格列齐特生物粘附缓释片的研制及其体内体外评价_图文

1、按照中国药典年版二部的要求，对初步确定的色谱方法进行专属性、线性及耐用性等方法学验证，明确了各主要杂质的柃测限及样品配制方法，最终建立了本品有关物质的检查方法。实验表明，本方法灵敏度好，准确度高，专属性好可用于头孢特仑新戊酯有关物质的检查。参考文献日本药局方注释。国家药典委员会，中华人民共和围药典（二部），北京：化学工业出版社，。袼列齐特生物粘附缓释片的研制及其体内体外评价张毕奎“苏芬丽向大雄“朱运贵“谭建国李焕德中南大学湘雅二医院临床药学研究室湖南长沙：中南大学药学院长沙湖南于金药业有限公司，湖南株洲摘要目的制备格列齐特生物芈占附性缓释片，考察其体外释药行为，离体组织粘附力，以及在犬体内的药

2、动学。方法：以羟丙基甲摹纤维素（）和卡波姆（，）为生物粘附材料和骨架材料，乳糖为稀释剂制备生物粘附忖缓释片。以磷酸赫缓冲液（）为溶出介质，测定生物粘附性缓释片、和时的溶出度。以自制粘附力测定装置测定、比较格别齐特牛物枯附性缓释片及格列齐特（）片对家兔离体胃、肠组织的枯附力。采用法测定犬血浆中的格列齐特浓度，研究格列齐特生物粘附性缓秆片与格列齐特（）片在犬体内的药代动力学和相对生物利用度。结果：生物聿占附忤缓释片体外释放符合缓释制荆要求，其与家兔离件胃、肠组纵的粘附力明显大于普通片剖且与肠的粘附力大于与胃的粘附力。药动学及生物利用度研究表明生物粘附性缓释片和格列齐特（）片均为一室开放模型，犬单次

3、口服格列齐特牛物粘附缓释片与格列齐特（）片后主要药代动力学参数无届著羊异，终过剂量换算，格列齐特生物粘附缓释片对格列齐特片的相对生物利用度为±。结论：格列齐特牛物柚附缓秆片的处方、工艺基本能够满足设计要求。格列齐特生物粘附缓释片在胃、肠道具有较强的的车占附作用，利用生物枯附技术可以提高情列齐特的生物利用度。关键词格列齐特；生物粘附缓释片：粘附力；药代动力学，相对生物利用度格列齐特足目前治疗型糖尿病的主要口服降糖药物之一。目前常用于临床的格列齐特制剂为格列齐特（达美康），为一具有一定缓释特性的片剂，每日只需给药次，但其生物利用度低，仅为格州齐特普通片的左右。近年法国施维雅推出了格列齐特

4、胃漂浮缓释制剂，每片，每口次，控制血糖效果可维持。胃漂浮片可以延长药物在胃肠道中的停留时间，有可能增加药物的吸收，但胃漂浮片存机体内受食物、饮水及体位的影响较大。胃肠道生物粘附（）制剂是近年来研究较多的新型给药系统，它仅能延长药物制剂在胃肠道的滞留时间，还能增加药物与吸收粘膜的接触，改变细胞膜的流动性，增加药物对小肠上皮细胞的穿透力。因而，可以促进药物的吸收，提高生物利用度”。本研究利用生物粘附技术，在国内首次制备了格列齐特生物粘附性缓释片，并对格列齐特生物粘附性缓释片释药特征、体外组织粘附力进行了较系统的研究。材料与仪器格列齐特对照品（中国药品生物制品检定所，批号：）；格列吡嗪对照品（中国药

5、品生物制品检定所）；格列齐特原料（干金湘江药业有限公司）；羟丙基甲基纤维素（，上海卡乐康包衣技术有限公司惠赠）：卡波姆（，北京公司）：乳糖（湖州食品化工联合公司）；硬脂酸镁（湖州食品化工联合公司）；聚维酮（。，中国医药集团上海化学试剂公司）；其它辅料均为药用级。甲醇（色谱纯，）；乙睛（色谱纯，）；冰醋酸（分析纯，湖南师范大学化学试剂厂）：水为重蒸馏水。其它试剂均为国产分析纯（级）。家兔（中南大学湘雅二医院提供），体重雌雄不限；健康犬只，雌雄各半，体重砖。格列齐特生物粘附缓释片（自制）；格列齐特片（达美康，法国旌维雅药厂、天津华津制药厂合作生产，批号：）；岛津一系列高效液相色谱仪：一智能药物溶出

6、仪（天津大学无线电厂）：紫外分析仪（上海分析仪器厂）；分析天平（德国赛多利斯）。型花篮式单冲压片机（上海三利制药装备有限公司）：，计（上海雷磁仪器厂）。方法与结果格列齐特生物粘附缓释片处方根据文献”“及正交实验结果确定格列齐特生物粘附缓释片基本处方为：格列齐特，羟丙基甲基纤维素（），卡波姆（），乳糖，乙醇溶液适量硬胎酸镁，共制成片。其中格别齐特为主药，、为骨架型生物粘附材料，乳糖为致孔剂，乙醇溶液为粘合剂，硬脂酸镁为助流剂、润滑剂。制各方法按处方量将主药及各辅料分别过目筛，混匀，喷雾加入乙醇溶液适量，制软材，过目筛制粒，。干燥小时，整粒，加入约硬脂酸镁，混匀，用荦冲压片机制成约，的片剂。释放度

