如何写好基金申请书

1、如何写好基金申请书如何写好基金申请书杨杨 培培 增增重庆市眼科研究所重庆市眼科研究所眼科学重庆市市级重点实验室眼科学重庆市市级重点实验室重庆医科大学附属第一医院眼科重庆医科大学附属第一医院眼科一、基金的种类一、基金的种类国家级层面的基金国家级层面的基金u 国家自然科学基金国家自然科学基金u 国家科技部计划项目国家科技部计划项目 u 教育部项目教育部项目u 卫生部项目卫生部项目u 重庆市项目重庆市项目省省 部部 级级 项项 目目u 重大项目重大项目u 创新群体基金创新群体基金u 重点项目重点项目u 面上项目面上项目u 国际合作项目国际合作项目u 青年基金项目青年基金项目u 地区科学基金地区科学基

2、金 u 国家杰出青年基金国家杰出青年基金国家自然科学基金国家自然科学基金u 973：着重于基础研究：着重于基础研究u 863：着重于技术研究：着重于技术研究u 国家科技支撑计划国家科技支撑计划u 重大专项基金重大专项基金国家科技部计划基金国家科技部计划基金基金种类基金种类u 科技支撑计划（卫生部组织实施）科技支撑计划（卫生部组织实施）u 临床重点项目（临床重点项目（1 1次次/3/3年）年）u 行业专项基金项目行业专项基金项目 部级基金项目部级基金项目卫生部：卫生部：教育部：教育部：u 博士点基金项目博士点基金项目u 新世纪优秀人才基金新世纪优秀人才基金基金种类基金种类u 基金是个人成长过程的

3、铺路石基金是个人成长过程的铺路石u 基金是个人成功大厦的基石基金是个人成功大厦的基石u 基金是个人成功的里程碑基金是个人成功的里程碑二、基金的重要性二、基金的重要性三块石头三块石头u 衡量个人学术水平的指标衡量个人学术水平的指标u 衡量所领导团队能力的指标衡量所领导团队能力的指标u 晋升职称的重要指标晋升职称的重要指标 三个指标三个指标1.1. 吃透基金资助方向、领域和内容吃透基金资助方向、领域和内容2. 2. 提出合适的有意义的科学假设提出合适的有意义的科学假设3. 3. 确定适当研究内容确定适当研究内容4. 4. 描述详尽的技术路线和方法描述详尽的技术路线和方法5. 5. 提供适当的工作基

4、础提供适当的工作基础三、如何写好基金申请标书三、如何写好基金申请标书u 国家自然科学基金：主要基础研究国家自然科学基金：主要基础研究u 863计划：计划： 主要是技术方面的研究主要是技术方面的研究u 重庆市科委重庆市科委l 攻关项目攻关项目l 自然科学基金自然科学基金l 重大专项重大专项 吃透基金资助方向、领域吃透基金资助方向、领域（1）了解基金资助领域和方向）了解基金资助领域和方向 知己知彼，百战不殆知己知彼，百战不殆（2）了解基金资助的范围）了解基金资助的范围u 如重大传染病的发病机制及防治如重大传染病的发病机制及防治u 肝脏疾病的发病机制及防治肝脏疾病的发病机制及防治u 代谢疾病的发病机

5、制及防治代谢疾病的发病机制及防治 吃透基金资助方向、领域吃透基金资助方向、领域u 自已知识背景自已知识背景u 实验条件、平台实验条件、平台u 个人或团队的工作基础和实力个人或团队的工作基础和实力（3）了解自己可以做什么，能做什么）了解自己可以做什么，能做什么u 临床问题：葡萄膜炎患者对临床问题：葡萄膜炎患者对A药物的反应不同药物的反应不同u 科学问题：药物效果可能与不同个体科学问题：药物效果可能与不同个体酶的酶的 活性有关活性有关u 申请题目：从申请题目：从酶变异探讨酶变异探讨A药物治疗葡萄膜药物治疗葡萄膜 炎效果的异质性炎效果的异质性提出适当的科学假设提出适当的科学假设（1）要提出）要提出“

