药物分析第二章药物的鉴别试验

1、121. 取样取样2. 鉴别鉴别3. 检查检查4. 含量测定含量测定5. 检验报告检验报告工工 作作 程程 序序 药品检验工作的基本内容药品检验工作的基本内容3鉴鉴 别别 是根据药物的是根据药物的分子结构分子结构、理理化性质化性质，采用化学、物理化，采用化学、物理化学或生物学方法来学或生物学方法来判断药物判断药物的真伪的真伪. .鉴别方法要求鉴别方法要求: 专属性强、专属性强、 再现性好、灵敏度高、简便快再现性好、灵敏度高、简便快速速4鉴鉴 别别 中国药典中国药典鉴别项下规定的试验方法鉴别项下规定的试验方法, ,仅反仅反应药品某些物理、化学或生物学应药品某些物理、化学或生物学等性质的等性质的特

2、征特征，不完全不完全代表对该代表对该药品药品化学结构化学结构的的确认确认51. 已知物的确证试验,不是鉴定未知物的组成和结构，仅用于证实贮藏在有标签容器中的药物是否为其所贮藏在有标签容器中的药物是否为其所标示的药物标示的药物，而非对未知物的鉴别。 2.鉴别试验是个别分析不是系统分析(采用灵敏度高专属性强的方法,试验项目少)3.选用药物的化学鉴别反应,光谱特征,色谱行为,物理常数等不同方法鉴别同一个供试品4.鉴别制剂注意消除辅料的干扰6 鉴别试验鉴别试验 鉴别试验项目鉴别试验项目 鉴别方法鉴别方法 鉴别试验条件鉴别试验条件鉴鉴 别别7鉴别实验项目鉴别实验项目鉴鉴 别别（一）性状（一）性状（二）一

3、般鉴别试验（二）一般鉴别试验（三）专属鉴别试验（三）专属鉴别试验8性状性状包括颜色、臭味等应有包括颜色、臭味等应有的的外观外观以及以及溶解度溶解度和和物理常数物理常数. . 是质量重要表征之一是质量重要表征之一, ,在一在一定程度上反映药品的纯度及疗效定程度上反映药品的纯度及疗效. .9 1外观 指药物外表感观和色泽，包括聚集状态、晶型、色泽以及臭味等性质。 如如中国药典中国药典对二巯基丁二钠的描述为对二巯基丁二钠的描述为“本品为本品为白色至微黄色的粉末；有类似蒜的特臭白色至微黄色的粉末；有类似蒜的特臭”。 2溶解度 溶解度是药物的一种物理性质，在一定程度上反映了药品的纯度。 如磺胺嘧啶如磺胺

4、嘧啶“在乙醇或丙酮中微溶，在水中几乎在乙醇或丙酮中微溶，在水中几乎不溶；在氢氧化钠试液中易溶，在稀盐酸中溶解不溶；在氢氧化钠试液中易溶，在稀盐酸中溶解”。 鉴别实验项目鉴别实验项目10溶剂体积(1g/ml)极易溶解10000溶解度尼莫地平 在丙酮、三氯甲烷或乙酸乙酯中易溶，在乙醇中溶在丙酮、三氯甲烷或乙酸乙酯中易溶，在乙醇中溶解，在乙醚中微溶，在水中几乎不溶。解，在乙醚中微溶，在水中几乎不溶。中国药典中国药典11 3 3物理常数物理常数 物理常数：评价药品质量的重要指标物理常数：评价药品质量的重要指标 药物鉴别药物鉴别，药品的，药品的纯杂程度。纯杂程度。 中国药典中国药典收载的物理常数包括：收

5、载的物理常数包括： 相对密度、馏程、熔点、凝点、比旋度、折光相对密度、馏程、熔点、凝点、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值、吸收率、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值、吸收系数。系数。 。鉴别实验项目鉴别实验项目12 (1) 熔点熔点： 由固体熔化成液体的温度由固体熔化成液体的温度 熔融同时分解的温度熔融同时分解的温度 在熔化时在熔化时初熔初熔至至全熔全熔的一段温度的一段温度。 （2）比旋度比旋度： 在一定波长与温度下，偏振光透过长在一定波长与温度下，偏振光透过长1dm1dm且每且每1ml1ml中含中含有旋光性物质有旋光性物质1g1g的溶液时测得的旋光度称为比旋度。的溶液时测得的旋光度

