参黄颈康片镇痛抗炎作用及对炎症因子影响研究

1、参黄颈康片镇痛抗炎作用及对炎症因子影响研究刘新宇 1, 刘春娜 2*, 张晓妍 1, 杨 菁 2(1辽宁医学院附属第一医院 , 辽宁 锦州 121001; 2辽宁医学院药理学教研室 , 辽宁 锦州 121001收稿日期 :2010-10-16基金项目 :辽宁省教育厅创新团队项目 (LT2010065 ; 辽宁省自然科学基金项目 (20102139作者简介 :刘新宇 (1976 , 男 , 主治医师 , 硕士学位 , 研究方向 :药理学及新药开发 。 Tel :(0416 4197208*通信作者 :刘春娜 (1977 , 女 , 副教授 , 博士学位 , 主要从事中药药理工作 。 E-mail

2、 :springnanatomcom 摘要 :目的 该实验通过观察受试抗颈椎病药物 (参黄颈康片 对抗炎 、 消肿 、 镇痛的药效学作用 , 探讨参黄颈康片的药理作用及相关机制 。 方法该实验采用小鼠耳廓肿胀模型 、 大鼠肉芽肿模型 、 大鼠足跖肿胀动物模型 , 观察给予不同剂量参黄颈康片 (小鼠为 600、 1200、 2400mg /kg; 大鼠为 500、 1000、 2000mg /kg 的抗炎 、 消肿的药理作用 , 另外选择物理 及化学法 , 进一步研究参黄颈康片的镇痛作用 , 同时应用大鼠肉芽肿模型 , 测定血清中白介素 -6(IL-1 及肿瘤坏死因子 -(TNF- 的水平 。

3、结果参黄颈康片能明显降低小鼠耳廓肿胀的肿胀率 、 大鼠肉芽肿的质量 、 足跖肿胀程度 , 能提高小鼠痛阈值及降低其扭体反射 , 并能降低大鼠肉芽肿模型中炎症介质的表达 。 结论 参黄颈康片通过抑制炎症介质表达有较好的抗炎 、镇痛作用 。 关键词 :肿瘤坏死因子 -; 白介素 -1; 足跖肿胀 ; 肉芽肿 中图分类号 :R2855文献标志码 :B文章编号 :1001-1528(2011 07-1223-03颈椎病是中老年常见的多发病 , 该病有着椎间盘变性 、 髓核突出病变的个体 , 特别是髓核对机体组织的致炎反应现 象 。 椎间盘周围组织水肿 , 纤维蛋白沉积 , 大量的炎性细胞 浸润 ,单核

4、细胞趋化蛋白 、 巨噬细胞炎性蛋白等化学激动因 子存在过度表达现象 , 导致了在椎间盘局部形成了炎症 、 增 生及肿胀1-3。 而颈椎病的治疗目前没有较好疗效的药物 。参黄颈康片是由丹参 、 黄芪 、 白术 、 姜黄 、 当归 、 煅牡蛎等中药 组成的复方制剂 , 拟用于治疗颈椎病 。 为进一步阐明其疗 效 , 本实验主要观察给予不同剂量参黄颈康片对小鼠耳廓肿 胀模型 、 大鼠肉芽肿模型 、 大鼠足跖肿胀动物模型的影响 , 观 察其抗炎 、镇痛的药理作用 , 并对其机制进一步研究 , 为临床 治疗颈椎病提供可靠的理论依据 4-5。1材料 11动物取昆 明 种 小 白 鼠 160只 , 体 质

5、量 18 22g 。Sprague-Dawley 大鼠 120只 , 体质量 180 220g 。 动物合格 证号 :SCXK (辽 2003-0007。 12试验药品参黄颈康片 (辽宁医学院新药研究所自制 ,为棕黄色粉末 ,035g /片 , 1g 相当于应用生药 1429g ; 阳 性对照药品 :阿司匹林 (湖南新汇制药有限公司提供 。 2方法21实验动物分组实验随机分为 6组 , 组为空白对照组 ; 组为模型组 ; 组至 组分别为低 、 中 、 高剂量参黄颈 康片组 (小鼠为 600、1200、 2400mg /kg; 大鼠为 500、 1000、 2000mg /kg ; 组为阳性药物