6、有意义有意义”的科学问题，要善于的科学问题，要善于将临床问题凝炼成科学问题将临床问题凝炼成科学问题u 提出的科学问题是否有人研究提出的科学问题是否有人研究u 目前研究到何种程度目前研究到何种程度u 有无回答的问题有无回答的问题u 问题是新的问题是新的u 问题研究思路是新的问题研究思路是新的u 问题研究技术是新的问题研究技术是新的u 创新应合乎科学原理、合乎逻辑创新应合乎科学原理、合乎逻辑（2）要了解国内外研究现状）要了解国内外研究现状（3） 研究课题要有创新性研究课题要有创新性提出适当的科学假设提出适当的科学假设一个好的研究计划应包括以下三个方面一个好的研究计划应包括以下三个方面1. 1. 表

7、达水平研究表达水平研究(mRNA(mRNA，蛋白，蛋白) )2. 2. 功能研究功能研究3. 3. 机制研究机制研究确定适当的研究内容确定适当的研究内容一个科学假设需要合适研究计划才能验证一个科学假设需要合适研究计划才能验证确定适当的研究内容确定适当的研究内容u 根据内容需要选择技术和方法根据内容需要选择技术和方法u 描述详尽的技术路线和方法描述详尽的技术路线和方法u 路线方法显示研究的路线方法显示研究的可行性可行性 可信性可信性 把握性把握性如何写摘要如何写摘要l 简要介绍研究背景简要介绍研究背景 占占10-20%l 主要研究内容主要研究内容 占占60-80%l 主要回答科学问题及意义主要回

8、答科学问题及意义 占占10-20% 摘要是基金的精华浓缩部分摘要是基金的精华浓缩部分病是病是疾病，目前疾病，目前研究发现研究发现,但有但有关关尚不清楚。尚不清楚。本研究以本研究以为对象为对象，以，以为切入点为切入点，以以为模型，以为模型，以为研究方法，为研究方法，探讨探讨本项研究将本项研究将可能回答（阐明）可能回答（阐明） 科学问题科学问题将为将为疾病预防和治疗提供新的研究靶点疾病预防和治疗提供新的研究靶点摘要摘要例例1 1病是病是疾病，其发病与疾病，其发病与相关，但相关，但尚尚不清楚。本研究以不清楚。本研究以诱导动物模型（或在诱导动物模型（或在组组织上），以织上），以RT-PCR(RT-PC

9、R(荧光定量荧光定量PCR)PCR)、免疫组织化学染、免疫组织化学染色色。探讨探讨的表达的表达，以，以实验实验评价评价分分子在疾病发生中的子在疾病发生中的机制机制，以期，以期阐明阐明（揭示，回揭示，回答答）机制机制（科学问题），此将为（科学问题），此将为研究开辟研究开辟新的途径。新的途径。摘要摘要例例2 2立项依据立项依据 1. 研究疾病的研究疾病的重要性重要性 2. 疾病中哪些方面重要但疾病中哪些方面重要但尚不清楚尚不清楚 3. 指出此方面的国内外指出此方面的国内外研究现状研究现状 4. 找出研究的找出研究的切入点切入点 5. 提出研究的提出研究的假设假设和线路和线路框架框架本课题要本课题要

10、干什么干什么首先介绍整个疾病的概况首先介绍整个疾病的概况疾病研究中的某一个方面疾病研究中的某一个方面研究现状及问题研究现状及问题找出切入点找出切入点感染感染葡萄膜炎一类疾病的危害性及重要性葡萄膜炎一类疾病的危害性及重要性VKHVKH、BehcetBehcet病是我国最病是我国最常见和最重要的两种类型常见和最重要的两种类型自身免疫反应自身免疫反应感染事件感染事件自免反应自免反应TLR?研究假设研究假设举例举例研究内容研究内容u 反映研究者整个研究反映研究者整个研究思路框架和内容思路框架和内容u 是研究涉及的是研究涉及的主要方面主要方面u 描述主要描述主要干什么干什么事事u 通过通过研究研究，确定