6、称为比旋度。 反映手性药物特性及其纯度的主要指标反映手性药物特性及其纯度的主要指标 用途：鉴别药品用途：鉴别药品 纯度检查纯度检查 含量测定含量测定鉴别实验项目鉴别实验项目13 例1: 溴化新斯的明项下所述：“本品的熔点为171176，熔融时同时分解”。 例2： 如维生素C的比旋度测定：“取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释使成每1ml中约含0.10g的溶液，依法测定，比旋度为+20.5至+21.5”。 14 （3）吸收系数吸收系数： 在给定的波长、溶剂和温度等条件下，吸光物在给定的波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度称为吸质在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度称

7、为吸收系数收系数。 表示方法表示方法：摩尔吸收系数：摩尔吸收系数 百分吸收系数百分吸收系数 用用 途：途： 检查纯度检查纯度 测定制剂含量测定制剂含量鉴别实验项目鉴别实验项目%1cm1E15 依据某一类药物的依据某一类药物的化学结构化学结构或或理化理化性质性质的特征，通过化学反应来鉴别药的特征，通过化学反应来鉴别药物的真伪物的真伪鉴别实验项目鉴别实验项目一般鉴别试验一般鉴别试验16无机药物无机药物: : 根据阴、阳离子根据阴、阳离子（钠盐、钙盐、（钠盐、钙盐、硫酸盐、氯化物）硫酸盐、氯化物）的特殊反应的特殊反应, ,并以药典附并以药典附录项下的一般鉴别试验为依据；录项下的一般鉴别试验为依据；有

8、机药物有机药物: : 多采用典型的官能团反应多采用典型的官能团反应（芳香第一胺、水杨酸盐）芳香第一胺、水杨酸盐）. .鉴别实验项目鉴别实验项目一般一般鉴别试验鉴别试验17只能证实是某一类药物，而不能证实是哪一种药物。例如:钠盐的焰色试验,不能辨认是氯化钠、苯钾酸钠或者是其它某一种钠盐药物.只适用于确认单一单一的化学药物，对多种药物的混合物或有干扰物存在时，不适用。 鉴别实验项目鉴别实验项目一般一般鉴别试验鉴别试验18无机酸盐无机酸盐有机酸盐有机酸盐无机金属盐类无机金属盐类有机氟化物类有机氟化物类芳香第一胺类芳香第一胺类托烷生物碱类托烷生物碱类丙二酰脲类丙二酰脲类中中 国国 药药 典典191.有

9、机氟化物有机氟化物无机氟化物无机氟化物 茜素氟蓝茜素氟蓝 硝酸亚铈硝酸亚铈pH 4.3蓝紫色蓝紫色络合物络合物20 1 有机氟化物有机氟化物 （地塞米松、依诺沙星、氧氟沙星、醋酸曲安奈德、醋酸氟轻松、醋地塞米松、依诺沙星、氧氟沙星、醋酸曲安奈德、醋酸氟轻松、醋酸氟轻可的松酸氟轻可的松） 取供试品约取供试品约7mg7mg，照氧瓶燃烧法进行有，照氧瓶燃烧法进行有机破坏，用水机破坏，用水20ml20ml与与0.01mol/L0.01mol/L氢氧化钠溶氢氧化钠溶液液6.5ml6.5ml为吸收液，待燃烧完全后，充分振为吸收液，待燃烧完全后，充分振 摇，取吸收液摇，取吸收液2ml2ml，加茜素氟蓝试液，

10、加茜素氟蓝试液 0.5ml0.5ml，再加再加12%12%醋酸钠的稀醋酸溶液醋酸钠的稀醋酸溶液0.2 ml0.2 ml，用水，用水稀释至稀释至4ml4ml，加硝酸亚铈试液，加硝酸亚铈试液0.5ml0.5ml，即显，即显蓝紫色，同时做蓝紫色，同时做空白对照空白对照试验。试验。 一般鉴别实验鉴别方法鉴别方法21 2 2有机酸盐有机酸盐（1 1）水杨酸）水杨酸1 1）鉴别）鉴别方法一方法一：取供试品的稀溶液，加三：取供试品的稀溶液，加三氯化铁试液氯化铁试液1 1滴，即显紫堇色。滴，即显紫堇色。2 2）反应原理：本品在）反应原理：本品在中性中性或或弱酸弱酸性条件下，性条件下，与三氯化铁试液生成配位化合