7、测定参照中国药典年版二部“格列齐特片”项下方法对缓释片刹进行检查。取样品，照溶出度测定法（中国药典年版附录第一法），以磷酸盐缓冲液（）为溶剂，转速每分钟转，依法操作，在、和时各取样，滤过，续滤液作为供试品溶液，并即时补充磷酸盐缓冲液（）。另精密称取在。干燥小时的格列齐特对照品，置量瓶中，加磷酸盐缓冲液（）适量，置温水浴中振摇使格列齐特溶解，放冷，用磷酸盐缓冲液（）稀释至刻度，摇匀取置量瓶中，用磷酸盐缓冲液（）稀释至刻度。照分光光度法（中国药典年版附录），在波长处分别测定吸收度，分别计算出每片在上述个时间点的累积释放量。洲定结果见图。图一格列齐特牛物粘附性缓释片释药曲线一牯跗片琶铸一枯附片鑫稻一

8、粘附片塞嚓一格列齐特释放时问（）体外组织粘附力实验为考察格列齐特缓释片是否具有生物粘附性，以及其与格列齐特片（）粘附特性的差异，以家兔离体胃、肠组织为粘附对象，以自制粘附力测定装置“分别测定格列齐特片（）与格列齐特生物粘附缓释片（批号：）在肠组织中的粘附力及格列齐特生物粘附性缓释片在胃和肠组织中粘附力的差别，结果见表及表。表普通片与生物粘附缓释片在肠组织中粘附力比较实验样品实验次数平均值（）格列齐特片（）生物粘附片：三二！韭堑！”与普通片比较。表胃、肠组织粘附力比较实验样品实验次数（）平均值（）胃小肠”与胃粘附力比较犬体内的药动学和相对生物利用度研究试验分组及给药采用双周期交叉试验设计。将条受

9、试犬随机等分成两组，第组（试验号号）先喂服受试制剂（格列齐特生物粘附性缓释片），后喂服参比制剂（格列齐特片），第组（试验号号）先喂服参比制剂，后喂服受试制剂。实验前禁食小时，于清晨：给药，整片吞服。给药小时后投食少油脂食物，小限饮水。于服药前和服药后，抽取前肢静脉血各。周后交叉服药，同时间点取血。血样置含有肝素的离心管中，立即离心，分离出血浆，供血药浓度测定。犬血浆药物浓度测定方法标准液的配制精密称取格列齐特对照品，置容量瓶中，用甲醇配制格列齐特标准贮备液（。），置冰箱中保存，使用时用流动相稀释至所需浓度。另精密称取格列吡嗪对照品，置容量瓶中，用甲醇配制格列吡嗪标准液（。），作为内标。色谱条件

10、色谱柱：柱（，）：柱温：。流动相：，：醋酸溶液（：）；流速；。检测波长：。样品处理血浆室温解冻后，高速离心（），取上清液置预先用甲醇和水活化过的小柱中，样品以约的流速通过柱，抽真空至，保持，然后依次用蒸馏水和甲醇各清洗杂质，最后用甲醇洗脱，收集洗脱液，加入内标溶液（格列毗嗪）¨，置。水浴中用氮气吹千，残渣用流动相溶解，进样，内标法定量。图图、分别为标准溶液、空白血样、空白血样中加入标准品和受试者服药后血样的色谱图。格列齐特的保留时间约为，内标的保留时间约为，血浆内源性物质及其它杂质不干扰样品的分离测定。兰；图格列齐特对照品色谱图望宝图服药前空白血样色谱图竺石盥图空白血样加入对照品色谱

11、图苎望石日图服药后血样色谱图线性范围和最小可定量浓度用空白血浆将格列齐特标准贮备液稀释成，的系列浓度溶液，按样品处理方法处理并测定，以格列齐特峰面积与内标峰面积之比对浓度进行线性回归。得回归方程为：“（），。线性范围，最小可定量浓度为。以，至计算，方法的最低检测限约为。配制含格列齐特浓度分别为低、中、高个浓度（、）标准系列血样各；按“血浆样品处理”项下操作，记录格列齐特和内标峰面积。另配制含格列齐特浓度分别回收率及精密度、一，内标浓度为雌“的流动相溶液子，进样，记录格列齐特和内标峰面积。比较血浆样品和流动相样品的峰面积，计算格列齐特和内标的苹取回收率分别为和。取空白血浆及对照品溶液，按“线性范

