基因工程的基本操作程序拔高练习题个人原创

1、1.2 基因工程的基本操作程序拔高练习题1生命活动中起催化作用的酶都具有一定的专一性，下列四种酶作用的部位分别是()限制酶 解旋酶 肠肽酶 ATP水解酶A氢键、磷酸二酯键、氨基、高能磷酸键B磷酸二酯键、碱基、肽键、高能磷酸键C磷酸二酯键、氢键、氨基、磷酸键 D磷酸二酯键、氢键、肽键、高能磷酸键2下列关于基因工程的叙述，错误的是()A目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物B限制酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶C人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性D载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达3下列有关基因工程的叙述，正确的是()A运载体上的标记基因有利于促

2、进目的基因在受体细胞中表达B用逆转录法合成胰岛素基因时只能从胰岛B细胞中提取相关的模板C目的基因导入受体细胞后，引起受体细胞的变异属于基因突变D限制酶和DNA聚合酶是基因工程中两类常用的工具酶4某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌细胞内，来表达产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而大肠杆菌不带有任何抗性基因。下列叙述正确的是 ( )A导入大肠杆菌的质粒一定为重组质粒BRNA聚合酶是构建该重组质粒必需的工具酶C可用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒D在含氨苄青霉素培养基中不能生长，但在

3、含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌5下列有关基因工程中载体的说法,正确的是()。A.在基因工程中,被用作载体的质粒都是天然质粒B.所有的质粒都可以作为基因工程中的载体C.质粒是一种独立于细菌染色体外的链状DNA分子D.作为载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记基因6科学家将含人的胰蛋白酶基因的DNA片段,注射到羊的受精卵中,该受精卵发育的羊能分泌含胰蛋白酶的奶。这一过程不涉及()。A.DNA以其一条链为模板合成RNAB.DNA按照碱基互补配对原则自我复制C.RNA以自身为模板自我复制D.按照RNA密码子的排列顺序合成蛋白质7以下甲、乙两图表示从细菌细胞中获

4、取目的基因的两种方法，以下说法中错误的是()A甲方法可建立该细菌的基因组文库 B乙方法可建立该细菌的cDNA文库C甲方法要以脱氧核苷酸为原料 D乙方法需要逆转录酶参与8（双选）小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应，为了克服这个缺陷，可选择性扩增抗体的可变区基因(目的基因)后再重组表达。下列相关叙述正确的是()A设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列B用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列CPCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶D一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞9天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而

5、开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰。下列操作正确的是()A提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因BB.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞10“十一五”以来,我国国产抗虫棉的种植面积已占到全国抗虫棉种植面积的95%。中国农科院生物技术研究所郭三堆研究员领导的研究小组将自主设计的BtGFM CrylA杀虫基因导入棉花细胞并成功表达,培育出了国产抗虫棉。有关国产抗虫棉研制过程的叙述,不正确的是()。A.BtGFM Cry

6、lA杀虫基因在棉花细胞中的表达需要经过转录和翻译两个过程B.基因表达载体的构建需要用到限制酶和DNA连接酶C.BtGFM CrylA杀虫基因具有毒性,可以直接杀死棉铃虫D.转基因棉花是否具有抗虫特性可通过检测棉花是否对棉铃虫有抗性来确定11201982年，世界上第一例体型比普通小鼠大1.8倍的“超级小鼠”培育成功。下列相关叙述不正确的是()A该“超级小鼠”是采用显微注射技术获得成功的B将目的基因导入动物细胞的方法中采用最多，也是最有效的方法是显微注射技术C将目的基因导入小鼠细胞前要将含有该目的基因的运载体提纯D培育该“超级小鼠”所用的受体细胞可以是小鼠的受精卵，也可以是小鼠的体细胞12(易错题

7、)科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中，在医学研究及相关疾病治疗方面都具有重要意义。下列有关叙述错误的是( )A选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞具有全能性B采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达C人的生长激素基因能在小鼠细胞内表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用D转基因小鼠的肝细胞含有人的生长激素基因13下列关于目的基因导入微生物细胞的叙述中，不正确的是()A常用原核生物作为受体细胞，是因为原核生物繁殖快，且多为单细胞，遗传物质相对较少B受体细胞所处的一种

8、能吸收周围环境中DNA分子的生理状态称为感受态C感受态细胞吸收DNA分子需要适宜的温度和酸碱度D感受态细胞吸收重组表达载体DNA分子的液体只要调节为适宜的pH即可，没必要用缓冲液14在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是()A用限制酶切割烟草花叶病毒的核酸B用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体C将重组DNA分子导入烟草细胞原生质体D用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞15科学家将含人的­抗胰蛋白酶基因的DNA片段注射到羊的受精卵中，该受精卵发育成的羊能分泌含­抗胰蛋白酶的奶。这一过程涉及()DNA按照碱基互补配对原则自我复制DNA以其中一条

9、链为模板合成RNARNA以自身为模板自我复制按照RNA密码子的排列顺序合成蛋白质A B C D16下图为通过DNA分子杂交鉴定含有某特定DNA的细菌克隆示意图。下列叙述正确的是()A根据培养皿中菌落数可以准确计算样品中含有的活菌实际数目B外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制C重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接D放射自显影结果可以显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置17（双选）北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列。该序列重复次数越多，抗冻能力越强。下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是(

10、)A过程获取的目的基因可用于基因工程和比目鱼基因组测序B多个抗冻基因编码依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白C过程构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选D检测表达产物蛋白质，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其是否完全表达181抗胰蛋白缺乏症是一种在北美较为常见的单基因遗传病，患者成年后会出现肺气肿及其他疾病，严重者甚至死亡。对于该致病患者常可采用注射入1抗胰蛋白酶来缓解症状。据此完成(1)(2)题。(1)图1表示获取人1抗胰蛋白酶基因的两种方法，请回答下列问题：a过程是在_酶的作用下完成的，该酶的作用特点是_。c过程称为_，该过程需要的原料是_。要