11、（阐明、揭示、评价）确定（阐明、揭示、评价） 表达（机制、差异等）表达（机制、差异等）u 不能写成具体的实验方法不能写成具体的实验方法举例举例 1. 1. 探讨探讨BehcetBehcet病、病、Vogt-Vogt-小柳原田综合征和急性特发性前葡萄小柳原田综合征和急性特发性前葡萄 膜炎患者单核细胞中膜炎患者单核细胞中TLRTLR和和NOD mRNANOD mRNA和蛋白表达的差异和蛋白表达的差异，以，以 期期确定出与不同葡萄膜炎相关的模式识别受体确定出与不同葡萄膜炎相关的模式识别受体 （1 1）探讨）探讨BehcetBehcet病、病、Vogt-Vogt-小柳原田综合征和急性特发性前葡萄膜炎小

12、柳原田综合征和急性特发性前葡萄膜炎 患者单核细胞中患者单核细胞中TLRTLR和和NOD mRNANOD mRNA的表达的表达 （2 2）探讨三种葡萄膜炎患者外周血单核细胞中）探讨三种葡萄膜炎患者外周血单核细胞中TLRTLR和和NODNOD的蛋白表达的蛋白表达2. 2. 探讨探讨BehcetBehcet病、病、Vogt-Vogt-小柳原田综合征和急性特发性前葡萄膜小柳原田综合征和急性特发性前葡萄膜 炎患者外周血单核细胞在不同炎患者外周血单核细胞在不同TLRTLR和和NODNOD配体刺激下分化为配体刺激下分化为DCDC 的能力、相关细胞因子分泌和对的能力、相关细胞因子分泌和对Th1Th1、Th17

13、Th17分化诱导的分化诱导的差异差异， 旨在从模式识别受体与配体相互作用角度旨在从模式识别受体与配体相互作用角度阐明阐明三种葡萄膜炎三种葡萄膜炎 患者和正常人对病原微生物成分的患者和正常人对病原微生物成分的反应及差异反应及差异，以期，以期揭示揭示这这 些感染因素引起葡萄膜炎的些感染因素引起葡萄膜炎的分子基础分子基础 （1 1）体外观察三种葡萄膜炎患者外周血单核细胞在不同模式识别受体）体外观察三种葡萄膜炎患者外周血单核细胞在不同模式识别受体 配体刺激下分化为配体刺激下分化为DCDC的能力的能力 （2 2）体外评价三种葡萄膜炎患者的单核细胞经不同模式识别受体的）体外评价三种葡萄膜炎患者的单核细胞经

14、不同模式识别受体的 配体刺激后细胞因子产生的能力及其差异配体刺激后细胞因子产生的能力及其差异 （3 3）体外评价不同模式识别受体的配体对）体外评价不同模式识别受体的配体对nanave Tve T细胞分化为细胞分化为Th1Th1、 Th17 Th17细胞的诱导能力及其差异细胞的诱导能力及其差异表达表达功能功能3.3.在动物模型上探讨在动物模型上探讨与葡萄膜炎相关的模式识别受体的配体对与葡萄膜炎相关的模式识别受体的配体对 葡萄膜炎发生及严重程度的影响及其对葡萄膜炎发生及严重程度的影响及其对Th1Th1、Th17Th17细胞分化细胞分化 和细胞因子产生的影响，进一步和细胞因子产生的影响，进一步验证验

15、证模式识别受体及其配体模式识别受体及其配体 在葡萄膜炎发生中的在葡萄膜炎发生中的作用及其可能的机制作用及其可能的机制 （1 1）探讨相关模式识别受体配体对）探讨相关模式识别受体配体对EAUEAU严重程度的影响严重程度的影响 （2 2）探讨模式识别受体的配体在）探讨模式识别受体的配体在EAUEAU模型中对小鼠模型中对小鼠Th1Th1、Th17Th17细胞细胞 及细胞因子产生的影响及细胞因子产生的影响4.4.探讨探讨TLRTLR和和NODNOD基因多态与基因多态与BehcetBehcet病和病和Vogt-Vogt-小柳原田综合征小柳原田综合征 的相关性，以期的相关性，以期阐明阐明两类模式识别受体在

16、基因易感性方面两类模式识别受体在基因易感性方面 对两种葡萄膜炎发生的影响对两种葡萄膜炎发生的影响举例举例机制机制机制机制罗列研究的具体方法罗列研究的具体方法u 的免疫组化研究的免疫组化研究u PCR的检测的检测u 质粒的构建质粒的构建u 诱导诱导模型模型u 纯化纯化蛋白蛋白u 细胞的分离及培养细胞的分离及培养u 收集收集标本标本u 检测检测的表达的表达u Tunnel检测检测凋亡率凋亡率u 体外实验体外实验u 体内实验体内实验u 统计学分析统计学分析研究内容部分易出现的问题研究内容部分易出现的问题 例例1u 分离和培养分离和培养细胞，以细胞，以micro RNA干扰干扰A合成合成u 鉴定与鉴定

