分子诊断在法医学中主要解决亲子鉴定和个体识别的问题

1、1. 分子诊断在法医学中主要解决亲子鉴定和个体识别的问题：² 2.亲子鉴定(parentage testing)是通过对人类遗传标记的检测，根据遗传规律分析，对有争议的父母与子女血缘关系的鉴定。亲子鉴定中，需要确定与小孩有无亲子关系的男子/女子称为有争议的父亲/母亲，或假设父亲/母亲，或被控父亲（alleged father,AF）/被控母亲（alleged mother,AM）3.亲子鉴定可参考的指标：非遗传特征和遗传特征。.非遗传特征：如根据妊娠期限推测受精日期，若能证明受精期内，AF不可能与小孩生母有性关系，则可排除AF的父权。.遗传特征包括如毛发颜色、皮肤颜色、脸型及短指或多

2、指畸形等多基因决定的遗传性状和单基因座决定的遗传标记。用于亲子鉴定的指标或遗传标记，应该是一种简单的遗传性状，经过家系调查已确定遗传方式按孟德尔定律遗传，群体调查证明具有遗传多态性，具有比较高的排除非亲生父亲的能力。在出生时，该遗传标记已完全表现，并且终生不变，不受年龄、疾病及其他环境因素的影响。4.短串联重复序列l 目前在亲子鉴定中应用最广的长度多态性遗传标记。l 重复单位短，仅26bp，四核苷酸（AATG）STR基因座最常用l 长度多态性来源于重复单位拷贝数的个体差异 STR基因位点在人类基因组中分布广泛,占5%左右,可采用多基因同时复合扩增,灵敏度高,扩增结果稳定,重复性好,并可进行自动

3、化分型。5.亲子鉴定的基本原理1、在肯定孩子的某个等位基因是来自生父，而AF并不带有这个基因的情况下，可以排除他是孩子的生父。检查的遗传标记越多，非生物学父亲被排除的概率就越大。2、在肯定孩子的某些等位基因是来自生父，而AF也带有这些基因的情况下，不能排除他是孩子的生父。这时可以计算如果判断他是孩子生父，理论上的把握度究竟有多大。l 孩子不可能带有双亲均无的等位基因。l 孩子必定得到双亲各方的一对等位基因中的一个。6.非父排除概率(probability of exclusion，PE):指不是小孩生父的男子能被遗传标记排除的概率,是衡量遗传标记系统在亲子鉴定中实用价值大小的客观指标。 目前常

4、用的DNA遗传标记系统均为共显性遗传，等位基因数较多。某一个遗传标记系统，设pi代表群体中第i个等位基因频率,pj代表群体中第j个等位基因频率，并且等位基因i不等于等位基因j，则该遗传标记的非父排除概率为：PE=pi(1-pi)2-1/2pi2pj2(4-3pi-3pj) 亲子鉴定不止使用一个基因座，有必要知道使用的全部遗传标记对于不是小孩生父的男人，否定父权有多大的可能性，即累积非父排除概率。累积非父排除概率计算公式为：CPE=l-(1-PE1)(1-PE2)(1-PE3)(1-PEk)式中PEk为第k个遗传标记的PE值。所用遗传标记数目越多，累积非父排除概率愈高，鉴别能力愈强在亲子鉴定中，

5、当不能排除受检者与孩子有父子或母子关系时，则倾向于认同受检者与孩子有亲子关系。此时需要评价假设父与孩子有亲生关系可能性大小，以判定是否具有亲生关系。7.常用评价亲权机会的指标有：父权指数、父权相对机会。肯定父权的机会一、父权指数父权指数(paternity index，PI)是判断亲子关系所需的两个概率的似然比，即具有AF遗传表型的男子是孩子生物学父亲的概率（X）与随机男子是孩子生物学父亲的概率（Y）的比值。PI=X/Y=(c*f)/(g*f)c：AF提供生父基因概率f：生母提供基因概率g：随机男子提供生父基因概率多个遗传标记用于亲子鉴定时，n个遗传标记的PI相乘则为累积父权指数（CPI）CP

6、I=PI1*PI2*PI3*PIn二、父权的相对机会PI是实数,由数字不易看出父权的机会,习惯上将父权指数换算成一个条件概率，即父权相对机会（relative chance of paternity,RCP）RCP既是亲子关系概率,也代表了判断AF是孩子生父的把握度大小。RCP=CPI/(CPI+1)×100%例如某亲子鉴定案的父权指数(CPI)计算值为2497,则:RCP=2497/(2497+1)×100%=99.96%亲子鉴定标准亲子关系概率永远不会达到100%假如经过若干个遗传标记的检查，对于不是孩子生父的男子的总排除概率已达到99.99%以上，在这种情况下如某男子

7、不能被排除，他与孩子的亲子关系概率一般很高。如果某实验室对非父的总排除概率为95%，假如某男子不被排除，这不表示他是孩子生父的概率为95%，这只是说明通过这些遗传标记检查，在不是孩子生父的所有男子中，大约95%的个体可以被排除。如果这名男子与孩子的亲子关系概率为99%，这只是说此人有99%的机会是孩子的生父。从把握度来说，就意味着鉴定人有99%的把握认为AF是孩子的生父。一、排除父权的标准经标准化实验检测遗传标记，假定为父亲的男子不能提供给孩子必需的等位基因，在不存在遗传变异的前提下，可以排除假定父亲的父权，即可以断定他不是小孩的生物学父亲。为了避免潜在遗传变异影响，排除父权至少应根据两个以上

8、遗传标记。任何情况下都不能仅根据一个遗传标记排除父权。二、认定父权的标准经标准化实验检测遗传标记，假定为父亲的男子不能被排除父权。计算概率后如同时满足下列两项指标，可以认定假定父亲的父权，即可以判定他是小孩的生物学父亲。1、实验检测遗传标记的累计非父排除率等于或大于99.99%；2、假定父亲的累积父权指数等于或大于10000,即假定父亲的相对父权机会等于或大于99.99%。其他血缘关系鉴定1.更大范围：兄弟、姐妹、叔侄及爷孙隔代关系等，用非常染色体DNA遗传标记：mtDNA和Y-DNAmtDNA（线粒体DNA）：母系遗传Y染色体遗传标记：父系遗传特定性不如亲子关系鉴定：例如，Y染色体DNA遗传标记本身并不能区分爷孙关系与叔侄关系，只是明确他们有共同的父系祖先。亲子鉴定的一般过程1 签署委托合同.2 样本采集.3 DNA抽提、PCR扩增、DNA分型.4 分析被检验者的DNA分型结果是否符合相应的遗传规律5 作出鉴定结论.出具报告书1. 毛细管和电极进入样品溶液中2. 仪器开始加电压 3.带负电荷的DN