11、物，在中与三氯化铁试液生成配位化合物，在中性时呈红色，弱酸性时呈紫色。性时呈红色，弱酸性时呈紫色。 一般鉴别实验222.水杨酸盐水杨酸盐鉴别方法二鉴别方法二FeCl3反应反应OHCOOH6+ FeCl312HClO-COO-2Fe3Fe+弱酸性中性加稀加稀HClHCl，即析出白色沉淀；分离，沉淀溶于，即析出白色沉淀；分离，沉淀溶于醋酸铵溶液。醋酸铵溶液。23（2 2）酒石酸盐酒石酸盐1）鉴别方法鉴别方法：取供试品的中性溶液，置取供试品的中性溶液，置洁净的试管中，加氨制硝酸银试液数滴，洁净的试管中，加氨制硝酸银试液数滴，置水浴中加热，银即游离并附在试管内置水浴中加热，银即游离并附在试管内壁成壁成

12、银镜。一般鉴别实验一般鉴别实验24 2 2） 反应原理：其反应式为：反应原理：其反应式为： HOCHCOOH + 2Ag(NH3)2OH HOCHCOOH HOCCOONH4 2Ag + + 2NH3 + 2H2O HOCCOONH425 3 芳香第一胺类（1）鉴别方法：取供试品约：取供试品约50mg50mg，加稀盐，加稀盐酸酸1ml1ml，必要时缓缓煮沸使溶，放冷，加，必要时缓缓煮沸使溶，放冷，加亚亚硝酸钠硝酸钠溶液（溶液（0.1mol/L0.1mol/L）数滴，滴加）数滴，滴加碱性碱性-萘酚萘酚试液数滴，视供试品不同，生成试液数滴，视供试品不同，生成橙黄色橙黄色到猩红色沉淀到猩红色沉淀。

13、（2）反应原理：重氮化-偶合反应一般鉴别实验26 中国药典2005版二部芳香第一胺反应鉴别的药物 对乙酰氨基酚 盐酸普鲁卡因 艾司唑仑 硝西泮 奥沙西泮 磺胺嘧啶27 4 4 托烷生物碱类托烷生物碱类 （硫酸阿托品、氢溴酸山莨菪碱、氢溴酸东莨菪碱）（硫酸阿托品、氢溴酸山莨菪碱、氢溴酸东莨菪碱） （1）鉴别方法：取供试品约）鉴别方法：取供试品约10mg10mg，加发烟硝，加发烟硝酸酸5 5滴，置水浴上蒸干，即得黄色的残渣，放滴，置水浴上蒸干，即得黄色的残渣，放冷，加乙醇冷，加乙醇2-32-3滴，加固体氢氧化钾一小颗，滴，加固体氢氧化钾一小颗，即显深紫色。即显深紫色。 （2 2）反应原理：托烷生物

14、碱类均具有莨）反应原理：托烷生物碱类均具有莨菪酸结构，有菪酸结构，有VitaliVitali反应，显反应，显紫色紫色。后马托品。后马托品具莨菪醇结构而不具莨菪酸结构，无此反应。具莨菪醇结构而不具莨菪酸结构，无此反应。一般鉴别实验28莨菪酸莨菪酸三硝基衍生物三硝基衍生物醌式化合物醌式化合物硝基化反应硝基化反应莨菪醇莨菪醇29 5 5无机金属盐无机金属盐（1 1）NaNa、K K、CaCa的焰色反应的焰色反应 1 1）鉴别方法：取铂丝，用盐酸湿润后，）鉴别方法：取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显各离子的特征颜色。即显各离子的特征颜色。 N

15、aNa+ + 鲜黄色鲜黄色 K K+ + 紫色紫色 CaCa2+2+ 砖红色砖红色一般鉴别实验302）测定原理：）测定原理： 火焰光谱的谱线不同火焰光谱的谱线不同Na 589.0nm、589.6nm，显黄色。K 766.49nm、769.90nm，由于人眼 在此波长附近敏感度较差，显紫色。Ca 622nm、554nm、442.67nm与 602nm， 622nm的谱线最强，砖红色。一般鉴别实验31 （2 2）铵盐）铵盐 鉴别方法：鉴别方法： 供试品供试品+NaOH NH3a.发生氨臭；发生氨臭；b.b.遇湿润的红色石蕊试纸遇湿润的红色石蕊试纸 蓝蓝c.c.硝酸亚汞硝酸亚汞试液湿润的滤纸试液湿润

