尽快使用防止反复冻融假设距使用时间较短者(1-2天)置于2-15阴暗、枯燥的环境绝大部分疫苗：在冰箱+2到+8贮存不能冰冻一活疫苗一活疫苗弱毒疫苗：大多人工致弱弱毒疫苗：大多人工致弱异源疫苗：异源疫苗是用具有共同保护异源疫苗：异源疫苗是用具有共同保护性抗原的不同病毒制备成的疫苗性抗原的不同病毒制备成的疫苗 如：火鸡疱疹病毒如：火鸡疱疹病毒HVT接种预防接种预防鸡马立克氏病鸡马立克氏病毒力减弱的方法毒力减弱的方法: :v长时间在体外连续培养传代：长时间在体外连续培养传代：v在高于最适生长温度条件下培养在高于最适生长温度条件下培养: :炭疽炭疽 v在含有

6、特殊物质的培养基中培养在含有特殊物质的培养基中培养: :卡介苗卡介苗 v在特殊气体条件下培养在特殊气体条件下培养: : v通过非易感动物通过非易感动物: :猪丹毒通过豚鼠猪丹毒通过豚鼠370代后，又通代后，又通过鸡过鸡42代选育而成；猪瘟兔化弱毒代选育而成；猪瘟兔化弱毒 v通过基因工程的方法通过基因工程的方法: :去除毒力基因或用点突变，伪去除毒力基因或用点突变，伪狂犬基因缺失苗狂犬基因缺失苗 优点：优点：毒力弱或没有毒力，但仍然保持着原有的抗毒力弱或没有毒力，但仍然保持着原有的抗原性，可用较少的免疫剂量即或诱导产生坚原性，可用较少的免疫剂量即或诱导产生坚实的免疫力，实的免疫力，一般不须使用佐

7、剂，免疫期长，不影响动物一般不须使用佐剂，免疫期长，不影响动物产品的品质产品的品质有些弱毒病毒疫苗可刺激机体细胞产生干扰有些弱毒病毒疫苗可刺激机体细胞产生干扰素，对抵抗其他病毒强毒的感染也是有益的素，对抵抗其他病毒强毒的感染也是有益的缺点缺点许多弱毒株的致弱机制不明，有返强的危险许多弱毒株的致弱机制不明，有返强的危险研制周期长，有一定的偶尔性研制周期长，有一定的偶尔性运输贮存不方便，一般需要冻干和低温保存运输贮存不方便，一般需要冻干和低温保存v病原微生物经理化方法灭活后，仍然保持免疫原病原微生物经理化方法灭活后，仍然保持免疫原性，接种后使动物产生特异性抵抗力，这种疫苗性，接种后使动物产生特异性

8、抵抗力，这种疫苗称为灭活疫苗称为灭活疫苗killed vaccineskilled vaccines或死疫苗。或死疫苗。v目前所使用的灭活疫苗有组织灭活苗、油佐剂目前所使用的灭活疫苗有组织灭活苗、油佐剂灭活疫苗和氢氧化铝胶灭活疫苗等。灭活疫苗和氢氧化铝胶灭活疫苗等。灭活的方法灭活的方法最常用的是甲醛最常用的是甲醛0.4%溶液，灭活机制：溶液，灭活机制：作用于蛋白质的氨基和酰胺基，以及核酸的嘌呤和作用于蛋白质的氨基和酰胺基，以及核酸的嘌呤和嘧啶上的非氢键氨基团，形成交联，使其构造固嘧啶上的非氢键氨基团，形成交联，使其构造固定并丧失活力。定并丧失活力。其它的灭活剂还包括丙酮、乙醇、氧化乙烯等其它的