17、与A相互作用的精子蛋白质成分相互作用的精子蛋白质成分u 确定确定A及其相互作用蛋白质的信号传导通路及其相互作用蛋白质的信号传导通路u 揭示揭示A缺失引起缺失引起疾病的分子机制疾病的分子机制例例2u A与与B信号通路分子表达变化的相关关系信号通路分子表达变化的相关关系l 构建构建A哺乳动物表达质粒哺乳动物表达质粒l 构建构建A特异性特异性ShRNA表达质粒表达质粒例例3u 运用运用DNAstar、Antheprot等生物信息学软件分析等生物信息学软件分析A结构、结构、 特性及抗原表位特性及抗原表位u 应用应用PCR扩增技术，获得扩增技术，获得A抗原表位基因和抗原表位基因和B基因基因u 通过通过P

18、CR法将两个基因融合扩增获得法将两个基因融合扩增获得A-B融合基因融合基因u 构建构建C菌重组菌重组D、E疫苗并鉴定重组质粒疫苗并鉴定重组质粒F、G在在表达表达u 重组重组D、E疫苗免疫小鼠疫苗免疫小鼠例例4u A酶抑制肽的同源分子模建酶抑制肽的同源分子模建u A酶抑制肽酶活性的鉴定酶抑制肽酶活性的鉴定u A酶抑制肽的基因克隆及表达酶抑制肽的基因克隆及表达u 重组重组A酶抑制肽的纯化及活性测定酶抑制肽的纯化及活性测定例例5u A融合蛋白竞争性结合融合蛋白竞争性结合B受体干扰受体干扰B信号信号 传递的可行性研究传递的可行性研究u A融合蛋白对人融合蛋白对人B细胞生物学影响及可能机制细胞生物学影响

19、及可能机制u C裸鼠模型的构建及鉴定裸鼠模型的构建及鉴定u A融合蛋白对融合蛋白对C裸鼠模型作用的实验研究裸鼠模型作用的实验研究 通过通过研究，以期阐明（揭示，确定）研究，以期阐明（揭示，确定） 旨在旨在研究目标研究目标拟解决的关键问题拟解决的关键问题u 不能太多不能太多u 不能只提出问题不能只提出问题u 在理论上阐明在理论上阐明u 在关键技术上破解在关键技术上破解难题难题u 建立起建立起模型模型心肌细胞、心房肌组织，心肌细胞、心房肌组织，窦房结组织心室壁移植窦房结组织心室壁移植是否导致宿主心律失常？为什么？是否导致宿主心律失常？为什么？窦房结组织心室壁移植是否能完成生物起博任务？窦房结组织心

20、室壁移植是否能完成生物起博任务？ 修改为什么修改为什么？通过通过研究，将会回答及阐明心肌细胞研究，将会回答及阐明心肌细胞移植后移植后 是否能够引起心律失常这一科学问题及其机制。是否能够引起心律失常这一科学问题及其机制。通过通过研究，将确定和揭示心肌细胞研究，将确定和揭示心肌细胞移植后移植后 是否能完成起博任务，及其可能的生物学机制是否能完成起博任务，及其可能的生物学机制举例举例例例1u A A人工材料中人工材料中AgAg+ +体内外缓释性能研究体内外缓释性能研究u A A人工材料中的人工材料中的AgAg+ +缓释机制研究缓释机制研究u A A人工材料的体内抗菌性能检测人工材料的体内抗菌性能检测

