改进的高效液相色谱梯度洗脱测定食品中碱性橙含量_图文

1、食品工业科技Science and T echnology of F ood Industry分析检测改进的高效液相色谱梯度洗脱测定食品中碱性橙含量夏立娅, 匡林鹤, 吴广臣(11河北大学质量技术监督学院, 河北保定071002; 21河北省产品质量监督检验院, 河北石家庄050051摘 要:改进了食品中碱性橙检测的高效液相色谱分析方法。采用甲醇提取, C leanert A l u m i naN 固相萃取柱净化黄鱼和豆制品中的碱性橙, 以XDB -C 18(5L m , 150mm 416mm 色谱柱进行分离, 检测波长为452n m, 以甲醇-0102m ol/L乙酸铵溶液为流动相梯度洗

2、脱。碱性橙的检测线性范围为01006100L g/mL, 最低检出浓度为01005mg /L,RSD 为3106%, 加标回收率为9012%9715%。关键词:碱性橙, 反相高效液相色谱, 梯度洗脱, 食品121Deter m ination of basic orange 2i n foodstuffs byimproved hi gh performance li qui d chro matographyXI A L-i ya 1, KUANG L i n -he 2, WU Guang -chen 1(11Supervi sion Instituti on of Quality&

3、;Technol ogy , H ebeiUn i versity , Baod i ng 071002, Ch i na ; 21H ebei Provi nce Instit u ti on of Supervision and Inspecti on Product Qualit y, Sh iji azhuang 050051, Ch i naAbstrac:t The ana l yti c a l m e thod o f b as i c o rang e2i n f ood s tuff s b y reve rsed p hase hi g h pe rf o r m anc

4、e li q u i d ch rom atog raphy(RP-HPLC w as m i p roved 1Bas i c o range2w as extrac t ed b y m e t hano l from ye ll ow-fi n tuna andb ean -p roduc, t then p uri fi ed b y C l eane rt A l u m i na N SPE 1Sepa ra ti on and quan tifi c a ti on w as ach i e ved b y us i ng a XDB -C 18(5L m, 150mm 416m

5、m co l u m n 1And a b i na ry m ob i l e p has e o fm ethano l and 0102m o l/Lam m on i u m v w as used w it h the foll ow i ng g rad i ent e l u ti on 1A pho t o-d i o de a rray d etector w as used to d etect t he com pos i ti ons w i th 452n m as the d e t ec ti on w ave l eng t h 1The li nea r ra

6、nge of the p roposed m e thod w as 01006100L g /mL , and t he d etecti on lm i it w as 01005m g /L, and RSD w as 3106%, and t he recove ri es w e re 9012%9715%1Key w ords :bas i c o rang e2; reve rs ed phase h i g h p e rf o r m ance li qu i d ch rom atog rap hy ; g rad i ent e l u ti on ; f ood s t

7、uff s 中图分类号:TS20715 文献标识码:A 文章编号:1002-0306(2009 01-0304-03 碱性橙是一种偶氮类碱性染料, 俗名/王金黄0, 化学名为2, 4-二胺基偶氮苯, 分子式为C 12H 12N 4#HC , l 染料索引号为C 1I 1Basic O range2(11270, 主要用于纺织品、皮革制品及木制品的染色。根据美国卫生研究所(N I H 化学品健康与安全数据库资料表明:摄取、吸入以及皮肤接触该物质均会造成急性和慢性的中毒伤害, 有确凿的动物实验数据表明, 该2物质为致癌物。根据5中华人民共和国食品添加剂使用卫生标准6(GB2760 及5中华人民共和

8、国食品卫生法6的相关规定, 其为禁止用作食品添加剂的化学制品。由于碱性橙比其它水溶性染料如柠檬黄、日落黄等更易于在鲜海鱼和豆制品上染色且不易褪色, 因此一些不法商贩用碱性橙对黄鱼、豆皮、1腐竹等豆制品进行染色, 极大危害了消费者的身心健康。目前, 食品中碱性橙的提取及检测方法有高2, 34, 5效液相色谱法和液-质联用法等, 但存在回收率低、检测线性范围较窄、仪器价格昂贵等问题。本文对碱性橙的检测方法进行了改进, 利用固相萃取法提取黄鱼和豆制品中碱性橙, 开发了新的梯度洗脱高效液相色谱分析法, 取得了满意的效果。1 材料与方法111 材料与仪器甲醇、正己烷 色谱纯; 乙酸铵、磷酸等 优级纯;

