大黄对重症急性胰腺炎大鼠肠道屏障功能保护的实验研究

1、大黄对重症急性胰腺炎大鼠肠道屏障功能保护的实验研究         08-06-20 15:34:00     作者：林茵绿    编辑：studa20【摘要】  目的 观察经空肠输注大黄煎液对重症急性胰腺炎大鼠肠道屏障功能的保护作用。方法 采用胰管逆行注射3.5%牛黄胆酸钠法建立大鼠重症急性胰腺炎(SAP)模型，假手术组用0.9%氯化钠注射液替代牛黄胆酸钠，所有大鼠均经胃造瘘口空肠置管。SAP组随机分为输注大黄煎液组(SAP

2、A组)及0.9%氯化钠注射液组(SAPB组)2个亚组(每组12只)，假手术(SO)组8只。SAP造模成功48 h后，SAP组开始输注大黄煎液或0.9%氯化钠注射液。检测指标包括：肠道转运系数、血清淀粉酶、脏器细菌移位率、胰腺病理评分、血浆D乳酸等。结果 SAP造模成功后72 h SAPA组大鼠的肠道转运系数高于SAPB组(P0.05)而低于SO组(P0.01)，脏器细菌移位率、血浆D乳酸水平低于SAPB组(P0.05)而高于SO组(P0.01)；SAPA组与SAPB组在血淀粉酶和胰腺病理评分方面无显著性差异(P0.05)。结论 SAP早期经空肠输注大黄煎液有助于肠道功能的恢复和对肠道屏障功能的

3、保护，但对SAP的病程、胰腺炎病情的影响不大。 【关键词】  重症胰腺炎 大黄 D乳酸 肠道屏障功能 实验研究    【Abstract】  Objective  To observe the effect of Rhubarb on the intestinal barrier of rats with severe acute pancreatitis (SAP).Methods  SAP model of rats was induced by injecting adversely the 3.5% sodium t

4、aurocholate into the biliopancreatic duct, and saline was used in the rats of sham operation group instead of sodium taurocholate, and catheters were placed into the jejunum via gastrostomy for all rats. The 24 rats with SAP were randomly divided into two groups, group A(n=12) used Rhubarb decoction

5、 and group B used saline instead, and there were 8 rats in sham operation group. Rhubarb decoction was used after 48 hours of model making. The indexes observed were intestinal transmit index, bacterial translocation rate, serum amylase, histological score of the pancreas and the level of D lactate.

6、 Results  Group A had a significantly higher intestinal transmit index, with a lower translocation organ bacterial rate and plasma D lactate, compared with that of group B (P<0.05). There was no difference in serum amylase and histological scores between the two groups (P>0.05).Conclusion

7、  The jejunal administration of rhubarb decoction can help to the restoration of intestinal function and the protection of intestinal barrier, but which cant improve the state of SAP.    【Key words】  Severe pancreatitis;Rhubarb;D lactate;Intestinal barrier;Experimental study

8、     急性胰腺炎是指消化酶被激活后对胰腺自身消化所引起的炎症，是一种较为常见的极为严重的急腹症1。中药大黄有助于肠功能的恢复，减少细菌内毒素的移位，保护屏障功能。本研究旨在通过动物实验，进一步评价大黄对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)肠道屏障功能的保护作用。    1  材料与方法    1.1  材料  雄性Wistar大鼠32只，体重220280 g，中国医学科学院上海实验动物中心提供；牛黄胆酸钠及D乳酸脱氢酶系S

9、igma公司产品；胰管插管采用内径为0.28 mm、外径为0.38 mm的聚乙烯管，系Becton Dickinson公司产品；L乳酸测定试剂盒为Randox公司产品；生大黄煎液由本院药剂科配制，浓度为10 g/100 ml。    1.2  主要仪器  微量注射泵，Heraeus低温高速离心机，日立7170S自动分析仪。    1.3  实验设计  32只大鼠采用抽签法随机分为3组，SAPA组12只滴注大黄煎液；SAPB组12只滴注0.9%氯化钠注射液；假手术(SO)组8只。造模成功后48 h

10、，分别予以大黄煎液或0.9%氯化钠注射液。大黄煎液浓度为10 g/100 ml，速度为5 ml/h，每8 h 1次，每次2.5 ml，共3次。    1.4  模型制作  造模前大鼠禁食12 h，自由饮水。采用胰管逆行注射法造模，先在十二指肠乳头部系膜对侧缘以412号针头对准乳头方向穿刺并进入胆胰管，使出现一隧道，然后拔出针头，小心从同一部位、沿同一路线插入细聚乙烯管，没入胆胰管开口处约1 cm，在十二指肠壁绕聚乙烯管以60线缝合1针，防止牛黄胆酸钠注射时向十二指肠肠腔反流，在左右肝管汇合处以小动脉夹夹闭以防止向肝脏方向反流，用微量注射泵按3

11、ml/h速度匀速向胰管注入3.5%牛黄胆酸钠(0.2 ml/100 g)，注射后维持5 min，观察到胰腺有病变时方可录用。空肠置管：经胃幽门区，避开血管丰富区，先用粗针戳一破口，然后置入一外径1.5 mm(内径1.0 mm)的硅胶管，远端位于空肠屈氏韧带以下5 cm左右，缝合固定，经皮下隧道将硅胶管自颈部引出，导管穿过弹簧，用自制背扣固定于颈部皮肤。关腹后，于大鼠后大腿内侧皮下注入0.9%氯化钠注射液20 ml/kg。假手术组用0.9%氯化钠注射液替代牛黄胆酸钠。    1.5  观测指标及方法    1.6 

12、取标本步骤及保存方法  造模成功后72 h，自鼠胃中注入50% Evan blue染料0.5 ml，30 min后麻醉大鼠，进腹记录腹腔内各脏器情况，标记染料终末端；下腔静脉取血(检测淀粉酶、D乳酸)，血分2种：加抗凝剂EDTA 4 ml，未加抗凝剂2 ml；快速切取回肠系膜淋巴结3枚及肝、脾组织各0.5 cm×0.5 cm×0.5 cm，分别切碎后置入牛肉汤中增菌；胰头组织标本0.5 cm×0.5 cm×0.5 cm置入10%甲醛液中固定。血标本低温离心20 min(4 ，1 500 r/min)，血清、血浆标本分装后置于-70 冰箱中保存待

13、测。    1.7  统计学处理  所有实验结果以均数±标准差(±s)表示，采用SPSS 10.0统计软件包作ANOVA方差分析及2检验，P0.05为统计学有显著性差异。    2  结  果    2.1  大体标本(术中所见)  假手术组腹腔未见异常；SAP组胰腺有不同程度水肿、坏死，伴肠系膜、后腹膜皂化斑和血性腹水。    2.2  肠道转运功能  肠道转运系数反应肠道蠕动功能恢复情况。SAP组较假手术组肠道转运系数低(P0.01)；SA