一测多评法（课堂PPT）

1、1一测多评法在中药质量控制中的应用姓名：徐作军学号：1407032126572内容 概述概述1中药制剂质量控制中药制剂质量控制2一测多评法的概念、适用范围及其原理一测多评法的概念、适用范围及其原理3一测多评法的应用一测多评法的应用4小结与展望小结与展望531.概述 随着中药现代化步伐的进一步加快，无论是消随着中药现代化步伐的进一步加快，无论是消费者、药品生产企业、科研工作者还是药品监管费者、药品生产企业、科研工作者还是药品监管机构，都对中药质量提出了更高要求。机构，都对中药质量提出了更高要求。 现有中药标准多以单一成分含量反映中药产现有中药标准多以单一成分含量反映中药产品质量，但中药成分复杂，

2、具有多成分、多靶点品质量，但中药成分复杂，具有多成分、多靶点的特点，仅以一种成分含量无法全面反映中药质的特点，仅以一种成分含量无法全面反映中药质量的优劣，由此提出了多成分质量控制的理念，量的优劣，由此提出了多成分质量控制的理念，通过多指标同步质量控制反映中药质量已成为众通过多指标同步质量控制反映中药质量已成为众多专家学者的共识。多专家学者的共识。4 传统多指标同步质量控制必然要求众多中药传统多指标同步质量控制必然要求众多中药对照品，为实现在中药对照品紧缺、成本高昂的对照品，为实现在中药对照品紧缺、成本高昂的条件下的多指标同步质量控制，条件下的多指标同步质量控制，王智民等于王智民等于2006 2

3、006 年首次提出了年首次提出了一测多评法一测多评法(Quantitative (Quantitative Analysis of Multi-components by Single- Analysis of Multi-components by Single- makermaker，QAMS) QAMS) ，该法可以通过测定易得、价廉、，该法可以通过测定易得、价廉、有效的一个成分（作为内参物），实现多个成分有效的一个成分（作为内参物），实现多个成分含量的同步测定，在降低检测成本的同时解决了含量的同步测定，在降低检测成本的同时解决了对照品不足的问题，日渐成为中药质量评价的新对照品不足的问题

4、，日渐成为中药质量评价的新模式。模式。 5 该方法已在多种中药材、饮片以及中药制剂该方法已在多种中药材、饮片以及中药制剂的多成分含量测定中得到广泛认可和应用，并收的多成分含量测定中得到广泛认可和应用，并收载于载于2010 2010 年版年版中国药典中国药典( ( 一部一部) )。 QAMS QAMS不仅可应用于中药新药的多成分质量研不仅可应用于中药新药的多成分质量研究，也适用于企业对多成分中药类上市产品，特究，也适用于企业对多成分中药类上市产品，特别是对别是对其中间产品进行准确、快速检测其中间产品进行准确、快速检测，同时检同时检测成本也可大大降低测成本也可大大降低。所以，。所以，QAMSQAM

5、S是值得推广应是值得推广应用的科学测定法用的科学测定法。62.中药制剂质量控制 中药质量控制是保证中药用药是否有效和安中药质量控制是保证中药用药是否有效和安全的关键因素之一，而其研究思路与方法的科学全的关键因素之一，而其研究思路与方法的科学性和现实可操作性决定了其实际控制能力的高低性和现实可操作性决定了其实际控制能力的高低和执行是否有效。和执行是否有效。 中药质量控制中用到的内参物大多是植物次中药质量控制中用到的内参物大多是植物次级代谢产物。活性次级代谢产物是中药发挥其治级代谢产物。活性次级代谢产物是中药发挥其治疗作用的物质基础，因而也是进行质量控制的切疗作用的物质基础，因而也是进行质量控制的

6、切入点和关键所在。入点和关键所在。73 一测多评法的概念、适用范围及其原理3.13.1一测多评法的概念一测多评法的概念一测多评法一测多评法(quantitative analysis of (quantitative analysis of multi-components by single-marker multi-components by single-marker ，QAMS)QAMS)是通过中药有效成分间存在的内在函数关系和比是通过中药有效成分间存在的内在函数关系和比例关系，通过测定中药中某个代表性成分（易得、例关系，通过测定中药中某个代表性成分（易得、廉价、有效）的含量，依据相对