21、u A A人工材料的生物安全性能研究人工材料的生物安全性能研究u A A人工材料的治疗人工材料的治疗疾病的动物模型疾病的动物模型例例2u 运用生物信息学软件预测分析运用生物信息学软件预测分析A A蛋白的特性蛋白的特性 和抗原表位和抗原表位u 获得并鉴定获得并鉴定A抗原基因和抗原基因和B基因基因u 获得获得A-B融合基因，构建重组融合基因，构建重组Bb-A和和Bb-B疫苗疫苗u 对重组对重组Bb-A和和Bb-B疫苗鉴定，观察其对模型小疫苗鉴定，观察其对模型小 鼠的免疫保护效应鼠的免疫保护效应例例3 3u 确定确定出不同类型葡萄膜炎患者两类模式识别受体在出不同类型葡萄膜炎患者两类模式识别受体在mR

22、NAmRNA及其蛋白的及其蛋白的 表达水平及其差异表达水平及其差异，以期，以期解决和阐明解决和阐明为什么不同类型葡萄膜炎与不为什么不同类型葡萄膜炎与不 同感染因素有关这一临床问题。同感染因素有关这一临床问题。u 确定确定模式识别受体的不同配体对不同类型葡萄膜炎患者单核细胞分模式识别受体的不同配体对不同类型葡萄膜炎患者单核细胞分 化为化为DCDC、对细胞因子产生和、对细胞因子产生和Th1Th1、Th17Th17分化影响，以期分化影响，以期回答和阐明回答和阐明 感染因素是怎样引起免疫反应和葡萄膜炎发生这一重要感染因素是怎样引起免疫反应和葡萄膜炎发生这一重要科学问题科学问题。u 确定确定相关模式识别

23、受体和配体对自身免疫性葡萄膜炎模型及相关模式识别受体和配体对自身免疫性葡萄膜炎模型及Th1Th1、 Th17Th17细胞及细胞因子的影响细胞及细胞因子的影响, ,以期以期回答回答模式识别受体及其配体在模式识别受体及其配体在 葡萄膜炎发生中作用能否在动物模型上得到重复和验证这一问题。葡萄膜炎发生中作用能否在动物模型上得到重复和验证这一问题。u 确定确定模式识别受体基因多态与模式识别受体基因多态与BehcetBehcet病和病和Vogt-Vogt-小柳原田综合征的相小柳原田综合征的相 关性，以期关性，以期解决和回答解决和回答模式识别受体可否在基因易感性层面对葡萄膜模式识别受体可否在基因易感性层面对

24、葡萄膜 炎发生产生影响这一科学问题。炎发生产生影响这一科学问题。研究方案既体现研究内容，但又不同于研究方案既体现研究内容，但又不同于研究内容研究内容u 研究对象及分组研究对象及分组u 研究的具体实验方法研究的具体实验方法u 确定确定 (阐明、揭示阐明、揭示) u 不要只列出一个框架图不要只列出一个框架图拟采取的研究方案拟采取的研究方案可行性分析可行性分析 理论上可行理论上可行 技术方面可行技术方面可行 实验平台实验平台 患者来源患者来源 (标本标本) 动物模型动物模型 以往基础以往基础我们的标书我们的标书u 项目组成员熟练掌握分子生物学、免疫学及遗传学项目组成员熟练掌握分子生物学、免疫学及遗传

25、学技术技术，为本项目，为本项目 研究提供了良好的研究提供了良好的实验技术支持实验技术支持。u 项目负责人长期从事葡萄膜炎基础和临床的研究，项目负责人长期从事葡萄膜炎基础和临床的研究，已发现和证实已发现和证实 了了，这些方面的研究为进行此课题，这些方面的研究为进行此课题奠定了重要的基础奠定了重要的基础。 u 我们已建立起人单核细胞诱导分化为我们已建立起人单核细胞诱导分化为DCDC和人和人nave T T细胞分化为细胞分化为Th1Th1、 Th17 Th17细胞的体系，这些实验和工作为我们实施此项研究细胞的体系，这些实验和工作为我们实施此项研究奠定了良好奠定了良好 的基础。的基础。u 我们的临床葡萄膜炎患者具数量大、疾病种类多、依从性好等特点，我们的临床葡萄膜炎患者具数量大、疾病种类多、依从性好等特点， 为我们进行相关研究为我们进行相关研究从病原上提供了保障。从病原上提供了保障。 u 我们已收集到我们已收集到BehcetBehcet病患者、病患者、VogtVogt小柳原田综合征患者、急性前葡萄小柳原田综合征患者、急性前葡萄 膜炎患者、正常人血标本膜炎患者、正常人血标