9、碱性橙标准品 S i gm a 公司提供; 碱性橙标准溶液 准确称取11000g 碱性橙标准品, 用甲醇溶解定容到100mL, 配制成11000mg /mL的标准储备液, 准确移取该溶液适量, 用体积浓度为80%甲醇水溶液稀释为浓度合适的标准溶液。Ag ilent 1100四元梯度高效液相色谱仪 配二极管阵列检测器(DAD 、在线脱气机及柱温箱; TU-1901紫外可见分光光度计, CG J B 型均质机, HGC -36氮吹仪, C leanert A lu m i na N 固相萃取柱(3mL ,收稿日期:2008-04-08作者简介:夏立娅(1978-, 女, 讲师, 硕士, 研究方向:

10、食品分析与食品安全。基金项目:/十一五0科技支撑项目(2006BAK02A 17; 河北省地方标准项目(200585 。3042009年第01分析检测Vol . 30, N o . 01, 2009 200mg , SBS 5200 超声清洗器, 旋涡振荡器。食品工业科技112 色谱条件色谱柱为XDB-C 18(5L m, 150mm 416mm , 流速110mL /mi n , 检测波长452n m, 参比波长650n m, 柱温30e , 进样量20L L 。流动相为甲醇(A 和0102m ol /L乙酸铵溶液(B , 梯度洗脱:08m i n , 50%A y 75%A 。113 样品

11、处理方法将黄鱼去骨、去内脏后, 粉碎均质, 豆制品直接破碎均质。称取510g 均质后样品, 加入10mL 甲醇, 快速分散摇匀, 超声提取30m i n 后, 以10000r/mi n 离心10m i n , 分离上层清液。残渣用少量甲醇提取多次, 直至残渣无色。合并所有提取液, 40e 氮吹仪上吹干后, 加入1mL 正己烷溶解。中性氧化铝SPE 小柱分别用2m L 甲醇和正己烷预洗后上样, 视样品中油类杂质的多少用510mL 正己烷淋洗, 至洗脱液无色, 用2mL 体积浓度为80%的甲醇淋脱, 收集淋洗液定容至5mL , 经0122L m 滤膜过滤后, 进高效液相色谱仪进行测定。100L g

12、 /mL范围内, 峰面积与碱性橙含量呈良好的线性关系, 线性回归方程为:y =881622x +213571, 线性相关因子为019999。根据I UPAC 规定, 对空白样品进行10次测定, 以背景噪声标准偏差3倍所相当的含量值为检出限量, 得出最低检出浓度为01005m g /L。2 结果与讨论211 检测波长的确定图1为碱性橙溶液在190700n m 波长范围内的光谱吸收曲线, 可见, 碱性橙的最大吸收波长为452n m 。因此选择检测器的检测波长为452n m, 参比波长650n m 。214 精密度和加标回收率按照相同方法对同一样品测定6次(结果见表1, 结果表明, 该方法的相对标准

13、偏差为3106%。表1 精密度实验结果(n=6 实验次数123456测量结果116651162411742117561165711673(L g /mL 平均值116862(L g /mL R S D (% 3106对小黄鱼和豆制品中的碱性橙含量测定进行了图1 碱性橙紫外可见光区吸收曲线212 流动相的确定分别对体积分数为0103%磷酸溶液 甲醇体系和0102m o l/L乙酸铵溶液 甲醇体系进行了实验, 结果表明, 两者的分离效果相近, 但0103%磷酸溶液 甲醇体系的p H 约为210, 需要采用耐酸碱的C 18柱, 因此选择0102m ol /L乙酸铵 甲醇体系作为流动相。对于流动相中0

14、102m o l/L乙酸铵和甲醇的比例进行了反复实验, 考察了流动相组成对保留时间的影响。随甲醇比例的增高, 保留时间缩短, 同时柱效提高; 但甲醇比例太高, 容量因子降低, 因此考虑采用洗脱程序。梯度变化大则使柱效提高, 但峰形的对称因子降低; 梯度变化小则使保留时间延长, 柱效降低。综合考虑后, 最佳的梯度洗脱程序为:08m in , 甲醇比例由50%增加到75%。图2为标准品及样品中碱性橙色谱图。加标回收率实验, 结果(见表2 表明, 该方法的回收率较为满意。表2 加标回收率测定结果(n=3 样品黄鱼加标量(L g /mL 110000180001700110000180001700测定