7、校正因子可计算廉价、有效）的含量，依据相对校正因子可计算出该中药中其它多种待测成分（对照品难以得到出该中药中其它多种待测成分（对照品难以得到或难供应）含量，使其计算值与实测值符合定量或难供应）含量，使其计算值与实测值符合定量方法学要求的一种多指标同步质量控制方法。方法学要求的一种多指标同步质量控制方法。83.2 3.2 一测多评法的适用范围一测多评法的适用范围本方法适用于对照品难得或制备成本高或不本方法适用于对照品难得或制备成本高或不稳定的情况下同类多成分同时测定。稳定的情况下同类多成分同时测定。93 .3 3 .3 一测多评法的原理一测多评法的原理 在一定的线性范围，成分的量在一定的线性范围

8、，成分的量( (质量或浓度质量或浓度) )与检测器响与检测器响应成正比。应成正比。在多指标在多指标(s(s，a a，b b， ，i i， ) )质量评价时，质量评价时，以药材以药材( (或成药或成药) )中某一典型有效成分作内参物中某一典型有效成分作内参物(s)(s)，建立，建立内参物与其它待测成分内参物与其它待测成分(a(a，b b， ，i i， ) )间的相对校正间的相对校正因子因子(RCF(RCF，fsafsa，fsbfsb，fscfsc， ) )，按下式计算：，按下式计算： 公式公式(1)(1) 式中式中fsifsi为内参物为内参物s s对待测成分对待测成分i i的校正因子，式中的校正

9、因子，式中As As 为内参物对照品为内参物对照品s s 峰面积或峰高，峰面积或峰高，CsCs为内参物对照品为内参物对照品s s 浓浓度，度，Ai Ai 为某待测成分对照品为某待测成分对照品i i峰面积或峰高，峰面积或峰高，CiCi为某待测为某待测成分对照品成分对照品i i 浓度。浓度。10 在方法学建立时，主要是求出在方法学建立时，主要是求出内参物与各待测成分间的内参物与各待测成分间的RCFRCF，并把它作为一个常数用于含量测定中，并把它作为一个常数用于含量测定中 药典附录药典附录VID VID 3(3)3(3)。在测定含量时，内参物。在测定含量时，内参物( s) ( s) 的浓度可的浓度可

10、按常规方法按常规方法( ( 药典附录药典附录D) D) 进行测定进行测定( Cs);( Cs);应用应用RCF( fsaRCF( fsa，fsbfsb，fscfsc，) ) ，结合内参物，结合内参物( s) ( s) 实测值实测值CsCs，计算待测成分，计算待测成分( a( a，b b，i i，) ) 的浓度的浓度Ci,Ci,见公式（见公式（2 2）。）。 公式（公式（2 2） 式中式中Ai Ai 为供试品中待测成分为供试品中待测成分i i 的峰面积，的峰面积，Ci Ci 为供试品为供试品中待测成分中待测成分i i 的浓度，的浓度，As As 为供试品中内参物为供试品中内参物s s 的峰面积，

11、的峰面积，Cs Cs 为供试品中内参物为供试品中内参物s s的浓度，的浓度，fsifsi为内参物为内参物s s对待测成分对待测成分i i 的校正因子。的校正因子。114 一测多评法的应用4.1 4.1 芳香类成分芳香类成分芳香类化合物包括芳香类化合物包括黄酮类、香豆素、木脂素、黄酮类、香豆素、木脂素、蒽醌类等，一般具有较强的紫外吸收，能够蒽醌类等，一般具有较强的紫外吸收，能够很方便地用紫外检测器进行检测。很方便地用紫外检测器进行检测。124.1.1 4.1.1 黄酮类黄酮类 冠脉康胶囊由葛根、丹参等药材组成，葛根中的异冠脉康胶囊由葛根、丹参等药材组成，葛根中的异黄酮类成分黄酮类成分葛根素葛根素