6、对照组 , 灌胃给予阿司匹林 (100mg /kg 。 22测定项目221参黄颈康片对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响取健康小鼠 60只 , 每日灌胃给药 1次 , 灌胃体积为 01mL /10g , 连续给药 3d , 空白对照组灌胃等体积的生理盐水 。 末次 给药后 15h 将 30L 二甲苯涂于小鼠右耳廓前后两面致 炎 (除空白对照组 ,左耳廓作为自身对照 。 致炎后 30min 将各组试验小鼠处死 , 用直径 9mm 打孔器在相同的部位取 下左 、 右耳片 , 称定质量 , 计算左 、 右耳片质量差为肿胀度或 抑制率 (% 。 222参黄颈康片对大鼠足跖肿胀的影响取健康雄性大鼠 60只 ,

7、 按 21项进行分组 。 每日灌胃给药 1次 , 体积 05mL , 连续给药 3d , 空白对照组灌胃等体积的生理盐水 。 末 次给药 1h 后 ,各组试验动物 (除空白对照组 右踝关节皮下 注射 10%鸡蛋清 01mL , 致炎 , 分别用软皮尺测量踝关节周 长 , 以给药前 、 致炎后 1h 、2h 、 3h 踝关节周长差值作为肿胀 度 。 223参黄颈康片对大鼠棉球肉芽肿及炎症介质的影响取雄性大鼠 60只 , 除空白对照组实验动物外 , 其余 50只大 鼠用乙醚浅麻醉 , 无菌条件下 , 下腹正中切口 , 各鼠右侧腹股 沟皮下各置入一无菌棉球 (30mg 。 术后随机按 21项进行 分

8、组 。 于手术当天开始灌胃 ,连续 7d , 灌胃体积 05mL , 肉 芽肿模型组给等体积生理盐水 , 第 8天处死动物 , 解剖并剥离棉球 , 60 烘烤 12h 称定质量 , 计算肉芽质量 (肉芽质量 =带肉芽组织的棉球质量 棉球原始质量 。 实验结束后 , 上述实验动物 , 颈动脉取血 2mL , 3000r /min, 离心 5min , 取 上清 , 用 ELISA 法测定血清白介素 -1(IL-1 及肿瘤坏死因 子 -(TNF- 。 224用热板法观察参黄颈康片的镇痛作用采用 Woolf氏热板法 。 于电热恒温水浴箱温度保持在 (55 05 的3221范围 。 将筛选后的小白鼠

9、50只称定质量 , 按 21项分组 , 测 每只小鼠的痛阈值一次 , 作为该鼠给药前的痛阈值 。 各组试 验小鼠给药前及给药后 30min 各测定小白鼠痛阈值一次 。 痛阈提高百分率 =(用药后痛阈值 用药前痛阈值 /用药 前痛阈值 %225用扭体法观察抗颈椎病药物参黄颈康片的镇痛作用 取 50只小鼠称定质量后 , 按上述分组情况 , 灌胃给予不同 受试药物 30min 后 , 腹腔注射 06%的醋酸 02mL /只 , 记录 15min 内各组 “ 扭体 ” 反应阳性的动物数 , 及 15min 内出现 “ 扭体反应 ” 的次数 。23数据统计 所有数据均以均数 标准差 ( s 表示 。 两

10、组平均值比较用非配对 t 检验 。 率的比较用四格表概率 法 。 P 005为有显著性差异 , P 001为差异极显著 。 3结果31参黄颈康片抗炎 、 消肿作用结果 实验结果见表 1, 2。 表明应用不同剂量参黄颈康片 , 能明显降低小耳廓肿胀度 、 减轻大鼠足跖肿胀 , 降低大鼠棉球肉芽肿质量 , 与模型组相 比具有显著性差异 (P 005 , 提示参黄颈康片有一定抗 炎 、 消肿作用 。不同剂量参黄颈康片受试药物组与空白对照组相比 , 试 验动物 15min 内出现扭体反射的次数明显减小 , 具有显著 性差异 (P 005 。 另外 , 参黄颈康片能明显提高小鼠痛阈 值 , 结果表明 ,

