胆炎康片对主要研究结果的总结及评价

1、中药注册分类8 申报资料4对主要研究结果的总结及评价 (胆炎康片)课题名称 胆炎康片研究单位 申报单位 联 系 人 联系方式 对主要研究结果的总结及评价一、工艺研究的试验资料(一)药材的分拣去杂质及质量验收 处方中各有关药味经分拣去杂质，按有关法规检验；辅料按中国药典20xx年版二部有关规定检验；符合规定者备用。(二)配料与掺混符合规定的药材根据生产批量大小，按处方称量配伍，分开放置，分别掺混。 (三) 粉碎根据生产工艺需要，将需粉碎药材土大黄、黄芩用中药粉碎机粉碎，过80目筛，备用。经对三批中试产品粉碎工艺考查，结果表明常规粉碎方法即可符合本品生产需要。(四) 提取工艺研究提取药材为连钱草、

2、虎耳草、小花清风藤、凤尾草、黄柏、穿心莲。根据各药味所含成分的理化性质，适宜采用水提取，故采取正交试验优化水提取工艺条件。取提取药材适当破碎，按原处方量配伍，制备工艺正交试验用样品。每正交试验样品药材重1200g，其中连钱草200g、虎耳草200g、小花清风藤200g、凤尾草200g、黄柏200g、穿心莲200g。表1、 因素水平表 L9（34）正交表头水平因素因 素A加溶剂量（倍） B提取时间（小时） C提取次数（次） 12310 1 1 8 2 2 6 3 3 表2、正交试验设计表试验号因 素A加溶剂量（倍） B提取时间（小时） C提取次数（次） 12345678910 1 1 10 2

3、2 10 3 3 8 1 2 8 2 3 8 3 1 6 1 3 6 2 1 6 3 2 取每正交试验样品1200g，依表2设计加溶剂量、提取时间、提取次数，分别提取，放冷，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.201.25(80)的清膏，减压干燥，恒重，以干膏量中盐酸小檗碱的总量作为评价指标。表3、正交实验结果评价表试验号因 素评价指标A(倍) B(小时) C(次) 干膏量（g）盐酸小檗碱含量(mg/g)盐酸小檗碱总量(mg)12345678910 1 1 10 2 2 10 3 3 8 1 2 8 2 3 8 3 1 6 1 3 6 2 1 6 3 2 63.8103.8107.285.

4、293.169.185.157.684.2 63.07 43.6643.4042.2741.5351.5935.9250.3438.574023.874531.914652.483601.403866.443564.873056.792899.583247.59K1K2K313208.26 10682.06 10488.3211032.71 11297.93 11380.90 9203.96 11464.94 11575.71k1k2k34402.75 3560.69 3496.113677.57 3765.983793.633067.99 3821.653858.57R1334.76260.

5、96362.46 由上述极差分析数据表明：溶剂的倍数为显著因素，其次为提取次数，提取时间，即A>C>B，最佳提取方法为A1B3 C3，由于B2和B3 、C2和C3相差甚微，考虑到实际生产中能源问题，拟采用加水10倍量，提取二次，每次2小时。 确证实验：取两份确证实验样品，每份样品中 连钱草200g、虎耳草200g、小花清风藤200g、凤尾草200g、黄柏200g、穿心莲200g，适当破碎，加水10倍量，提取二次，每次2小时。滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.201.25(80)的清膏，减压干燥，恒重，以干膏量中盐酸小檗碱的总量作为评价指标。结果表明：加水10倍量，提取二次，每

6、次2小时的提取方法与最优方法相当，且重复性良好。（五）成型工艺条件的选定1制粒工艺选择：根据原标准和本公司多年的生产经验，结合常规制粒操作，拟选用浸膏和药粉直接混合制粒的方法。结果用清膏作粘合剂，14目筛制粒能获得适宜的颗粒，采用6080常压干燥方法干燥，颗粒含水量控制在57%，12目筛整粒后能够得到理想的片芯。2压片工艺由于本品的颗粒流动性较差，外加0.5%硬脂酸镁作助流剂，选用直径为12mm的浅平冲头压片，理论片重定为0.50g。压片，结果：成型性好，硬度适中，脆碎度0.2%，符合包衣条件。3包衣与糖衣片相比，薄膜衣片有明显的优势：成膜性好、衣层坚硬稳定、色泽亮丽、光洁细腻、防潮防湿、崩解

