【课件】2.2动物细胞工程（第一课时）课件（人教版2019选择性必修3）

1、从社会中来在治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，而且会产生免疫排斥反应。那么，怎样才能获得大量的自体健康皮肤？能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤？通过细胞培养构建人造皮肤第 2 章 第 2 节动物细胞工程（ 第 一 课 时 ）动物细胞工程 动物细胞培养 动物细胞融合 动物细胞核移植是动物细胞工程的基础从动物机体中取出相关组织，将它们分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖的技术。一、动物细胞培养 原理：细胞增殖 培育的终点：细胞目录Contents1动物细胞培养的条

2、件2动物细胞培养的过程3干细胞培养及其应用1动物细胞培养的条件动物细胞培养的条件营养物质其他条件糖类氨基酸无机盐维生素无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境1动物细胞培养的条件n 营养葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等合成培养基（将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配置而成的培养基）液体培养基（培养液）含有多种未知的促细胞生长因子及其他活性物质，可以补充合成培养基中缺乏的物质1动物细胞培养的条件n 无菌、无毒的环境无菌对培养液和所有培养用具进行灭菌处理在无菌环境下进行操作定期更换培养液，以便清除代谢物无毒超净工作台1动物细胞培养的条件n 适宜的温度、pH和渗透压哺乳动

3、物多以（36.5）温度：pH： 多数细胞生存的适宜pH在7.2-7.4渗透压：需要考虑的一个重要环境参数n 气体环境O2: 细胞代谢所必需的CO2：维持培养液的pH（95%空气和5% CO2 ）CO2 培养箱微生物培养中的作用不同（为自养型微生物提供碳源）2动物细胞培养的过程动物组织块用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理分散成单个细胞制成细胞悬液问题细胞分裂受阻悬浮生长贴壁生长密度过大、有害代谢物积累和营养物质缺乏等接触抑制解决分瓶2动物细胞培养的过程【思考1】选动物幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料的原因？因为其细胞生命力旺盛，分裂能力强，分化程度低。2动物细胞培养的过程【思考2】用胰蛋

4、白酶、胶原蛋白酶处理组织块，使组织块分散成单个细胞的目的是什么？使细胞与培养液充分接触，一方面保证细胞所需的O2和营养物质的供应，另一方面保证细胞内代谢废物的及时排出；使得在细胞水平操作的其它技术得以实现。2动物细胞培养的过程【思考3】用胰蛋白酶分散细胞，由此可说明细胞间的物质主要是什么成分？【思考4】胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？那将动物组织分散成单个细胞时要注意什么问题呢？主要是蛋白质(胶原蛋白等)。能，应注意时间的控制。因为胰蛋白酶不仅能分解细胞间的蛋白质，长时间还会分解膜蛋白，对细胞造成损伤。【思考5】能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？不能，因为动物细胞培养适宜的PH为7.27.4，此

5、环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。2动物细胞培养的过程u 细胞贴壁：在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上。u 培养瓶或培养皿壁要求：表面光滑、无毒、易于贴附。培养皿培养瓶2动物细胞培养的过程 瓶壁上的细胞层数是：一层（或单层）贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖。u 接触抑制分瓶培养解除方法癌变细胞没有接触抑制现象，可以在培养瓶中形成多层细胞2动物细胞培养的过程将分瓶之前的细胞培养，即动物组织经处理后的初次培养称为原代培养。将分瓶后的细胞培养称为传代培养。u传代培养:u原代培养:在进行传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集；

6、铁壁细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集。之后，将收集的细胞制成细胞悬液，分瓶培养。2动物细胞培养的过程【思考6】用胰蛋白酶两次处理的目的是？第一次处理的目的是使组织细胞分散开；第二次处理的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来，便于分瓶后继续培养。u原代培养视频演示u传代培养视频演示1.幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞比较，分化程度低的细胞与分化程度高的细胞比较，哪些细胞更易于培养？为什么？细胞的增殖能力与供体的年龄有关，幼龄动物的细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛，老龄动物的细胞则相反。所以，一般来说，幼龄动物的细胞比老龄动物的细胞易于培养。同样，分化程度越低的细胞，増殖能力越强，所以更容易培养。思考讨论思考讨论2. 动物细胞培养与植物组织培养有什么相同和不同