平板划线法操作要点

1、平板划线法操作要点平板划线法操作步骤1. 操作祈准备：将接种环 2支，酒精灯 2个,打火机 2个，无菌平板两包，酒精棉球 2瓶，锻子 2个,洁 净烧杯 2 个置于超净工作台，打开紫外灯， 灭葡 30 分钟。取待纯化菌种 2 支放入超净 工作台。操作者直 立坐于操作台前，打开操作台玻璃，离度可供双手顺利出入即可。2. 擦拭：用檢子取酒箱棉球擦拭双手，在超净工作台门口处，并舟台面擦出与肩同宽的正方形区域，此区域即为操作区域。将用毕的棉球放入烧杯中。3?物品摆放：将酒精灯放于擦拭区域的中心，舟接种环放于酒箱灯的右侧，将菌种放于酒精灯的左侧，将无菌平板的包装除去，包装置于操作区外，无菌平板置于酒精灯左

2、侧。4. 点燃酒精灯：打开酒精灯盖，将盖扣于离开操作区的台面上，点燃酒精灯，酒精灯周围3 -5 cm 之内即为无苗区。5. 灼烧接种环： 右手持接种环门车接种环的金属丝直立于酒精灯外焰处， 灼烧至红透，然后略 倾斜接种 环，灼烧金属杆，注意灼烧时要将金属丝与金属杆的连接部分充分灼烧。6. 取菌种：左手持斜面的底部，将管口置 . 于火焰的无菌区，右手小指打开试管塞，将接种环的接种丝放于外焰处再次灼烧至红透，然后将其深入试管内部，稍微凉一下，轻轻取一环，勿划 破培养基，将接 种环从试管中取出，注意取时勿碰触试管壁。将试管塞灼烧一圈，塞于试管上。 因试管口一直在火焰的 外焰处，故其温度较高，塞试管塞

3、时注意勿烫手。7. 接种：左手取无苗平板一个，用拇指和仓指控制皿盖，其余几指控制皿底，打开皿盖，使开口 角小于 30°，将接种环上的葡种按图示进行划线，一区法要求连续划线，且线的边缘应划至培养皿的内缘，线要紧密但不相连。三区或四区法要求每划完一区，都应灼烧接种环，后一区 要求与前一区首尾相连，但不 得与其他区域搭在一起。8. 培养：将接种完毕的平板放于 28 C 恒温培养箱中倒置培养 72 小时。9. 整理台面：操作完毕后，将实验所需的物品放回原处，并将实验所产生的垃圾清理干净， 带出超净 台，放于垃圾桶中。10. 结果观察： 72 小时后，观察平板，应无杂菌污染，若菌种不在划线的线

4、上则为杂葡；线应为 直的， 且每一线都接近平板边缘，平行的线和线之间要绘密，但不能搭在一起：要有较多的 单菌落，至少应有 10 个以上的单菌落方为合格。平板划线法揀作要点操作步骤操作要点操作前准备物品齐全（操作过程中不得从超净台外拿取任何物品），放入超净工作台靠近紫外灯处，紫外灭苗30分钟后，将菌种放入。擦弑棉球取用：檢子。擦弑部位：双手与台面（与肩同宽的正方形区域，为操作区）。要求：彻底但不重复。废弃棉球置于烧杯中。物品摆放酒精灯放于操作区中心，左侧放葡种，无菌平板，右侧放接种环，右侧操作区外放打火机。点燃酒精灯打开酒箱灯盖，舟其盖放于右侧。用打火机点燃酒箱灯，酒箱灯周 ？ 3-5 cm内为

5、无 菌区，下述试管和培养皿开口时，其开口处必须在无筋区内，接种环 取菌时也应在无 苗区内。灼烧接种环右手持接种环，將接种环的金属丝直立于酒箱灯外焰处，灼烧至红透，然后略倾斜接种环，灼烧金属杆，注意灼烧时要将金属丝与金属杆的连接部分充分灼烧。取菌种左手持斜面的底部，将管口置于火焰的无葡区，右手小指打开试管塞，将接种环的接种丝放于外焰处再次灼烧，然后將其深入试管内，稍微凉下，轻轻取环，勿划破培养基，將接种环从试管中取出，注意取时勿碰触试管壁。将试管塞灼烧 圈，塞于试管上。因试管口一直在火焰的外焰处，故其温度较咼，塞试管塞时注意勿烫手。接种左手取无菌平板一个，打开皿盖，使开口角小于 45° ,开口处在无菌区內，将接种环上的菌种按图示进行划线，一区法要求连续划线，且线的边缘应划 至培养皿的内缘， 线要紧密但不相连。三区或四区法要求每划完一区，都应 灼烧接种环，后一区要求与 前 区首尾相连，但不得与其他区域搭在 起。培养将接种完毕的平板放于37° C恒温培养箱中倒置培养24小时。整理台面操作完毕后，将实验所需的物品放回原处，并將实验所产生的垃圾清理干净，带出超净台，放于垃圾桶中。结果