16、的滤纸 黑黑一般鉴别实验32 6 6 无机酸根无机酸根 （1 1）氯化物）氯化物 鉴别一：鉴别一：硝酸银反应：硝酸银反应： Cl- + AgNO3 AgCl NH3H2O 沉淀溶解 +HNO3 沉淀生成 如供试品为生物碱或其他有机碱的盐酸盐，须如供试品为生物碱或其他有机碱的盐酸盐，须先加氨试液使成碱性，将析出的沉淀滤过除去，先加氨试液使成碱性，将析出的沉淀滤过除去，取滤液进行试验。取滤液进行试验。 一般鉴别实验33 鉴别二 取供试品少量，置试管中，加等量的二氧化锰取供试品少量，置试管中，加等量的二氧化锰, ,混匀混匀, ,加硫酸湿润加硫酸湿润, ,缓缓加热缓缓加热, ,即发生氯气即发生氯气.

17、. Cl2 + KI-淀粉试纸 蓝色一般鉴别实验一般鉴别实验34 （2）硫酸盐 鉴别一：鉴别一： SO42- + BaCl2 BaSO4 沉淀在 HCl或 HNO3中不溶解。 鉴别二：鉴别二： 取供试品溶液，加取供试品溶液，加醋酸铅醋酸铅试液，即生成白色沉试液，即生成白色沉淀；分离，沉淀在淀；分离，沉淀在醋酸铵醋酸铵试液或试液或氢氧化钠氢氧化钠试液试液中溶解中溶解。一般鉴别实验35 （3）硝酸盐 鉴别一：取供试品溶液，加等量硫酸，混合冷却沿壁管加FeSO4试液,使成两液层，界面显棕色 鉴别二： 取供试品溶液，加硫酸和铜丝，加热即生成红棕色蒸汽。一般鉴别实验36（三）专属鉴别试验（三）专属鉴别试

18、验 证实某一种药物的依据证实某一种药物的依据 它根据每一种药物化学结构的差异它根据每一种药物化学结构的差异及其引起的物理化学性质不同及其引起的物理化学性质不同, ,选用某选用某些些灵敏的定性灵敏的定性反应反应, ,来鉴别药物真伪来鉴别药物真伪. .鉴别实验项目鉴别实验项目37 一般鉴别试验一般鉴别试验, , 区别不同区别不同类别类别的药物。的药物。 专属鉴别试验专属鉴别试验，区别各个药物，区别各个药物单体单体，达，达到最终确证药物真伪的目的。到最终确证药物真伪的目的。38HNNHOOC2H5OC2H5HNNHOOC2H5O苯巴比妥HNNOOONaCH2CHCH2C3H7司可巴比妥钠巴比妥39紫

19、外紫外- -可见分光光度法可见分光光度法 546 546 种种红外分光光度法红外分光光度法 593593 种种高效液相色谱法高效液相色谱法 484484 种种薄层色谱法薄层色谱法 199199 种种气相色谱法气相色谱法 3 3 种种40化学鉴别法化学鉴别法化学鉴别法必须反应迅速、现象明显化学鉴别法必须反应迅速、现象明显 类型：类型：(1)(1)呈色反应鉴别法呈色反应鉴别法 (2)(2)沉淀生成反应鉴别法沉淀生成反应鉴别法 (3)(3)荧光反应鉴别法荧光反应鉴别法 ( (4)4)气体生成鉴别法气体生成鉴别法 （5)5)使试剂褪色鉴别法使试剂褪色鉴别法41(1)(1)呈色反应鉴别法呈色反应鉴别法

20、三氯化铁呈色反应三氯化铁呈色反应HOOCH3N对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 异羟肟酸铁反应异羟肟酸铁反应OOOCH3CH3CH3氯贝丁酯氯贝丁酯 Cl化学鉴别法化学鉴别法42(1)(1)呈色反应鉴别法呈色反应鉴别法 茚三酮呈色反应茚三酮呈色反应 重氮化重氮化- -偶合呈色反应偶合呈色反应OHOHNH2左旋多巴左旋多巴 HOOCH3N对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚化学鉴别法化学鉴别法43(2)(2)沉淀生成鉴别法沉淀生成鉴别法 与重金属离子沉淀反应与重金属离子沉淀反应 还原基团的银镜反应还原基团的银镜反应 异烟肼异烟肼化学鉴别法化学鉴别法二银盐白色可溶性一银盐取代的巴比妥类药物，3323AgNO CONa