12、、大豆苷元大豆苷元以及丹参中的酚酸类物以及丹参中的酚酸类物质质丹酚酸丹酚酸B B等等均为均为活性药理成分活性药理成分，其中以，其中以葛根素为内参葛根素为内参物较易得到物较易得到，而以丹酚酸，而以丹酚酸B B为内参物价格较高且供应不为内参物价格较高且供应不足。足。邹桂欣等以邹桂欣等以葛根素（异黄酮类）为内参物葛根素（异黄酮类）为内参物，建立，建立冠脉康胶囊中该成分与大豆苷元冠脉康胶囊中该成分与大豆苷元( ( 异黄酮类异黄酮类) ) 及丹酚及丹酚酸酸B( B( 苯丙素类苯丙素类) ) 的的CFCF，用相对校正因子计算大豆苷，用相对校正因子计算大豆苷元及丹酚酸元及丹酚酸B B的含量，与外标法实测值进

13、行比较，二者的含量，与外标法实测值进行比较，二者没有显著性差异。对不同品牌填料及不同长度的色谱没有显著性差异。对不同品牌填料及不同长度的色谱柱进行考查，评价一测多评法在中药复方制剂中的准柱进行考查，评价一测多评法在中药复方制剂中的准确性和科学性。确性和科学性。 134.1.2 4.1.2 香豆素类香豆素类 冯伟红等以秦皮为研究对象，以秦皮甲素为内参物，建立该成分与秦皮乙素、秦皮苷和秦皮素( 均为香豆素类) 的相对校正因子。秦皮香豆素一测多评法的计算结果与外标法实测值之间没有显著性差异，实验所得的CF可信。 杨芳等以欧前胡素为内参物，采用HPLC 建立其与异欧前胡素、氧化前胡素( 均为香豆素类)

14、 的相对校正因子，对川白芷实现一测多评。20批药材中3种香豆素含量的计算值与外标法实测值SD 5%，QAMS控制川白芷药材的质量是可行准确的。144.1.3 4.1.3 木脂素类木脂素类 贺凤成等以五味子为研究对象，采用HPLC 以五味子醇甲为内参物，建立其与五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素( 均为木脂素类) 的相对校正因子，并计算含量; 同时采用外标法测定13批五味子药材中4 个成分的含量。两种含量没有显著性差异，验证了一测多评法的准确性。15 4.1.4 4.1.4 蒽醌类蒽醌类 大黄蒽醌类成分如大黄素、芦荟大黄素、大大黄蒽醌类成分如大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚等化合物

15、的一测多黄酸、大黄酚、大黄素甲醚等化合物的一测多评研究报道较多。评研究报道较多。 张锴镔等以大黄素为内参物，采用张锴镔等以大黄素为内参物，采用QAMSQAMS测测定了新清宁片中大黄酸、大黄酚、大黄素甲定了新清宁片中大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚的含量。醚的含量。2020批新清宁片中批新清宁片中QAMSQAMS计算值与计算值与ESMESM实测值无显著性差异，实测值无显著性差异，SD SD 5%5%。张德培。张德培等选择相同的内参物和指标成分，对酒大黄等选择相同的内参物和指标成分，对酒大黄实现了一测多评。实现了一测多评。16 4.1.5 4.1.5 其他芳香类其他芳香类 孟江等以孟江等以6-6-姜辣素

16、为内参物，建立干姜中该姜辣素为内参物，建立干姜中该成分与成分与6 -6 -姜酚、姜酚、8 -8 -姜辣素及姜辣素及10-10-姜辣素姜辣素( (均为均为单苯环类单苯环类) )的相对校正因子，利用的相对校正因子，利用CFCF计算计算4 4种种成分的含量，同时采用外标法测定，两种测定成分的含量，同时采用外标法测定，两种测定结果间无显著差异。结果间无显著差异。2828批干姜中批干姜中4 4种单苯环类种单苯环类成分可以用一测多评法进行测定。成分可以用一测多评法进行测定。 刘智等以天麻素为内参物，建立其与对羟基刘智等以天麻素为内参物，建立其与对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛、巴利森苷苯甲醇、对羟基苯甲醛、巴利

