生物化学26031

1、例例1：现在有四个氨基酸：现在有四个氨基酸：苯丙氨酸苯丙氨酸pI=5.5、脯氨酸、脯氨酸pI=6.3、天冬氨酸、天冬氨酸pI=2.8和赖氨酸和赖氨酸pI=9.7，请问在以下，请问在以下pH条件下进行电泳，各氨基酸的主要存在形式是什么条件下进行电泳，各氨基酸的主要存在形式是什么？在外电场作用下，移向阳极还是阴极？在外电场作用下，移向阳极还是阴极？ 苯丙氨酸苯丙氨酸 脯氨酸脯氨酸 门冬氨酸门冬氨酸 赖氨赖氨酸酸（1）pH=7.0（2）pH=6.0（3）pH=5.0（4）pH=2.0+ + 阴极阴极 + + 阴极阴极 - - 阳极阳极 + + 阴极阴极- - 阳极阳极 - - 阳极阳极 - - 阳极

2、阳极 + + 阴极阴极+ + 阴极阴极 + + 阴极阴极 + + 阴极阴极 + + 阴极阴极- - 阳极阳极 + + 阴极阴极 - - 阳极阳极 + + 阴极阴极将将Lys, Arg, Asp, Glu, Tyr,Leu,Thr和和Ala的的8种氨基种氨基酸混合物在酸混合物在pH3.0下加到下加到磺酸型阳离子交换树脂磺酸型阳离子交换树脂中中，然后用提高，然后用提高pH和盐浓度的洗脱剂进行洗脱，试预和盐浓度的洗脱剂进行洗脱，试预计它们被洗脱下来的顺序。计它们被洗脱下来的顺序。u 作用力：（作用力：（1）离子交换；（）离子交换；（2）氨基酸侧链与树）氨基酸侧链与树脂基质脂基质(聚苯乙烯聚苯乙烯)之

3、间的作用力。之间的作用力。uAsp Glu Tyr Leu Ala Thr Lys Arg 2.97 3.22 5.66 5.98 6.02 6.53 9.74 10.76 Asp, Thr, Glu, Ala, Leu, Tyr, Lys, Arg。 例例2：例例3：向向1L 1mol/L的处于等电点的甘氨酸溶液加入的处于等电点的甘氨酸溶液加入0.3 mol HCl，问所得溶液的，问所得溶液的pH是多少？如果加入是多少？如果加入0.3 mol NaOH以代替以代替HCl时，时，pH将是多少？将是多少？23937060960960H712370342342H. 0.70.3lg glu - g

4、lulg9p0.30.7lg glu glulg2.34p解：已知解：已知pK1=2.34， pK2=9.60 ，pI=5.97 H3N+CH2COOH H3N+CH2COO- H2NCH2COO- 酸酸 碱碱/ /酸酸 碱碱gly+ gly gly-例例4. 计算计算0.1 mol/L Gly在等电点时主要离子的浓度在等电点时主要离子的浓度解：已知解：已知pK1=2.34， pK2=9.60 ，pI=5.97 H3N+CH2COOH H3N+CH2COO- - H2NCH2COO- - 共轭共轭lgpKapH酸碱 gly+ gly gly- -2.310- -5 mol/L 0.09995

5、mol/L 2.310- -5 mol/L酸酸 碱碱/ /酸酸 碱碱0.1mol/Lglugluglugluglulg9.605.97gluglulg2.345.9799.95%例例5. 计算下列物质计算下列物质0.3mol/L溶液的溶液的pH： (a)亮氨酸盐酸盐；亮氨酸盐酸盐； (b)亮氨酸钠盐；亮氨酸钠盐； (c)等电亮氨酸。等电亮氨酸。(a)约约1.46,(b)约约11.5, (c)约约6.05H3N+CHCOOH H3N+CHCOO- - H2NCHCOO- -RRR2.36 9.68例例6. 计算计算赖氨酸赖氨酸的的-NH3+ 20%解离时溶液的解离时溶液的pH。 解：pH = p

6、Ka + lg20% pKa = 10.53 pH = 10.53 + lg20% = 9.83例例7. 计算谷氨酸的计算谷氨酸的-COOH 2/3解离时溶液的解离时溶液的pH。解：pH = pKa + lg2/3% pKa = 4.25 pH = 4.25 + 0.176 = 4.426例例8. 计算计算0.1 mol/L的谷氨酸溶液在等电点时主要的离子浓度。的谷氨酸溶液在等电点时主要的离子浓度。解：解： 已知已知pK1=2.19， pK2=9.67，pKR=4.25 ，pI=3.22H3N+CHCOOH H3N+CHCOO- - H3N+CHCOO- - H2NCHCOO- - 共轭共轭lgpKapH酸碱 glu+ glu glu glu= =0.00786mol/L 0.08427mol/L 0.00786mol/L 2.7910-9 mol/Lx 酸酸 y 碱碱/酸酸 z 碱碱/酸酸 w 碱碱