11、 参黄颈康片对化学法及物理法所致的疼痛有 较明显的镇痛作用 (见表 1 。表 1小鼠耳廓肿胀实验结果 ( s , n =10组别 耳廓肿胀率/%肉芽肿质量/mg痛阈提高百分率/%扭体反射 /(次 /15min 空白对照组 387 254*00040模型组 11491 19384643 6291291 4633960 603低剂量组 8967 2154*3514 567*1728 557*2190 591*中剂量组 5563 1379*2628 769*2856 402*1850 493*高剂量组 5315 1050*2853 884*3760 481*1631 576*阳性对照组 5741 9

12、27*3068 611*2601 525*2082 485*注 :与模型组比较 , *P 005, *P 001。表 2大鼠足跖肿胀实验结果 ( s , n =10组别 0h /cm1h /cm2h /cm3h /cm空白对照组 213 021210 017*215 022*209 024*足跖肿胀模型组 216 017593 072504 081440 115低剂量组 211 023486 096*415 108*335 021*中剂量组 210 019441 069*361 053*317 044*高剂量组 211 018444 055*353 061*297 075*阳性对照组 209

13、021421 032*386 057*308 041*注 :与足跖肿胀模型组比较 , *P 005, *P 001。32参黄颈康片对炎症介质影响实验结果 见表 3。 大鼠 肉芽肿模型组实验动物血清中 IL-1及 TNF-明显升高 , 而 应用不同剂量参黄颈康片 , 上述实验结果显著下降 , 与模型 组相比 , 具有显著性差异 (P 005 。 上述实验结果提示 , 参 黄颈康片能明显降低血清中炎症介质 IL-1及 TNF-的水 平 。表 3参黄颈康片对炎症介质影响实验结果 ( s , n =10组别 IL-1/(ng /mL TNF-/(ng /mL 空白对照组 3174 0474*2179

14、0643*模型组 4607 06683973 0739低剂量组 3932 0623*2978 0696*中剂量组 3435 0608*2602 0515*高剂量组 3331 0512*2572 0463*阳性对照组 4042 0489*3133 0691*与足跖肿胀模型组比较 , *P 005, *P 001。4讨论颈椎病时 , 大量促进炎症介质释放的细胞因子表达升 高 , 保护性细胞因子表达降低 , 炎症介质大量释放 , 凋亡相关 蛋白表达异常 , 导致椎间盘不断退变 , 进而导致颈椎病的病 程发展 6。 本实验受试药品 参黄颈康片是中药复方制 剂 , 临床拟用于治疗颈椎病 。 其中 , 丹

15、参 、 黄芪能有效地改善 微循环 , 纠正椎基底动脉供血不足 , 抗脂质氧化等作用 ; 白 术 、 姜黄具有抑菌 、 抗炎 、 镇痛 、 抑制血小板聚集及血栓形成 、 改善血液流变学 、 增加脑血流量作用 ; 牡蛎有增强免疫力等 多种 功 效 。 这 些 药 物 对 于 颈 椎 病 的 治 疗 均 有 较 好 的 疗 效 7-9。本实验结果显示 , 参黄颈康片对二甲苯所致小鼠耳廓肿 胀 、 大鼠足肿胀及大鼠棉球肉芽肿 3种急 、 慢性试验性炎症 均有非常显著的抑制作用 。 另外 , 实验结果也表明 , 参黄颈 康片可显著减少醋酸所致小鼠扭体次数 、 增高痛阈值 , 有非 常显著的抗炎 、 消肿

16、 、 镇痛作用 。 可使颈椎病人的疼痛症状 缓解 , 从而使紧张或痉挛的肌肉松弛 , 以减轻肌肉对局部病 灶处的牵拉 , 有利于局部损伤病灶的修复 10-12。另外 , 实验中发现 , 应用不同剂量参黄颈康片能明显降 低炎症介质 IL-1及 TNF-。 提示参黄颈康片可能通过减少 炎症介质等产生 , 在颈椎病中发挥治疗及保护作用 。综上所述 , 参黄颈康片主要通过其抗炎 、 镇痛 、 活血化瘀4221作用 , 来改善颈椎病人的多种症状 , 实验结果与该药消肿止 痛 、 活血通络的功能亦相吻合 , 为该药在临床上治疗颈椎病 症提供了一定的理论依据 。 参考文献 :1丁文清 , 江怡珊 , 乔薇