17、森苷( (均为单苯均为单苯环类环类) )的的CFCF，对天麻药材实现了，对天麻药材实现了QAMSQAMS质量控质量控制。制。174.2 4.2 生物碱类成分生物碱类成分 生物碱类化合物分类比较复杂，生物碱类化合物分类比较复杂，QAMSQAMS文献中文献中报道的多为具有较强紫外吸收的报道的多为具有较强紫外吸收的异喹啉类、吲异喹啉类、吲哚类生物碱哚类生物碱等。等。 4.2.1 4.2.1 异喹啉类异喹啉类 QAMS QAMS 在小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小在小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小檗碱、药根碱等异喹啉类生物碱的含量测定檗碱、药根碱等异喹啉类生物碱的含量测定中研究报道较多。中研究报道较多。18

18、匡艳辉等以黄连药材为研究对象，建立小檗碱与巴马汀、匡艳辉等以黄连药材为研究对象，建立小檗碱与巴马汀、黄连碱、表小檗碱、药根碱的相对校正因子，并用该黄连碱、表小檗碱、药根碱的相对校正因子，并用该CF CF 进行含量计算。进行含量计算。2828批黄连药材和饮片中批黄连药材和饮片中5 5个生物碱的含量个生物碱的含量测定结果，一测多评计算值与外标实测值间无显著差异。测定结果，一测多评计算值与外标实测值间无显著差异。 QAMS QAMS 控制黄连药材和饮片的质量是准确可行的。该方法控制黄连药材和饮片的质量是准确可行的。该方法已经被已经被中国药典中国药典20102010年版年版( (一部一部) ) 收录，

19、作为黄连药收录，作为黄连药材质量控制的法定标准。材质量控制的法定标准。含有黄连的香连制剂含有黄连的香连制剂( ( 包括丸、包括丸、片、胶囊等剂型片、胶囊等剂型) )和黄连配方颗粒等中药制剂，也可以用和黄连配方颗粒等中药制剂，也可以用QAMSQAMS法测定其中小檗碱类异喹啉生物碱的含量。法测定其中小檗碱类异喹啉生物碱的含量。194.2.2 4.2.2 吲哚类吲哚类 宋亚芳等以吴茱萸为研究对象，建立吲哚类生物碱吴茱宋亚芳等以吴茱萸为研究对象，建立吲哚类生物碱吴茱萸次碱与吴茱萸内酯萸次碱与吴茱萸内酯( (柠檬苦素类三萜柠檬苦素类三萜) )和吴茱萸碱和吴茱萸碱( (吲哚吲哚类生物碱类生物碱) )的相对

20、校正因子，进行含量计算的相对校正因子，进行含量计算; ; 同时采用外同时采用外标法测定药材中以上标法测定药材中以上3 3种成分的含量，并比较种成分的含量，并比较QAMSQAMS计算值计算值与外标法实测值的差异。与外标法实测值的差异。1111批吴茱萸中两种成分含量的计批吴茱萸中两种成分含量的计算值与实测值无显著差异。算值与实测值无显著差异。20 4.2.3 4.2.3 哌啶类哌啶类 胡椒碱为哌啶型生物碱，该类生物碱本身没有共轭体胡椒碱为哌啶型生物碱，该类生物碱本身没有共轭体系，但胡椒碱结构中连有其他的芳香环，可用系，但胡椒碱结构中连有其他的芳香环，可用HPLCHPLC紫外紫外检测器检测。李岑等以

21、藏药当佐为研究对象，通过建立检测器检测。李岑等以藏药当佐为研究对象，通过建立内参物胡椒碱与其他内参物胡椒碱与其他3 3个指标成分间的个指标成分间的CFCF，对没食子，对没食子酸酸( ( 单苯环类单苯环类) ) 、羟基红花黄色素、羟基红花黄色素-A( -A( 黄酮苷类黄酮苷类) ) 、桂、桂皮醛皮醛( ( 苯丙素类苯丙素类) ) 的含量进行计算，的含量进行计算，实现了含量测定的实现了含量测定的一测多评。一测多评。21 4.3 4.3 萜类成分萜类成分按照所含碳原子数，萜类化合物可分为单萜、二萜、三按照所含碳原子数，萜类化合物可分为单萜、二萜、三萜等类别。这类次级代谢产物分子中一般没有较大的共萜等

