植物发育生物学研究方法

1、现在学习的是第一页，共53页2发育生物学发育生物学遗传学遗传学生物化学生物化学细胞学细胞学生理学生理学分子生物学分子生物学免疫学免疫学发育生物学在生命科学中的地位发育生物学在生命科学中的地位现在学习的是第二页，共53页现在学习的是第三页，共53页现在学习的是第四页，共53页现在学习的是第五页，共53页现在学习的是第六页，共53页现在学习的是第七页，共53页现在学习的是第八页，共53页食品的营养价值主要取决于种子中蛋白质和氨基酸的含量，特别食品的营养价值主要取决于种子中蛋白质和氨基酸的含量，特别是氨基酸的组成和含量。谷类作物中的多数作物赖氨酸、苏氨酸是氨基酸的组成和含量。谷类作物中的多数作物赖氨

2、酸、苏氨酸、异亮氨酸含量偏低，而在一些豆类作物中蛋氨酸偏低。如赖氨、异亮氨酸含量偏低，而在一些豆类作物中蛋氨酸偏低。如赖氨酸含量在玉米中约为酸含量在玉米中约为0.3%0.3%，小麦在，小麦在0.34%0.34%左右。左右。作物体内某些特定的氨基酸在细胞内保持一定的浓度，过高回作物体内某些特定的氨基酸在细胞内保持一定的浓度，过高回发生毒害作用。而某些细胞一旦获得对这些氨基酸的抗性后，发生毒害作用。而某些细胞一旦获得对这些氨基酸的抗性后，可大大减轻这些毒性，从而允许细胞内这些氨基酸及类似物的可大大减轻这些毒性，从而允许细胞内这些氨基酸及类似物的过量积累，这些氨基酸也许就是对人们特别有用的氨基酸。如

3、过量积累，这些氨基酸也许就是对人们特别有用的氨基酸。如获得高赖氨酸细胞系的突变植物类型，就可达到改良品种的目获得高赖氨酸细胞系的突变植物类型，就可达到改良品种的目的。的。现在学习的是第九页，共53页现在学习的是第十页，共53页现在学习的是第十一页，共53页现在学习的是第十二页，共53页现在学习的是第十三页，共53页现在学习的是第十四页，共53页现在学习的是第十五页，共53页现在学习的是第十六页，共53页现在学习的是第十七页，共53页现在学习的是第十八页，共53页现在学习的是第十九页，共53页现在学习的是第二十页，共53页现在学习的是第二十一页，共53页野生型试验预测现在学习的是第二十二页，共5

4、3页现在学习的是第二十三页，共53页现在学习的是第二十四页，共53页现在学习的是第二十五页，共53页现在学习的是第二十六页，共53页现在学习的是第二十七页，共53页现在学习的是第二十八页，共53页现在学习的是第二十九页，共53页现在学习的是第三十页，共53页Gisela Storz, Science, 296(5571):1263-1265, 2002.现在学习的是第三十一页，共53页现在学习的是第三十二页，共53页现在学习的是第三十三页，共53页现在学习的是第三十四页，共53页现在学习的是第三十五页，共53页现在学习的是第三十六页，共53页现在学习的是第三十七页，共53页现在学习的是第三十八

5、页，共53页现在学习的是第三十九页，共53页蛋白质之间相互作用以及通过相互作用而形成的蛋白质之间相互作用以及通过相互作用而形成的蛋白复合物是细胞各种基本功能的主要完成者。几乎所蛋白复合物是细胞各种基本功能的主要完成者。几乎所有的重要生命活动，包括有的重要生命活动，包括DNADNA的复制与转录、蛋白质的复制与转录、蛋白质的合成与分泌、信号转导和代谢等等，都离不开蛋白的合成与分泌、信号转导和代谢等等，都离不开蛋白质之间的相互作用。质之间的相互作用。 蛋白质之间相互作用研究的重要性蛋白质之间相互作用研究的重要性现在学习的是第四十页，共53页酵母双杂交酵母双杂交谷胱苷肽谷胱苷肽-S-转移酶沉淀试验转移

6、酶沉淀试验(GST-pull down）免疫共沉淀免疫共沉淀双分子荧光互补技术双分子荧光互补技术(BIFC)生物发光共振能量转移（生物发光共振能量转移（BRET）技术）技术常用蛋白质相互作用的研究技术常用蛋白质相互作用的研究技术现在学习的是第四十一页，共53页一、细菌双杂交系统一、细菌双杂交系统 Two-hybrid system 是90年代初发展起来的新方法，可用于分离能与已知靶蛋白质（target protein）相互作用的基因。基本原理： 真核生物的转录因子大多是由两个结构上分开、功能上独立的结构域组成的,如GAL4 （酵母转录激活蛋白Gal4的基因）。这两个结构域各具功能，互不影响。但一个完整的激活特定基因表达的激活因子必须同时含有这两个结构域，否则无法完成激活功能。现在学习的是第四十二页，共53页现在学习的是第四十三页，共53页现在学习的是第四十四页，共53页现在学习的是第四十五页，共53页酵母双杂交基本过程举 例现在学习的是第四十六页，共53页GSTXY谷胱甘肽谷胱甘肽-琼脂糖球珠琼脂糖球珠细胞裂解物细胞裂解物 tube4下孵育下孵育2h2h GST融合蛋白融合蛋白GSTXY+现在学习的是第四十七页，共53页现