15、结果(L g /mL 019750175401670019110172701632回收率(% 971509412595123911109018890125豆皮215 干扰性实验实验证明, 黄鱼及豆制品的本底颜色对于碱性橙测定无干扰。对常用的合成色素日落黄和柠檬黄进行了实验, 结果表明, 日落黄和柠檬黄的存在对于碱性橙的测定无影响。213 线性关系与最低检出量配制浓度为01001100L g /mL的样品溶液, 在选定色谱条件下分析检测, 测定其吸收峰面积, 并以峰面积对浓度作图。结果表明, 在浓度为010063 结论与已报道的检测方法相比较, 本文建立的固相萃取提取方法适用于黄鱼和豆制品, 线

16、性范围跨越4个数量级, 极大地扩展了检测范围。同时SPE 方法01期 305食品工业科技Science and T echnology of F ood Industry 分析检测旋光法测定莲子淀粉含量的研究陶锦鸿, 郑铁松(南京师范大学食品科学与营养系, 江苏南京210097摘 要:用酸水解-DNS 法测定莲子粗淀粉及莲子粉中的淀粉含量, 操作繁琐, 重现性较差。利用淀粉具有旋光性的特点, 用制得的莲子淀粉纯品来求其比旋光度, 结果表明, 1%盐酸旋光法同样适用于莲子淀粉的测定, 而且方法操作简便, 准确度高。关键词:莲子, 淀粉, 旋光法, 比旋光度*Study on m easuri n

17、g starch content of lotus seed w ith pol arim etryTAO Ji n -hong , ZHENG Tie -song*(Depart m ent of Food Sci ence and Nu trition , N an ji ng Nor m al Universit y , Nanji ng 210097, Ch i naAbstrac:t HC lHyd ro l ys i s -DNS m ethod w as used t o de t e r m i n e t he s t a rch con t en t o f l o t u

18、s seed c rude s t a rches and l t us seed p ow de r o , bu t th i s m ethod w as no t easy to ope ra t e and had a bad p rope rty o f reapp ea rance 1Thecha r ac t e ri s ti c that s tarch w as op ti ca ll y acti ve w as ad op t ed t o requ ire spec ifi c ro t a ti o ns us i ng pu rifi ed s t a rche

19、s m ad e from l otus seeds, and it cam e to the conc l us i on that 1%HC lp o l a rm i e try w as su it ab l e t o m easu re t he s t a rch con t ent o f l o tus seed c rude s ta rches and l o t us seed p ow d er 1Th i s m e t hod no t on l y ope ra t es eas il y bu t con tri bu t es to h i g h accu

20、racy 1Key w ords :l o t us s eed; s ta rch ; po l arm i e try ; spec ifi c rota ti on中图分类号:TS20112 文献标识码:A 文章编号:1002-0306(2009 01-0306-03 莲子(Se m en nelu m b i n is 是我国重要的特产优质食品资源, 不仅具有很好的食用价值, 还有很强的药1用功能。莲子营养丰富, 其中淀粉含量在45%49%之间, 是莲子最重要的品质指标。为了提高材料筛选的可比性和可靠性, 确定一种快速准确、简便经济的标准方法实有必要。目前淀粉的测定方法主23, 45酶解法、碘显色法、H PLC 和旋要有:酸解法、可靠性、方便性和经济光法。陆国权6从测定速度、实用性等角度, 对现有各种淀粉测定方法进行了评价和筛选, 确定盐酸水解-旋光法、盐酸水解-DNS 法和高氯酸-蒽酮比色法为甘薯淀粉测定的适宜方法。国外的研究则认为酶解淀粉结合蒽酮比色法是比较7费时。旋理想的方法, 这些方法均操作步骤繁琐、光法所需试剂少、操作简单、经济迅速。本文参考陆收稿日期:2008-05-06 *通讯联系人作者简介:陶锦鸿(1982-, 女, 硕士, 主要从事食品生化与生物技术研究。基金项目:江苏省高校自然科学基础研究项目(07KJ D550115 。国权8测定甘薯淀粉含