21、 AgNO5544 (3)(3)荧光反应鉴别法荧光反应鉴别法 药物本身在可见光下发射荧光药物本身在可见光下发射荧光 药物溶液药物溶液+ +硫酸硫酸 药物溶液药物溶液+ +溴溴 药物溶液药物溶液+ +间苯二酚间苯二酚化学鉴别法化学鉴别法45(4)(4)气体生成反应鉴别法气体生成反应鉴别法化学鉴别法化学鉴别法大多数伯胺（铵）类药物、酰尿类以及某大多数伯胺（铵）类药物、酰尿类以及某 些酰胺类药物些酰胺类药物, ,可经强碱处理后加热产生氨气可经强碱处理后加热产生氨气. . 化学结构含硫药物化学结构含硫药物, ,可经强酸处理后加热可经强酸处理后加热 产生硫化氢气体产生硫化氢气体. .HNNNHNSH2N

22、7H2O硫鸟嘌呤硫鸟嘌呤 巴比妥类药物巴比妥类药物46(4)(4)气体生成反应鉴别法气体生成反应鉴别法化学鉴别法化学鉴别法含碘有机药物含碘有机药物 经直火加热可经直火加热可 生成紫色碘蒸气生成紫色碘蒸气. .OOHHOHNNOI碘苷碘苷含醋酸酯和乙酰胺含醋酸酯和乙酰胺醋酸酯类药物经硫酸醋酸酯类药物经硫酸水解后水解后, ,加乙醇可产加乙醇可产生醋酸乙酯的香味生醋酸乙酯的香味. .HOOCH3N对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚471.1.紫外光谱鉴别法紫外光谱鉴别法( (Ultraviolet spectrophotometry) )美法仑 测定测定maxmax，或同时测定，或同时测定minmin； 测定

23、一定浓度的供试液在测定一定浓度的供试液在maxmax处的处的A A 规定规定和和E E 规定规定 和和A A11/A/A22 经化学处理后，测定其反应产物的吸经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱特性。收光谱特性。12481 1 紫外光谱鉴别法紫外光谱鉴别法测定测定maxmax，或同时测定，或同时测定minmin乙胺嘧啶乙胺嘧啶 供试品在供试品在0.1mol/L0.1mol/L盐酸介质盐酸介质中的紫外吸收在中的紫外吸收在272nm272nm处为峰处为峰,216nm,216nm处处为谷为谷. .光谱鉴别法光谱鉴别法49测定一定浓度的供试液在测定一定浓度的供试液在maxmax处的处的A A 盐酸布

24、比卡因浓度盐酸布比卡因浓度0.4mg/ml0.4mg/ml溶液溶液, ,在在263nm、271nm波长处有最大吸收波长处有最大吸收. .其吸其吸光度分别为光度分别为0.53-0.580.53-0.58与与0.43-0.480.43-0.48光谱鉴别法光谱鉴别法50 规定规定和和E E 光谱鉴别法光谱鉴别法 经化学处理后经化学处理后, ,测定其反应产物测定其反应产物的吸收光谱特性的吸收光谱特性. .51规定规定和和A1/A2A1/A2 两性霉素在两性霉素在362nm、381nm、405nm波波长处有最大吸收长处有最大吸收. .规定规定362nm与与381nm处吸收度比值不大于处吸收度比值不大于0

25、.6、 381nm与与405nm波长比值不大于波长比值不大于0.9.光谱鉴别法光谱鉴别法52 在在200 200 400nm 400nm 波长范围内扫描波长范围内扫描两溶液两溶液, ,要求在相同的波长处有要求在相同的波长处有最最大吸收大吸收、最小吸收最小吸收和相同的和相同的吸收吸收系数系数，或，或吸收比吸收比在规定的范围内在规定的范围内. .与对照品比较与对照品比较, ,对比吸收光谱对比吸收光谱 的一致性的一致性光谱鉴别法光谱鉴别法53 2 2 红外光谱法红外光谱法特点：专属性强，应用广（固体、液体、 气体）用途：原料药 同类药（其他方法不易区分的 ） 磺胺类、甾体激素类、半合成抗生素光谱鉴别

