黄芪超微粉增强免疫功能及抗疲劳作用的研究

1、黄芪超微粉增强免疫功能及抗疲劳作用的研究    摘要：目的：研究黄芪超微粉对免疫功能的影响及抗疲劳的作用，并与黄芪饮片进行比较。方法：采用免疫器官重量法测定免疫指标，采用小鼠负重游泳试验观察抗疲劳作用。结果：黄芪超微粉能够显著增加免疫器官的重量；能够显著延长小鼠负重游泳时间。结论：黄芪超微粉具有增强免疫、抗疲劳的功能。    关键词：黄芪；超微粉；增强免疫；抗疲劳            超微粉碎技术是近年来国际上兴起

2、的一种新型物料加工技术，该技术是一种纯物理过程，中药的超微粉碎是指以生物细胞破壁为目的的粉体作业，它不以粉体的细度为目的，而是追求细胞的破壁率。超微粉碎后的药材细粉，半径很小，药物的表面积相应增大，从而提高了有效成分的溶出率。由于细胞壁在粉碎过程中大量被破坏，有效成分不需要通过细胞壁和细胞膜就能释放出来，这样就提高了药物的释放量和释放速度。因此小剂量的超微粉碎破壁细粉即可达到大剂量普通药材的药效【1-2】。  本文观察了黄芪超微粉对免疫功能的影响及抗疲劳作用，并与黄芪饮片进行了比较，为黄芪超微粉的临床应用提供一定的理论依据。1、材料   1.1 试剂与仪器

3、0;  碳酸钠：天津富晨化学试剂厂生产，批号20100827；注射用环磷酰胺，江苏恒瑞制药集团，批号10010521；氯化钠注射液，国药集团有限公司生产，批号08060010；墨汁，北京一得阁墨业有限责任公司生产；JA1203N型电子天平，；Thermo酶标仪。 1.2 药物黄芪超微粉，由江西中医学院基础医学部提供。黄芪饮片，由江西中医学院附属医院提供，黄芪饮片使用常规的煎煮法提取，黄芪破超微粉使用前以蒸馏水制成混悬液，4保存。 1.3动物KM种小鼠，SPF级，合格证号：由江西中医学院实验动物中心提供，合格证号：SCXK（赣）2005-00011.4 统计方法所用

4、计量资料用（±s）表示，采用SPSS13.0 for windows统计软件进行数据分析，计量资料组间比较采用One-Way ANOVA。2、方法与结果2.1 对免疫抑制小鼠免疫器官重量的影响【3】取SPF级KM种小鼠，随机分为正常对照组，模型对照组，黄芪饮片组（2.0g·kg-1），黄芪超微粉分为2.0g·kg-1、1.0g·kg-1、0.5g·kg-1、0.25g·kg-1四个剂量组。实验第1天，动物按20g/kg体重灌胃给药，连续7天，每天1次，正常对照组灌胃蒸馏水。实验第4天，除正常对照组外，各组分别以50mg/kg体重腹腔注

5、射环磷酰胺，连续3天，造成动物免疫抑制模型。于末次给药后1h处死动物，称量体重，并解剖取胸腺和脾脏称重，计算脏器指数。结果显示，与正常对照组比较，模型对照组脾脏指数和胸腺指数都明显小于正常对照组（P0.01）。与模型对照组比较，黄芪超微粉2.0、1.0、0.5、0.25g·kg-1均能显著增加小鼠的脾脏指数和胸腺指数（P0.050.01）。见表1。脏器指数=×100%  2.2 对小鼠负重游泳时间的影响【3】 取SPF级KM种小鼠随机分为对照组，黄芪饮片组（2.0g·kg-1），黄芪超微粉分为2.0g·kg-1、1.0g·kg-1、0

6、.5g·kg-1、0.25g·kg-1四个剂量组。实验第1天，动物按20g/kg体重灌胃给药，连续7天，每天1次，对照组灌胃等量蒸馏水。于末次给药30min后，小鼠尾部负荷10体重的铁丝，放入水中游泳（水温25，水深20cm），观察小鼠游泳至力竭（在水下10秒钟不能上浮），该时间为小鼠的游泳时间。结果显示，与对照组比较，黄芪超微粉2.0、1.0、0.5g·kg-1均能显著延长小鼠的游泳时间（P0.050.01），具有抗疲劳作用，并具有剂量依赖性。见表2。表1 黄芪超微粉对免疫器官重量的影响（x±s）组别剂量（g·kg-1）N脾脏指数胸腺指数正常

7、对照组-103.46±0.834.49±4.50模型对照组-101.45±0.231.37±0.40黄芪饮片组2.0101.77±0.46*1.91±0.52*黄芪超微粉组2.0101.96±0.84*2.00±0.83*黄芪超微粉组1.0101.68±0.27*2.19±0.42*黄芪超微粉组0.5101.58±0.192.06±0.22*黄芪超微粉组0.25101.89±0.30*2.46±0.43* 注:示与正常对照组相比，P<0.0

8、5，示与正常对照组相比，P<0.01；*示与模型对照组相比，P<0.05；*示与模型对照组相比，P<0.01。（下同）表2 黄芪超微粉对小鼠游泳时间的影响（x±s）组别剂量（g·kg-1）N游泳时间（sec）对照组10116.44±42.51黄芪饮片组2.010145.30±28.19*黄芪超微粉组2.010185.30±107.07*黄芪超微粉组1.010176.40±78.10*黄芪超微粉组0.510194.70±81.42*黄芪超微粉组0.2510145.50±56.343、讨论 

9、    中药发挥药效的主要有效成分一般存在于植物的细胞壁中，传统中药饮片其入药形状大都有一个毫米以上的厚度，细胞破壁率据推算不到3%，储藏在细胞内的中药有效成分要发挥作用，必须穿过数个甚至几十个细胞壁才能溶解到溶媒中，因此，传统中药饮片的有效成分的利用率是很低的。本研究所用的黄芪超微粉系采用超微粉碎技术将中药饮片粉碎后，细胞破壁率将达到 86.7%，有效成分利用率在90%以上，使细胞内各种有效成分充分溶出，促进和提高中药材多种有效成分的溶解及释放。药物在体内释放后，与胃肠粘膜的接触面积增大，能更好地分散、溶解在胃肠液中，更易被胃肠道吸收，药效明显增强【1】【2】【

10、4】。     黄芪为豆科类植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，黄芪具有补气生血、益卫固表、敛疮生肌等功效。主要用于脾肺气虚、中气下陷、食少便溏及气血不足所致痈疽不溃等。黄芪中主要含有黄芪多糖、黄酮类化合物、三萜类成分及黄芪大豆皂苷、氨基酸、生物碱和微量元素等【5】。吕氏研究发现【6】，黄芪多糖腹腔注射，能明显升高正常小鼠和环磷酰胺致免疫功能低下小鼠的单核巨噬细胞的吞噬能力、血清溶血素抗体水平、脾脏指数等。宋强【7】等报道黄芪冰冻微粉能够显著延长小鼠负重游泳时间，具有明显的耐疲劳作用，佟欣【8】等对黄芪、党参对小鼠抗应激作用进行了对比研究发现，黄芪和党参水煎剂均能显著增强小鼠抗应激反应的能力，黄芪提高小鼠抗应激的作用优于党参，其中在抗热刺激和耐缺氧实验中黄芪作用明显优于党参，而在低温游泳实验中黄芪和党参的作用无明显差别。