22、类别。这类次级代谢产物分子中一般没有较大的共轭体系，因而轭体系，因而QAMSQAMS文献中一般采用文献中一般采用紫外区的末端吸收，紫外区的末端吸收，或结构中连有的其他共轭体系的紫外吸收进行测定或结构中连有的其他共轭体系的紫外吸收进行测定。22 4.3.1 4.3.1 单萜类单萜类 付滢舟等用气相色谱法，建立了付滢舟等用气相色谱法，建立了速效救心丸速效救心丸中莰烷类中莰烷类单萜成分异龙脑、左旋龙脑和右旋龙脑的单萜成分异龙脑、左旋龙脑和右旋龙脑的QAMSQAMS质控方法。质控方法。 以右旋龙脑为内参物，建立其与异龙脑、左旋龙脑的以右旋龙脑为内参物，建立其与异龙脑、左旋龙脑的相对校正因子，并进行含量

23、测定。相对校正因子，并进行含量测定。所建立的所建立的CFCF重现性重现性良好，一测多评法与现行标准方法的测定结果基本一致。良好，一测多评法与现行标准方法的测定结果基本一致。所建立的方法能测定以各种冰片投料生产的速效救心丸所建立的方法能测定以各种冰片投料生产的速效救心丸中的冰片含量。中的冰片含量。234.3.2 4.3.2 二萜类二萜类 半日花烷型二萜穿心莲内酯、新穿心莲内酯、去氧穿半日花烷型二萜穿心莲内酯、新穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯等是穿心莲的抗炎、抗病毒心莲内酯、脱水穿心莲内酯等是穿心莲的抗炎、抗病毒有效成分。有效成分。 林青等在建立穿心莲中以上林青等在建立穿心莲中以上4

24、4 种成分同步测定方法的种成分同步测定方法的基础上，测定内参物基础上，测定内参物穿心莲内酯穿心莲内酯与其余与其余3 3 种二萜的种二萜的CFCF，进行一测多评实验，并在穿心莲药材及其制剂消炎利胆进行一测多评实验，并在穿心莲药材及其制剂消炎利胆片中加以应用。对片中加以应用。对39 39 批穿心莲药材和批穿心莲药材和30 30 批消炎利胆片批消炎利胆片中中4 4 种二萜进行种二萜进行QAMS QAMS 测定，结果与外标法实测值均没有测定，结果与外标法实测值均没有显著性差异。显著性差异。 另外，王贞媛等选择以上相同的另外，王贞媛等选择以上相同的4 4种二萜指标成分，种二萜指标成分，以以脱水穿心莲内酯

25、脱水穿心莲内酯为内参物，对穿心莲片实现了一测多评。为内参物，对穿心莲片实现了一测多评。24 4.3.3 4.3.3 三萜类三萜类 朱晶晶等建立了人参皂苷朱晶晶等建立了人参皂苷b1b1与其他与其他8 8种皂种皂苷，包括人参皂苷苷，包括人参皂苷g1g1、e e、f f、h1h1、c c、b2b2、b3b3、d( d( 均为达玛烷型三萜均为达玛烷型三萜皂苷皂苷) ) 间的相对校正因子，实现只用一个对间的相对校正因子，实现只用一个对照品测定人参和三七中多个人参皂苷类成分照品测定人参和三七中多个人参皂苷类成分的含量，的含量，解决了质量控制中对照品供应不足解决了质量控制中对照品供应不足问题。所建立的问题。

26、所建立的CF CF 可同时用于人参、三七可同时用于人参、三七及其相关产品的定量分析及质量评价。及其相关产品的定量分析及质量评价。25 4.4 4.4 长链脂肪族类成分长链脂肪族类成分李桂秀等采用李桂秀等采用HPLCHPLC以党参药材中党参炔苷以党参药材中党参炔苷( ( 长长链脂肪族苷类链脂肪族苷类) ) 、党参苷、党参苷IV(IV(苯丙素苷类苯丙素苷类) ) 和苍和苍术内酯术内酯III( III( 桉烷型倍半萜桉烷型倍半萜) ) 为指标，建立党参为指标，建立党参炔苷与另外两种成分间的相对校正因子，并用炔苷与另外两种成分间的相对校正因子，并用所建立的所建立的CFCF计算含量。结果表明该药材中计算含量。结果表明该药材中3 3 种专属性成分可以用种专属性成分可以用QAMSQAMS进行测定，实测值与进行测定，实测值与计算值间没有明显