酸水解法测定午餐肉中脂肪含量的微型实验研究

1、酸水解法测定午餐肉中脂肪含量的微型实验研究彭爱红，陈艳红，邓清莲（集美大学生物工程学院，福建厦门361021）摘要对“”中第二法酸水解法测定午餐肉脂肪含量方法进行了微型化设计和改进。实验结果表明，改进后的微型化实验方法不仅简便、省时，节约了大量的化学药品，减少乙醚的排放，提高了实验室的安全系数，而且微型实验结果令人满意。关键词微型实验；酸水解法；午餐肉；脂肪中图分类号O6-3文献标识码A文章编号1008-5149（2009）04-0126-021前言微型化学实验是近二十年来适应绿色化学要求而发展起来的一种化学实验新技术，因其具有节约试剂、环境污染少、现象明显、快速、安全等优点，日益受到国内外化

2、学界的重视，微型化学实验设计也得以迅速发展1。午餐肉中脂肪含量的测定可采用“”中第二法酸水解法2，但是该法操作麻烦，费时繁琐，人为因素影响较大，而且所用有机试剂乙醚直接排放于空气中，不仅污染环境也对实验室造成较大的安全隐患。笔者对“”中第二法酸水解法测定午餐肉脂肪含量方法进行了微型实验设计，改进了实验操作，并与标准方法比较，结果表明改进后的微型化实验方法不仅简便、省时，节约了大量的化学药品，减少乙醚的排放提高了实验室的安全系数，而且微型实验结果令人满意。2实验原理利用强酸在加热条件下将试样成分水解后，使结合或包裹在组织内的脂肪游离出来，再用乙醚提取，回收除去溶剂并干燥后，称量提取物质量即得游离

3、及结合脂肪总量。3实验部分午餐肉罐头（厦门古龙罐头厂）；盐酸；95乙醇；乙醚；石油醚(30一60沸程)；100 mL具塞刻度量筒、恒温水浴50一80；50 mL试管；10 mL量筒；玻璃棒；移液管或刻度吸管；10mL具塞玻璃比色管，XW-80A旋涡混合器（上海青浦沪西仪器厂）。（1）样品处理：精确称取午餐肉约200g，置于50 mL大试管内，加8 mL蒸馏水，混匀后再加10 mL盐酸。（2）酸水解：将试管放入7080水浴中，每隔5l0 min用玻棒搅拌一次，至样品消化完全为止，约4050 min。（3）脂肪提取：取出试管，加入l0 mL乙醇，混合。冷却后将混合物移入100 mL具塞量筒中，以2

4、0 mL乙醚分次洗试管，一并倒入量筒中，待乙醚全部倒入量筒后，加塞振摇1 min，小心开塞，放出气体，再塞好，静置12 min，小心开塞，并用石油醚乙醚等量混合液（约10 mL）冲洗塞及筒口附着的脂肪。静置1020 min，待上部液体清晰，吸出上清液于已恒重的锥形瓶内，再加5 mL乙醚于具塞量筒内，振摇，静置后，仍将上层乙醚吸出，放入原锥形瓶内，将锥形瓶置于水浴上蒸干，置95105烘箱中干燥2h，取出，放干燥器内冷却0.5 h后称重。并重复以上操作至恒重。（1）样品处理：精确称取午餐肉约0.2-0.5g，置于10 mL具塞玻璃比色管内，加0.8 mL蒸馏水，混匀后再加10 mL盐酸。（2）酸水

5、解：将比色管放入7080水浴中，至样品消化完全为止，约2030 min。（3）脂肪提取：取出比色管，加入l.0 mL乙醇，充分混匀，冷却后加入2.0mL乙醚，加塞快速振摇0.5min，小心开塞，放出气体，再加入1.0 mL石油醚，快速混匀，待上层液澄清（约1-2 min）后，用尖嘴吸液管将醚层溶液吸至已恒重烧杯中，如此，用乙醚及石油醚提取三次，合并提取液。水浴挥发乙醚后，将烧杯放入100±5烘箱中干燥1h，取出，置于干燥器中30min，称重。并重复以上操作至恒重。4结果与讨论用标准方法与微型改进法对午餐肉中脂肪含量进行测定，结果见表1。经过F检验和t检验，两种方法无显著性差异（P0.

6、05），且本法的精密度比标准方法更好。4.2.1微型改进法直接称样于10 mL具塞比色管内，免去了将水解液由大试管移入具塞量筒的操作，既减少了工作量，又减小了系统误差。4.2.2微型改进法使用旋涡混合器代替手工振摇，不仅提取脂肪完全，而且操作更易规范。4.2.3微型改进法节约了试剂，有效降低了实验成本。在微型改进法中盐酸和乙醇用量减少了1/10，乙醚用量由原来的35mL减少为9 mL。4.2.4微型改进法节省了时间，实验现象更为明显。样品消化时间由原来的4050 min缩短为2030 min，而且样品消化非常完全；在用乙醚提取脂肪时，加入石油醚后即可快速清晰分层，静置时间由原来的22-32 min缩短为3-6 min，提高了实验效率。4.2.5微型改进法减少环境污染，提高了实验室的安全性。标准方法采用水浴加热挥去全部乙醚，既浪费试剂污染环境又有较大的危险性，实验室安全系数低；改进法由于醚层体积减少了近1/4，因而大大减少了乙醚对环境污染又提高了实验室的安全系数，更符