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1、精选优质文档-倾情为你奉上各种PH值的磷酸盐缓冲液配制PH=PKa+lg(a/b) K1=7.52X10-3, K2=6.23X10-8, K3=2.20X10-13.?设磷酸磷酸二氢钾浓度为C1 磷酸氢二钾浓度为C2pH=pK-lg(C1/C2)=7这里的pK是7.2(这个值只适用于磷酸二氢根/磷酸氢根缓冲对,公式是通用的)解得C1:C2=1.585(mol比) 磷酸的二级电离常数)Ka,求出PKa,然后根据公式可以算出磷酸二氢钾与磷酸氢二钾的浓度比C1:C2。这时混合物中P的质量分数为(31/136×1.585+31/174×1)/(1.585+1)=20.87%混合盐
2、的质量比136×1.585:174×1=215.56:17410mg/20.87%=47.916mg(47.916/(215.56+174)×215.56=26.51mg(47.916/2.575)×174=21.40mg应取磷酸二氢钾26.51mg 磷酸氢二钾21.40mg 用蒸馏水稀释至1L磷酸盐缓冲液 取磷酸二氢钠38.0g,与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得。磷酸盐缓冲液(pH2.0) 甲液:取磷酸16.6ml,加水至1000ml,摇匀。乙液:取磷酸氢二钠71.63g,加水使溶解成1000ml。取上述甲液72.5ml与乙液27.5
3、ml混合,摇匀,即得。 磷酸盐缓冲液(pH2.5) 取磷酸二氢钾100g,加水800ml,用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml。磷酸盐缓冲液(pH5.0) 取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0,即得。磷酸盐缓冲液(pH5.8) 取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml,即得。 磷酸盐缓冲液(pH6.5) 取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml,用水稀释至100ml,即得。 磷酸盐缓冲液(pH6.6) 取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g,加水使溶解成400ml,即得。磷
4、酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8) 取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8;另取胰酶10g,加水适量使溶解,将两液混合后,加水稀释至1000ml,即得。磷酸盐缓冲液(pH6.8) 取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml,加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml,用水稀释至1000ml,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液(pH7.0) 取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml,用水稀释至100ml,即得。 磷酸盐缓冲液(pH7.2) 取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml与0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml,加新沸过的
5、冷水稀释至200ml,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液(pH7.3) 取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000ml,调节pH值至7.3,即得。 磷酸盐缓冲液(pH7.4) 取磷酸二氢钾1.36g, 加0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml,用水稀释至200ml,即得。 磷酸盐缓冲液(pH7.6) 取磷酸二氢钾27.22g,加水使溶解成1000ml,取50ml,加0.2mol/L氢氧化钠溶液42.4ml,再加水稀释至200ml,即得。磷酸盐缓冲液(pH7.8) 甲液:取磷酸氢二钠35.9g,加水溶解,并稀释至500ml。乙液:取磷酸二氢钠2.76g,加水溶解,并稀释至10
6、0ml。取上述甲液91.5ml与乙液8.5ml混合,摇匀,即得。 磷酸盐缓冲液(pH7.88.0) 取磷酸氢二钾5.59g与磷酸二氢钾0.41g,加水使溶解成1000ml,即得。 -磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer, PB)试剂: NaH2PO4·2H2O Na2HPO4·12H2O配制方法:配制时,常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB),根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。1)0.2mol/L的 Na2HPO4;称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或
7、 NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。2)0.2mol/L的 Na2HPO4:称取NaHPO4.·12H2O 71.632g(或 Na2HPO4·7H2O 53.6g或 Na2HPO4·2H2O 35.6g)加重蒸水至1000ml溶解。3)0.2mol/L pH7.4的PB的配制:取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的 Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB(pH约为7.47.5)。若pH偏高或偏低,可通过改变二者的比例来加以调整,室温保存即可。0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.78.0)pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.5 6.55.8 92.0 8.05.9 90.0 10.06.0 87.7 12.36.1 85.0 15.06.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51.0 49.06.9 45.0 55.07.0 39.0 61.07.1 33.0 67.
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