7、时限短、增重少、生产成本低、操作时间短、劳动效率高，无粉尘飞扬，有利于劳动保护等优点，特别是薄膜衣片不含糖，糖尿病患者也可使用。故胆炎康片定为薄膜衣片。高效包衣操作方法及技术参数：包衣液配制筛去素片中的细粉及残片将素片置高效包衣机内，开启主电机，转速控制在1-3转/分，开启热风，片芯预热至40-45摄氏度。开启喷液系统，调整好喷枪高度，包衣液流量，雾化压力，在喷雾过程中片床的温度保持在3540(此时锅速为35转/分)。待片面包匀一层衣后，调节锅转速为69转/分，继续操作，直至将包衣液喷完、吹干。包衣结束后，将包好的薄膜衣片置凉片室干燥。包衣材料采用xxxx药用辅料有限公司生产的胃溶型薄膜包衣粉

8、（批准文号为x药准字F20xxxxxx），按常规高效包衣工艺操作，可以得到理想的成品。以上八味，土大黄、黄芩粉碎成细粉，其余连钱草等六味，加10倍量水提取二次，每次2小时，合并滤液，浓缩至相对密度为1.201.25(80)的清膏，加入上述细粉，混匀，制粒，干燥，加入硬脂酸镁，压片，包薄膜衣，即得。 (六)三批中试生产考核工艺稳定性取处方十倍量药材，在中试设备上试验，考核工艺稳定性，三批数据表明，工艺稳定，具可重复性和再现性。根据中试制成品量，确定本品每处方量制成1000片。二、质量研究的试验资料及文献资料胆炎康胶囊收载于国家药品监督管理局国家中成药标准汇编（中成药地方标准上升国家标准部分 内科

9、 肝胆分册），胆炎康片是根据胆炎康胶囊改变剂型的中药8类新药（减免临床研究），为了实施胆炎康片的质量标准研究，将成型工艺中制备的样品（批号：xx1103）用于质量标准研究，现将质量标准起草说明报告如下：【名称】 胆炎康片 【处方】 除辅料外，与原剂型标准一致。【制法】 除成型工艺外，与原剂型标准一致。【性状】 依三批中试产品的实际性状描述。【鉴别】 (1)为处方中连钱草的薄层色谱鉴别，经与连钱草对照药材、熊果酸对照品、缺连钱草阴性对照样品对照，斑点显色清晰，Rf值适宜，专属性强。予以采用。本鉴别项与原剂型标准一致。（2）为处方中黄芩的薄层色谱鉴别，经与黄芩对照药材、黄芩苷对照品、缺黄芩阴性样品

10、对照，在与对照药材及对照品相应的位置上显相同颜色的斑点，斑点显色清晰，Rf值适宜，专属性强。予以采用。本鉴别项与原剂型标准一致。（3）还进行了黄柏的薄层色谱鉴别，参考文献，取本品10片，除去包衣,研细，取1g， 加甲醇10ml，加热回流30分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液。同法制成对照药材和缺黄柏阴性样品溶液。再取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg的对照品溶液。吸取上述溶液各10µl点于硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（10:6:1:1）或正丁醇-醋酸-水（7:1:2）为展开剂，置氨蒸汽预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm

11、）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，阴性样品有干扰，本品中黄柏暂未找到具特异性的薄层色谱鉴别方法。（4）还进行了穿心莲的薄层色谱鉴别，参考文献，取本品10片，除去包衣,研细，取2g， 加乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，作为供试品溶液。同法制成对照药材和缺穿心莲阴性样品溶液。再取穿心莲内酯对照品、脱水穿心莲内酯对照品适量，加无水乙醇制成每1ml各含1mg的混合溶液,作为对照品溶液。吸取上述溶液各5µl点于硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-乙醇（2:1）或三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇（4:3:0.4）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光

12、灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，斑点不清晰，专属性不强,本品中穿心莲暂未找到具特异性的薄层色谱鉴别方法。【检查】依照中国药典20xx年版一部附录( L)的有关规定对三批中试产品检查，均符合药典有关规定。 此项与原剂型标准一致。重金属 三批中试产品重金属均低于百万分之五，暂不设定重金属检查项。砷盐检查 三批中试产品砷盐均低于百万分之二，暂不设定砷盐检查项。【微生物检查】依中国药典20xx年版一部附录（ C）的有关规定对三批中试产品检查，均符合药典有关规定。此项是根据中国药典20xx年版一部与历版药典的不同而增加的。【含量测定】 照高效液相色谱法(中

13、国药典20xx年版一部附录VI D)测定。 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.4磷酸溶液(75:25)为流动相；检测波长为436nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备 取大黄素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含20g的溶液，即得。供试品溶液的制备 取重量差异项下的本品，研细，取3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液10ml，加入 1.5mol/L的硫酸溶液5ml，加热回流1小时，放冷，转移至25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻

14、度，摇匀，用微孔滤膜(0.45m)滤过，取续滤液，即得。测定法 分别精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液各10l,注入液相色谱仪,测定,即得。大黄素对照品 中国药品生物制品检定所 756-样品 自制 批号：仪器与试剂高效液相色谱仪 xxxx 型高压恒流泵xxxx紫外可见波长检测器xxxx色谱数据工作站色谱柱 依利特填料：Hypersil ODS2 5um 尺寸： 4.6×200mm柱号：E1523753批号：xxxxxx色谱甲醇 天津四友磷酸为分析纯精密称取大黄素对照品适量,加甲醇制成每1ml含510µg的溶液,作为对照品溶液。以510µg/ml的对照品溶液为母液，

15、分别配制 102µg/ml、51µg/ml、40.8µg/ml、30.6µg/ml、20.4µg/ml、10.2µg/ml的对照品溶液。分别精密吸取上述各对照品溶液10µl,注入液相色谱仪,测定,计算，即得。回归曲线为Y(峰面积)=28.7987X (浓度)67.6584 r=0.9995 线性范围为10.2102g/ml，标准曲线近似过圆点，采用外标一点法定量。供试品溶液制备方法的选择：1.取重量差异项下的本品，研细，取3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入三氯甲烷25ml和2.5mol/L硫酸溶液20ml，称定重量，置

16、80水浴上加热回流2小时，冷却至室温，再称定重量，用三氯甲烷补足减失重量，摇匀。分取三氯甲烷液，精密量取10ml，蒸干，残渣加甲醇使溶解，转移至25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。2.取重量差异项下的本品，研细，取3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液10ml，加入 1.5mol/L的硫酸溶液5ml，加热回流1小时，放冷，转移至25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45m)滤过，取续滤液，即得。同一样品按上述二种方法，每种方法制备三个供试品，分别取上述溶液各1

17、0l，注入液相色谱仪，测定，经比较两种方法测定得的含量基本一致，第二种方法重现性好，操作简单，故选用第二种供试品溶液制备方法。精密度 同一样品连续进样测定5次，相对标准偏差为 0.94%，小于3.0%。稳定性 同一样品,制备后在30分钟、1小时、2小时、6小时、12小时后分别测定，相对标准偏差为 3.06%，小于5.0%，表明样品放置12小时内稳定。重现性 同一样品，取5份，各约3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理1小时，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液10ml，加入 1.5mol/L的硫酸溶液5ml，加热回流1小时，放冷，转移至25m

18、l量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(045m)滤过，取续滤液作为供试品溶液。取上述供试品溶液各10µl，注入液相色谱仪，测定。相对标准偏差为1.89%，小于5.0%。加样回收率 取已知含量的样品5份(约3g)，精密称定，置具塞锥形瓶中，各精密加入每1ml含510g的大黄素对照品溶液5ml，蒸干，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理1小时，放冷，再称定重量,用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液10ml，加入 1.5mol/L的硫酸溶液5ml，加热回流1小时，放冷，转移至25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45m)滤过，取续滤液，即得。作为供

19、试品溶液。取上述供试品溶液各5l,注入液相色谱仪，测定,平均回收率为99.72%。样品测定 对三批中试产品，采用原标准的含量测定方法测定，其结果如下：【含量测定】 照高效液相色谱法(中国药典20xx年版一部附录VI D)测定。 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.4磷酸溶液(75:25)为流动相；检测波长为436nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备 取大黄素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含20g的溶液，即得。供试品溶液的制备 取重量差异项下的本品，研细，取3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处

20、理1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液10ml，加入1.5mol/L的硫酸溶液5ml，加热回流1小时，放冷，转移至25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45m)滤过，取续滤液，即得。测定法 分别精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液各10l,注入液相色谱仪,测定,即得。三批中试样品含量测定数据表批 号含量（g/片）xx0101xx0102xx0103259265272参考原剂型标准，暂定本品每片含土大黄以大黄素(C15H1005)计，不得少于200g。【功能与主治】苗医：泱疴洼胗，沓斡档孟：陡：乃兴仰，乃兴仰·蒙浮秋管兜。 中医：清热利湿，排石止痛。用于肝胆湿热蕴结所致急慢性胆囊炎，胆管炎，胆石症， 以及胆囊手术后综合症。 与原剂型标准一致 【用法与用量】 口服，一次24片，一日3次。与原剂型标准一致 【注意事项】 孕妇忌服。与原剂型标准一致 【规格】 基片每