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1、不同龄大鼠胃酸、胃内细菌与胃肠道感染的相关研究 10-09-10 10:06:00 作者:朱鸣 吴本俨 宫媛编辑:studa20【摘要】 目的 研究不同鼠龄大鼠胃内pH值的变化与胃部细菌的关系,观察胃内细菌变化是否能导致大鼠胃肠道的炎症反应。方法 Wistar大鼠30只,其中3月龄的非老龄大鼠20只,22月龄的老龄大鼠10只,分为非老龄奥美拉唑组、非老龄对照组和老龄组。2 w后测大鼠胃内pH值,取大鼠胃组织做细菌培养,观察大鼠是否有腹泻,并做胃组织病理切片检查。结果 与非老龄对照组大鼠相比,老龄组大鼠胃内pH值、胃部细菌数量无明显差异(P0.05);非老龄奥美拉唑组大鼠胃内pH值、胃部细菌数量

2、差异明显(P0.01)。3组大鼠实验期间未发现明显的腹泻,观察病理切片,胃组织无明显炎细胞浸润。结论 胃内pH值与胃部细菌数量不随鼠龄的增加而变化。随胃内pH值升高,大鼠胃部细菌数量增加,但未发生明显的胃肠道炎症。 【关键词】 大鼠;胃酸;细菌过度生长;胃肠道炎症;衰老正常人胃液的pH值为1.52.0,可以杀死随食物进入胃内的细菌,通常正常人的胃内可以分离出少量细菌,主要是来源于口腔和食物的过路菌,含量一般在103 CFU/ml以下1 。胃酸状态对细菌在胃内的生存非常重要。目前临床上常用的抑制胃酸的药物包括组胺H2受体阻滞剂及质子泵抑制剂(PPI),其中PPI可使胃内pH值明显增高,这样有可能

3、造成胃内细菌过度生长,而胃内细菌过度生长是否能引起胃肠道的炎症呢? 本研究从动物实验着手,研究大鼠胃内pH值与胃部细菌数量的关系,并研究衰老对胃酸及胃部细菌的影响,观察胃内细菌的繁殖是否能引起胃肠道的炎症。1 材料与方法1.1 材料电热恒温培养箱,重庆四达公司。电子天平,上海精天电子仪器厂。Olympus BH2 显微镜,日本Olympus公司。广泛及精密pH值试纸,北京化工厂。奥美拉唑镁肠溶片MUPS,阿斯利康制药有限公司。一次性血琼脂培养基,天津市金章科技开发有限公司。1.2 方法30只Wistar大鼠(解放军总医院动物实验中心提供),其中20只3月龄,体重251.4310.9 g,随机分

4、2组:非老龄对照组10只,非老龄奥美拉唑组10只;另有老龄组10只,22月龄,体重402.4820.7 g。组内大鼠雌雄各半。奥美拉唑肠溶片分散于蒸馏水中,浓度为0.75 mg/ml,分散后于30 min内灌胃。非老龄奥美拉唑组以奥美拉唑灌胃,2 ml/100 g体重,每天2次(15 mgkg-1d-1),非老龄对照及老龄组均以等量的生理盐水灌胃。3组的灌胃时间均为2 w。在2 w内观察各组大鼠是否出现腹泻情况。2 w后,非老龄奥美拉唑组和非老龄对照组、老龄组大鼠均禁食24 h,禁水12 h。之后用10%水合氯醛(约2 ml/kg)腹腔注射麻醉,在严格的无菌条件下剖腹并游离胃,用止血钳夹住贲门

5、和幽门。于前胃区剪一小切口,用无菌注射器抽出约1 ml胃液,用广泛pH试纸及精密pH试纸测出胃液pH值。取前胃及后胃组织各一块,放入已称量好的无菌Eppendorf管中,电子天平称重,置500 l生理盐水中;另取后胃组织一块,浸泡于4%的甲醛溶液中。把胃组织在无菌研磨器中研成匀浆,根据不同的胃液pH值取1、10或100 l组织研磨液接种于普通血平板,在37培养箱中需氧培养24 h观察结果。计数细菌的菌落数,细菌计数单位为CFU/g。取出固定于多聚甲醛的胃组织,按常规脱水、石蜡包埋,4 m切片,HE染色,由有经验的病理科医生在显微镜下观察炎细胞浸润情况。1.3 统计学分析用SPSS15.0统计软件。细菌计数变换为自然对数,组间资料t检验、成组资料秩和检验。2 结 果2.1 胃内pH值变化与细菌过度生长与非老龄对照组大鼠相比,老龄对照组大鼠胃内pH、胃部细菌数量均无明

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