12、围和最小可定量浓度”项方法制备格列齐特低、中、高三个浓度（、）的质量控制（）样品，每一浓度甲行操作份，代入线性方程汁算浓度，以测得值与加入值的比值计算回收率，并计算日内精密度。连续天配制并测定上述浓度样品，考察方法日问精密度。结果方法的回收率均在之内，内、日间均小于。符合药动学及生物等效性研究的方法学要求。血药浓度测定结果只犬单剂量口服格列齐特生物粘附缓释片或格列齐特片后经时血药浓度数据分别见图。：詈）图犬单剂量口服格列齐特两种片剂的平均血药浓度一时问曲线药动学研究结果用药学与统计软件对血药浓度时间数摒进行药动学批处理计算，进行权重选择时为了能兼顾高、低数据，选择权重为。分别计算以一室、二室模

13、型拟合得到的曲动学参数，取值较小的房室数，结果犬单剂量口服格列齐特生物粘附缓释片或格列齐特片后均以一室模型拟合为佳。汁算土要的药动学参数见表。参数（）（）、曙蛆（格列齐特生物桔附缓释片±±±±格列齐特片±值±±±±±±±±±±，±±（）±相对生物利用度由于两制剂给药剂量不一致，为了比较其相对生物利用度，探讨生物粘附性缓释片对格列齐特生物利用度的提高作用，按下列公式计算相对生物利用度。相对生物利用度（缮×）（

14、×）×其中。采用统汁矩参数。结果见表。查！盔兰型童！垦皇竺塑堕丝堡堕！坐鱼整型查壁旦墨！堕盟塑堕圭堑型旦壁堕兰竺！竺！竺！丝！丝！竺！塑墼堡垄墨为了考察单剂量口服格列齐特生物粘附缓释片是否与格列齐特片相当，将统计矩参数。、。、一。不经过剂量换算，经对数转换后进行药物问、周期间、个体间的素方差分析，再将。胍、。以双单侧检验进行生物等效性判断。结果蒯期间均无差异（），个体问除。外均有显著差异（）；两种剂型之间、。无差异（），“均有显著差异（）。双单侧检验结果，一。等效，。不等效。 讨论 生物粘附技术近年来获得了广泛应用。和不仅均是缓释制荆的骨架利料，同时还具 有生物粘附性能。这

15、些高分子材料与胃肠组织之间的粘附力可以减小胃肠蠕动对药物颗粒的推动作用，延 长药物在胃肠道的停留时问，保证缓释制剂药物充分释放，同时生物粘附作用还能增加药物与吸收膜之问 的接触，促进药物吸收，因而刖能提高难溶性药物的生物利用度。 根据本生物粘附缓释片设计要求，临床设计的剂量为每日只需给药次，由于格列齐特半衰期为 小时左右，缓释片应该缓慢释放达到小时以上，才可能使药效维持小时，冈此将、的释 放度分别控制在、大丁 。上述结果表明本品处方、工艺基本满足缓释制剂对 释放度要求。 ， 本实验参考有关文献”，采用自制的粘附力测定装置测定动物离体组织对制剂的粘附力，方法简单， 重现性较好，适合胃肠道牛物粘附

16、制剂的处方筛选。制备的格列齐特生物粘附性缓释片对胃及肠组织均有 较大的粘附力，其对肠组织的粘附力与格列齐特片比较仃非常显著性差异（），说明用 和作为牛物粘附材料是可行的。格列齐特生物料附性缓释片对肠的粘附力大丁对胃的粘附力 （），说明的变化对粘附力的改变影响较大，町能与处方中和的用量较大有关， 后者在较高时粘附力最大。 单次口服格列齐特生物粘附缓释片与格列齐特片后药代动力学参数。 及。兀显著差异，经过剂量换算，格列齐特生物粘附缓释片对格列齐特片的相对生物利用度 为±，说明生物粘附技术明显提高了格列齐特的生物利用度。 单剂量口服格列齐特生物粘附缓释片后。明显低于单剂量口服格列齐特片，明

17、 显延长，进一步说明生物粘附技术延缓了药物的释放，使格列齐特在体内的血药浓度电趋半稳。 参考文献 【】刘皋林，陈强，李珍等国产和进口格列齐特体外溶出体外溶出度测定及其药物动力学特性比较第二军医大学学 报，（）： 】 ， ， ：（）： 【】 ， ，（ ；： 【】丁劲松，蒋学华胃肠道中物粘附制剂殷其计价乃法中困约房， （）： 【】向大雄，李焕德罗杰英等葛根总黄酮生物车占附件缓释片体外组织粘附力及释放度研究中国药房， （）： 【】周寅琦，张文玉，削翔替硝唑腔粘附片的牛物粘附性和体外释药列究中国药科大学学报（）： 【】许飞，张毕奎，李泓浒崮相葶取结介高效液相色谱刈、测定人血浆中格列齐特浓度中国曲虏，（）： 关于提升我国医药产业集群竞争力的思考 厉李李野杨悦 沈阳药科大学工商管理学院沈阳 摘要目的：探讨直¨何提高我国医药产业集群竞争力，从而提高我田医药产业的发展。方法：分析了我国目前医药产业情