11、确定获得的基因是否是所需的目的基因，可以从分子水平上利用_技术检测该基因的碱基序列。 (2)利用转基因技术将控制该酶合成的基因导入羊的受精卵，最终培育出能在乳腺细胞表达人1抗胰蛋白酶的转基因羊，从而更易获得这种酶，简要过程如图2所示。获得目的基因后，常利用_技术在体外将其大量扩增。载体上绿色荧光蛋白(GEP)基因的作用是便于_。基因表达载体d，除图中的标示部分外，还必须含有_。19将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程有关的图和表。表1引物对序列表引物对AP1AACTGAAATGTAGCTATC P2TTAAGTCCATTAC

12、TCTAG引物对BS1GTCCGACTAGTGGCTGTG S2AGCTGGCGTTTAGCCTCG表2几种限制酶识别序列及切割位点表限制酶AluEcoRPstSma切割位点AGCT TCGAGAATTC CTTAAGCTGCAGGACGTCCCCGGGGGGCCC请根据以上图表回答下列问题：(1)在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是_。(2)PCR过程中退火(复性)温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？_。(3)图1步

13、骤所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？_。(4)为将外源基因转入马铃薯，图1步骤转基因所用的细菌B通常为_。(5)对符合设计要求的重组质粒T进行酶切。假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。采用EcoR和Pst酶切，得到_种DNA片段。采用EcoR和Sma酶切，得到_种DNA片段。1.2 基因工程的基本操作程序拔高练习题答案1、解析：本题考查与基因工程有关的酶所具有的功能。限制酶作用于磷酸二酯键，将DNA分子的两条链分开；解旋酶作用于双链DNA分子间的氢键，使扭在一起的两条长链解开；肠肽酶作用于肽键，

14、使多肽独立为氨基酸；ATP水解酶作用于ATP的高能磷酸键使其放出能量。答案：D2、解析：载体上的抗性基因主要起着标记基因的作用，有利于筛选含重组DNA的细胞，并不能促进目的基因的表达。答案：D3、解析：标记基因有利于目的基因的筛选，而不是表达；基因工程的原理是基因重组而不是基因突变，因为并没有产生新的基因；基因工程中常用的两种工具酶是限制酶和DNA连接酶。答案：B4、选D5、答案:D6、答案:C7、解析：首先要知道甲图描述的为该细菌的基因组文库，只要利用DNA限制酶将其原有的DNA切断即可，不需要以脱氧核苷酸为原料。乙图描述的为细菌部分基因文库。乙方法需要逆转录酶参与，并需要以脱氧核苷酸为原料

15、。答案：C8、解析：设计引物时应当与表达载体两端的序列进行互补配对；PCR法扩增目的基因只需要知道基因两端的序列设计合适的引物即可，而不必知道其全部序列；PCR中应用耐高温的DNA聚合酶；根据目的基因的编码产物选择合适的受体细胞，以有利于基因的表达。答案：BD9、答案A解析:可以利用mRNA经逆转录合成目的基因后再进一步扩增,A项正确。因为开蓝色花的矮牵牛基因B的序列是已知的,所以该目的基因宜采用化学方法合成或用多聚酶链式反应(PCR)扩增,而不是从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取,B项错误。目的基因必须与载体结合后才能导入受体细胞,且需要DNA连接酶缝合,C、D项错误。10、解析:BtGFM

16、CrylA杀虫基因可控制Bt杀虫晶体蛋白合成,Bt杀虫晶体蛋白对棉铃虫具有毒性,只有经过转录和翻译才能合成Bt杀虫晶体蛋白,因此A选项正确,C选项错误;基因表达载体的构建方法是先用同种限制酶切割载体和含目的基因的DNA分子,再用DNA连接酶进行连接;可通过个体生物学水平来鉴定转基因棉花是否具有抗虫特性,方法是用棉铃虫侵染普通棉花和转基因棉花,对比转基因棉花是否对棉铃虫具有抗性来确定。答案:C11、答案:D12、【解析】选B。采用DNA分子杂交技术可以检测外源基因是否进入受体细胞以及外源基因在小鼠细胞内是否转录，但表达必须合成相应的蛋白质。转基因小鼠的所有细胞均由受精卵经有丝分裂而来，但生长激素

17、基因仅在其膀胱上皮细胞中选择性表达。13、解析：感受态细胞吸收重组表达载体DNA分子需要适宜的pH，所以应该将其放入缓冲液中，防止吸收过程中某些因素影响到pH的变化。答案：D14、解析：限制酶用于提取目的基因和切割载体，烟草花叶病毒遗传物质是RNA，不能用限制酶切割；DNA 连接酶可以连接具有相同黏性末端的目的基因和载体；受体细胞可以是受精卵和体细胞，也可以是去除细胞壁的原生质体；目的基因为抗除草剂基因，所以成功导入目的基因的细胞具有抗除草剂的能力，筛选时应该用含除草剂的培养基筛选转基因细胞。答案：A15、解析：考查目的基因进入受体细胞后的复制及表达。目的基因进入羊的受精卵中，随受精卵的细胞分裂而进行复制和平均分配，复制时严格按照碱基互补配对原则。由这样的受精卵发育成的羊的乳腺细胞中同样含有目的基因，通过转录和翻译产生的目的基因的产物抗胰蛋白酶。答案：A16、解析：根据菌落数只能大约推测出活菌数；外源DNA作为一个完整的基因，自身含有启动子和终止子；DNA杂交是利用碱基互补配对原则进行的；因为放射性标记的DN