PBS缓冲液的配制(共3页)

1、精选优质文档-倾情为你奉上0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4，pH 7.2)PBS缓冲液（pH7.27.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L 称7.9g NaCl，0.2g KCl，0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4，溶于800 ml 蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1 L。保存于4冰箱中即可。需要注意的是

2、，通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。母液的配制： 0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应

3、比例适当稀释 即可，如：0.1M PB（PH=7.4） ：取 500ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。0.01M PB （PH=7.4）：取50ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。0.02M PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至 1000ml 即可。 若需要 NaCl的话，加入 NaCl 至0.9%（g/100ml）即可。另：其它各种另 PH值的 0.2M PB（100ml)配方 ：pH       0.2M NaH2PO4（ml）  &

4、#160;      0.2M Na2HPO4（ml）5.7             93.5                          6.55.8  

5、0;          92                             8          &

6、#160; 5.9             90                             106.0     &#

7、160;       87.7                          12.36.1             85   

8、0;                         156.2             81.5           

9、               18.56.3             77.5                     

10、     22.56.4             73.5                          26.56.5     

11、60;       68.5                          31.56.6             62.5   

12、60;                      37.56.7             56.5              &#

13、160;           43.56.8             51                         

14、60;  496.9              45                           557.0      &

15、#160;       38                           627.1              33 &#

16、160;                         677.2             28            

17、;                727.3              23                    &#

18、160;      777.4              19ml                         81ml7.5   &#

19、160;          16                           847.6            

20、  13                           877.7             10.5        

21、;                  90.57.8              8.5                 

22、         91.57.9             7                            &#

23、160; 938.0             5.3                           94.7 0.01M 磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO

24、4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌（至少20分钟），保存存于室温或4冰箱中。需要注意的是，通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话，则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。 PH        &#

25、160;   7.6      7.4         7.2        7.0 H2O       1000     1000     1000     1000 NaCl&

26、#160;        8.5      8.5        8.5         8.5 Na2HPO4 2.2      2.2       2.2    &#

27、160;    2.2 NaH2PO4 0.1      0.2       0.3         0.4根据经验来看，新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间，可是在温度的影响下，尤其在夏天，其电离常数发生了改变，在经过昼夜的时间后，PH值会明显改变（我亲自测过偏酸）。所以做实验的同学可要注意了，PH值可能会影响实验结果，甚至可能导致阴性。所以务必记得

28、这个时候和天气，要加强实验条件控制问题。每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS，如果发生偏酸或偏碱，注意重新换新液。PBS缓冲液 称取NaCl 8g，KCl 0.2g，Na2HPO4?12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。PBST缓冲液 取300l Tween-20 加入PBS 100ml中，混匀后即刻使用。现用现配。 如果是把所有固体加大十倍，配置为浓缩液，工作时候十倍稀释，那么，在刚配好浓缩液时，PH在6.5左右，明显偏酸。不能用盐酸调。虽然可以用氢氧化钠颗

29、粒调，但是有更方便的方法。 十倍稀释以后，PH自动升高到所需要的值。不需要其它任何处理。这个可以先取少量试一试，配好之后再测一次   PH8.0的PBS配方详细1. NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L 2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。3. 滴加浓盐酸将pH值调节至8.0，然后加入去离子水将溶液定容至1 L。4. 高温高压灭菌后，室温保存。注意：上述PBS Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。 0.05mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution，PBS)的配制：    甲液：0.05mol/L