动物细胞工程―单克隆抗体制备复习策略_第1页
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文档简介

1、3.3.培养基是用液体的还是固体的？培养基中的成培养基是用液体的还是固体的？培养基中的成分有何特点？分有何特点？2.3.单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备 医院一般怎样检测人体内是否存在乙肝病毒？医院一般怎样检测人体内是否存在乙肝病毒？ 抗体抗体 细胞两两融合后，有哪细胞两两融合后，有哪些类型？些类型？ 阳性孔阳性孔 抗体抗体 抗原抗原 应答应答 抗体的不纯性抗体的不纯性 动物细胞受到抗原刺激动物细胞受到抗原刺激, ,引起免疫反应产生的球蛋白引起免疫反应产生的球蛋白. .不是自己的而又能引起免疫应答反应的物质就是抗原不是自己的而又能引起免疫应答反应的物质就是抗原. .一种抗原有多种不同的决定簇一

2、种抗原有多种不同的决定簇, ,刺激的是多种刺激的是多种B B细胞细胞, ,作用于作用于不同的不同的B B细胞后细胞后, ,会产生多种抗体会产生多种抗体, , 这是多克隆的这是多克隆的, , 故不纯故不纯! ! 抗原抗原 B B细胞细胞浆细胞浆细胞 抗体抗体 刺激刺激 怎么才能得到纯的抗体怎么才能得到纯的抗体? ? 光纯还不行光纯还不行, ,还要大量还要大量. .怎么办怎么办? ? 但，有但，有问题问题: : 找，什么细胞能无限繁殖呢找，什么细胞能无限繁殖呢? ? 思路就出来了思路就出来了: :要想获单一的纯抗体要想获单一的纯抗体, ,就必须从一个就必须从一个B B细胞出发细胞出发. .让让B

3、B细胞大量繁殖细胞大量繁殖( (克隆克隆) )就可以产生大量抗体了就可以产生大量抗体了. .B B细胞是不能无限繁殖的细胞是不能无限繁殖的. .怎么办怎么办? ?癌癌! ! 只有癌细胞只有癌细胞. . 但它不能产生抗体但它不能产生抗体. .癌细胞能无限繁殖癌细胞能无限繁殖, ,但不能产生抗体但不能产生抗体.B.B细胞能产生抗体细胞能产生抗体, ,但不能大但不能大量繁殖量繁殖. .融合呀融合呀! !只要将两个细胞融合即可互补只要将两个细胞融合即可互补. . 杂交瘤细胞杂交瘤细胞 HAT筛选筛选大量培养大量培养PEGPEG诱导细胞融合诱导细胞融合B 脾脾骨髓瘤骨髓瘤瘤瘤 问题问题: : 在培养体系

4、中在培养体系中, , 有有4 4种细胞种细胞. B. B细胞、瘤细胞细胞、瘤细胞, ,和杂交细胞。和杂交细胞。 我们还是拿不到我们还是拿不到McAbMcAb, ,怎么办怎么办? ? 筛选！筛出杂交瘤细胞。怎么筛筛选！筛出杂交瘤细胞。怎么筛? ? 又是一个思路问题。又是一个思路问题。 关键一步关键一步 结合同位素的单抗结合同位素的单抗-生物导弹生物导弹图中图中B为为_过程，过程，常用常用_作为诱导剂作为诱导剂，该细胞继承，该细胞继承_的遗传特性，既能的遗传特性，既能_,又能又能_ 。B体外培养体外培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群足够数量的细胞群注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔AC 图10黑面绵羊去黑面绵羊去核卵细胞核卵细胞白面绵羊卵白面绵羊卵腺细胞

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