26、法光谱鉴别法54 2 2 红外光谱法红外光谱法Ch.PCh.P（20052005） 采用标准图谱对照法采用标准图谱对照法BP BP （20052005） 采用标准图谱对照法采用标准图谱对照法USP USP （2929） 采用对照品法采用对照品法JP JP （1515） 采用规定条件下测定一定波采用规定条件下测定一定波 数处的特征吸收峰数处的特征吸收峰光谱鉴别法光谱鉴别法55特征区指纹区56 3 3 近红外光谱法近红外光谱法 测定物质在近红外谱区7502500nm的特征光谱，用化学计量的方法提取信息进行定性、定量分析。 特点：快速、准确、对样品无破坏光谱鉴别法光谱鉴别法573.3.近红外光谱法近

27、红外光谱法(Near-(Near-Infrared spectrophotometry) )58 4 4 原子吸收法原子吸收法 利用原子蒸汽可以吸收由该元素作为空心阴极灯发出的特征谱线，供试液溶液在特征谱线处的最大吸收和特征谱线强度减弱程度进行定性、定量分析。光谱鉴别法光谱鉴别法59 5 5 核磁共振法核磁共振法 测定供试品指定基团上质子峰的化学位移和偶合常数进行药物的鉴别光谱鉴别法光谱鉴别法60 结晶物质的鉴别 比较 供试品 已知物质的X射线粉末衍射图 依据： 各衍射线的衍射角（2） 相对强度 面间距X X射线粉末衍射法射线粉末衍射法61色谱谱鉴别法色谱谱鉴别法 适用于复杂环境下药物有效成分

28、及杂质鉴适用于复杂环境下药物有效成分及杂质鉴别别, ,具有分离、分析同时进行的特点具有分离、分析同时进行的特点. .高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)供试品和对照品供试品和对照品色谱峰保留时间一致色谱峰保留时间一致. .气相色谱法气相色谱法 (GC)(GC)同同HPLCHPLC要求要求薄层扫描法薄层扫描法(TLC)对照品比较法，对照品比较法， 供试供试品斑点与对照品的品斑点与对照品的Rf值及斑点的颜色应一致值及斑点的颜色应一致.色谱法（色谱法（ HPLC GC TLC MS)HPLC GC TLC MS)621.薄层色谱法（薄层色谱法（ TLC)63色谱谱鉴别法色谱谱鉴别法 同浓度对照品

29、在同一块薄层板比较同浓度对照品在同一块薄层板比较 供试品与对照品等体积混合在同一块薄层供试品与对照品等体积混合在同一块薄层板比较板比较 供试品与和其化学结构相似对照品比较供试品与和其化学结构相似对照品比较 将将下两溶液等体积混合点样、比较下两溶液等体积混合点样、比较1.1.薄层色谱法（薄层色谱法（ TLC)TLC)64色谱谱鉴别法色谱谱鉴别法高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)供试品和对照品供试品和对照品色谱峰保留时间一致色谱峰保留时间一致. .内标法时内标法时, ,药物峰保留药物峰保留时间与内标峰保留时间比值一致时间与内标峰保留时间比值一致气相色谱法气相色谱法 (GC)(GC)同同HPL

30、CHPLC要求要求2.2.高效液相色谱法（高效液相色谱法（ HPLC)HPLC)65GC和和HPLC鉴别法鉴别法66色谱谱鉴别法色谱谱鉴别法 在高真空状态下将被测物质离子化在高真空状态下将被测物质离子化, ,按质子按质子的质荷比的质荷比(m/z)(m/z)大小分离进行定性和定量分析大小分离进行定性和定量分析3.3.质谱法（质谱法（MS)MS)673.质谱鉴别法质谱鉴别法 (Mass Spectrometry)9-HO-LPT #1664 RT: 9.39 AV: 1 NL: 5.18E6T: + c sid=-10.00 Q3MS 50.00-500.0050100150200250300350400450500m/z0102030405060708090100Relative Abundance427.17428.18432.18102.02274.21318.2359.94302.22415.1768.96129.93362.28433.21246.16218.16144.95473.2368 生物鉴别法生物鉴别法 特点：利用微生物或实验动物利用微生物或实验动物 进行鉴别进行鉴别 用途：抗生素抗生素 生化药物生化药物生物鉴别法生物鉴别法69鉴鉴 别别 方方 法法化学鉴别