9、灭活剂还包括丙酮、乙醇、氧化乙烯等等。等。v优点：研制周期短、使用平安和易于保存。优点：研制周期短、使用平安和易于保存。v缺点：接种剂量大，免疫期较短，需参加适缺点：接种剂量大，免疫期较短，需参加适当的佐剂以增强免疫效果，接种时反响较大，当的佐剂以增强免疫效果，接种时反响较大，对肉品品质有影响。对肉品品质有影响。1.1.多糖蛋白结合疫苗多糖蛋白结合疫苗polysaccharide polysaccharide conjugate vaccinesconjugate vaccines是将多糖与蛋白载体如白喉、破伤风或霍乱类是将多糖与蛋白载体如白喉、破伤风或霍乱类毒素结合制成疫苗，这样多糖抗原转变

10、成为毒素结合制成疫苗，这样多糖抗原转变成为T T细胞信赖性抗原，能诱导产生细胞信赖性抗原，能诱导产生IgGIgG和记忆淋巴和记忆淋巴细胞。细胞。如人的肺炎链球菌的多种血清型荚膜多糖蛋白载体如人的肺炎链球菌的多种血清型荚膜多糖蛋白载体疫苗。疫苗。v是将细菌外毒素经甲醛脱毒，使其失去致病是将细菌外毒素经甲醛脱毒，使其失去致病性而保存免疫原性的制剂，如破伤风类毒素、性而保存免疫原性的制剂，如破伤风类毒素、白喉类毒素、肉毒类毒素等等。白喉类毒素、肉毒类毒素等等。3.3.亚单位疫苗亚单位疫苗subunit vaccinesubunit vaccine利用微生物的某种外表构造成分抗原利用微生物的某种外表构

11、造成分抗原制成不含有核酸、能诱发机体产生抗体的制成不含有核酸、能诱发机体产生抗体的疫苗，称为亚单位疫苗疫苗，称为亚单位疫苗 。亚单位疫苗是将致病菌主要的保护性免疫原存亚单位疫苗是将致病菌主要的保护性免疫原存在的组分制成的疫苗在的组分制成的疫苗微生物的免疫原性构造成分包括细菌的荚膜、微生物的免疫原性构造成分包括细菌的荚膜、鞭毛和病毒的囊膜、膜粒、衣壳蛋白等。鞭毛和病毒的囊膜、膜粒、衣壳蛋白等。v用基因工程技术将具有免疫保护力的蛋白质基用基因工程技术将具有免疫保护力的蛋白质基因克隆，并进展表达，以获得亚单位疫苗的方因克隆，并进展表达，以获得亚单位疫苗的方法法v常用的表达表达系统有大肠杆菌、酵母和病

12、常用的表达表达系统有大肠杆菌、酵母和病毒等等。毒等等。重组载体的构重组载体的构建建重组质粒的表达如大重组质粒的表达如大肠杆菌中肠杆菌中概念：概念：基因工程重组活载体疫苗基因工程重组活载体疫苗recombinant recombinant living vectored vaccinesliving vectored vaccines是用基因工程是用基因工程技术将保护性抗原基因转移到载体中使之表技术将保护性抗原基因转移到载体中使之表达的活疫苗。达的活疫苗。有多种可用于活载体的疫苗：如痘病毒、腺病毒有多种可用于活载体的疫苗：如痘病毒、腺病毒和疱疹病毒。和疱疹病毒。v基因缺失疫苗基因缺失疫苗gene

13、 deleted vaccinesgene deleted vaccines是是用基因工程技术将强毒株毒力相关基因切除用基因工程技术将强毒株毒力相关基因切除构建的活疫苗构建的活疫苗 v该类疫苗平安性好、不易返祖；其免疫接该类疫苗平安性好、不易返祖；其免疫接种与强毒感染相似，机体可对病毒的多种种与强毒感染相似，机体可对病毒的多种抗原产生免疫应答；免疫力坚实，免疫期抗原产生免疫应答；免疫力坚实，免疫期长。长。v如：伪狂犬病毒的如：伪狂犬病毒的tKtK基因缺失疫苗基因缺失疫苗v核酸疫苗核酸疫苗(nucleic acid vaccines)(nucleic acid vaccines)包括包括 DNA