17、颈痛灵胶囊对化学 、 物理方法致痛小鼠的镇 痛 作 用 实 验 观 察 J 上 海 中 医 药 杂 志 , 2003, 37(12 :37-382解砚英 , 牟艳玲 , 朱燕 , 等 颈舒胶囊抗炎镇痛作用的实验研究 J 中国新药杂志 ,2005, 14(10 :1169-11723曾万玲 , 隋艳华 , 董学新 , 等 颈椎温通胶囊对颈神经根炎大鼠体感诱发电位 、 行为学及病理学影响的研究 J 中成药 , 2009, 31(12 :1820-18214赵传喜 , 吴淮 , 刘欣 , 等 丹参川芎嗪注射液治疗椎动脉型颈椎病的临床研究 J 河南中医学院学报 , 2009, 24(7 :48-495

18、张爱平 , 许书亮 , 陈弘修 , 等 颈痛宁主要药效学试验研究J 福建中医学院学报 , 2001, 11(3 :21-226刘新宇 , 刘春娜 , 武红梅 , 等 参黄颈康片对颈椎病的防治作用及机制研究 J 中成药 , 2010, 32(4 :554-5577周红海 , 韦坚 , 陈耀宇 益气化瘀补肾法对颈椎病模型动物椎间盘炎症介质的影响 J 广西中医学院学报 , 2003, 6(1 :6-88吴茂文 中药治疗颈椎病的临床概况 J 天津药学 , 2002, 14(6 :22-239邵文全 加味瓜蒌桂枝汤治疗颈椎病实验观察 J 时珍国医国药 ,2007, 18(6 :1347-134810陈宏

19、贤 , 赵新梅 李俊岐 灯盏细辛注射液治疗椎动脉型颈椎病 29例 J 广东医学 , 2008, 29(2 :325-32611邹燕燕 颈痛汤合 -七叶皂甙钠治疗神经根型颈椎病 40例疗效观察 J 河北中医 , 2009, 31(8 :1181-118212李宁 , 谢兴文 脊髓型颈椎病动物模型及其功能测定研究 进展 J 中国中医骨伤科杂志 , 2007, 15(2 :71-72紫檀芪对脑缺血 /再灌注损伤大鼠血液流变学指标的影响胡向阳 1, 舒晓春 1*, 马 义 2(1中山大学附属第五医院 , 广东 珠海 519000; 2暨南大学生命科学院 , 广东 广州 510632收稿日期 :2010

20、-12-13基金项目 :广东省中医药管理局科研基金 (A2010104作者简介 :胡向阳 (1975 , 男 , 博士 , 主治医师 , 从事脑血管及神经系统疾病研究 。 Tel :(0756 2528851, E-mail :aikongzhi163com *通信作者 :舒晓春 (1965 , 男 , 副教授 , 从事中西医结合内分泌及代谢疾病的研究 。 Tel :(0756 2528622,E-mail :zhshuxc163com 摘要 :目的 观察紫檀芪对脑缺血 /再灌注损伤大鼠血液流变学指标的影响 。 方法 采用大鼠大脑中动脉线栓法制备脑缺血 /再灌注模型 , 将 36只 SD 雄性

21、大鼠随机分为 4组 :假手术组 、 缺血 /再灌注组 、 紫檀芪低剂量组 、 紫檀芪高剂量 。 检 测各组大鼠血液流变学指标的变化 。 结果 紫檀芪能降低脑缺血 /再灌注损伤大鼠全血黏度 、 血浆黏度 、 红细胞压积 , 提高红细胞的应激能力 。 结论 紫檀芪对脑缺血 /再灌注血液流变学变化具有改善作用 。 关键词 :紫檀芪 ; 脑缺血 /再灌注损伤 ; 血液流变学中图分类号 :R2855文献标志码 :B文章编号 :1001-1528(2011 07-1225-03脑缺血 /再灌注损伤 (ischemia reperfusion injury , IRI 的 发生依赖于血管病变 、 血液成分和血液流变三个因素 , 是一 个系列的级联反应 ,包括能量障碍 、 炎性