14、 DNA疫疫苗和苗和RNARNA疫苗，由编码能引起保护性免疫反响的疫苗，由编码能引起保护性免疫反响的病原体抗原基因片段和载体构建而成。病原体抗原基因片段和载体构建而成。v导入机体的方式主要是肌肉注射，或用基因枪导入机体的方式主要是肌肉注射，或用基因枪将带有基因的金粒子注入。将带有基因的金粒子注入。v合成肽疫苗合成肽疫苗synthetic peptide vaccines )synthetic peptide vaccines )是用化学合成法人工合成病原微生物生物的保是用化学合成法人工合成病原微生物生物的保护性多肽，并将其连接到大分子载体上，再参护性多肽，并将其连接到大分子载体上，再参加佐剂制

15、成的疫苗。加佐剂制成的疫苗。v最早报道最早报道19801980成功的是口蹄疫多肽疫苗成功的是口蹄疫多肽疫苗v表位疫苗表位疫苗epitope vaccinesepitope vaccines是通过确定抗是通过确定抗原蛋白上的原蛋白上的B B细胞、细胞、THTH细胞以及细胞以及CTLCTL细胞识别的细胞识别的表位，经人工合成，并与大分子载体连接，参表位，经人工合成，并与大分子载体连接，参加佐剂制成；加佐剂制成；v也可通过基因工程技术表达抗原蛋白表位多肽，也可通过基因工程技术表达抗原蛋白表位多肽，或表达与大分子蛋白的交融蛋白制成。或表达与大分子蛋白的交融蛋白制成。v免疫途径免疫途径v 滴鼻、点眼、刺

16、种、注射、饮水、气雾等。滴鼻、点眼、刺种、注射、饮水、气雾等。v免疫程序免疫程序v 根据当地疫情传染病、动物人机体根据当地疫情传染病、动物人机体状况主要是指母源及后天获得的抗体消长情状况主要是指母源及后天获得的抗体消长情况以及现有疫况以及现有疫( (菌菌) )苗的性能苗的性能, ,为使动物机体为使动物机体获得稳定的免疫力获得稳定的免疫力, ,选用适当的疫苗选用适当的疫苗, ,安排在适安排在适当的时间给动物人进展免疫接种当的时间给动物人进展免疫接种, ,这就叫这就叫免疫程序免疫程序immune procedureimmune procedure，简单地说是，简单地说是免疫方案免疫方案immuni

17、zation scheduleimmunization schedule。A certain dose of vaccine (usually 0.1ml to 0.2ml) is injected in the abdominal area of each fish held with the ventral side up and the head away from the operators body. v在广东地区普遍进展草鱼土法疫苗的注射，效果非常好。v在200-300克左右注射一次，在1000克左右注射一次。v有专业性的疫苗制备、注射队伍。v选择已经患烂鳃、出血、肠炎等疾病的草鱼

18、。v病症愈典型、患病种类愈多愈好。v病鱼刚死亡不久或濒临死亡的草鱼最好。v将病鱼按照体重参加10倍量0 .85%的生理盐水，用组织捣碎机捣碎，或用刀剁碎成肉浆。v用离心机在3000转/分钟离心30分钟，或用多层纱布进展过滤，得到滤液，放弃残渣。v取滤液装入大烧杯或瓶中，并放在水浴锅或其他恒温水浴里保温，保温水浴锅的水位应该高于滤液的液面高度。v保温温度：631度。v保温时间：恒温2小时进展灭活。v在保温过程中逐渐参加40%福尔马林，使福尔马林在滤液中的浓度到达1%。一边搅拌一边参加福尔马林溶液。v将已经灭活好的疫苗滤液装入灭菌的瓶中，封口，冰箱临时保存。v最好在2-3天内使用完。v需要注射的草鱼最好先进展锻炼和麻醉处理。v主要前草鱼应该停食1天，将草鱼捕捞并在捆箱中保持2-3小时，并用3%左右食盐泼洒捆箱中草鱼。v或者：在桶或水泥池中，配制0.4-0.8%的食盐水或0.05-0.2%的晶体敌百虫溶液，将主要草鱼放置其中2-3分钟消毒和 麻醉后再进展注射。v在注射前10-20分钟，在制备