大鼠延髓巨细胞网状核与脑干内脏 运动核间的纤维投射研究 医学论文_第1页
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文档简介

1、    大鼠延髓巨细胞网状核与脑干内脏 运动核间的纤维投射研究 医学论文              【摘要】  目的 研究成年大鼠延髓巨细胞网状核与脑干内脏运动核的神经联系。方法 将顺、逆行神经示踪剂WGA- HRP注入一侧巨细胞网状核,光学显微镜下观察该核团与一般内脏运动核(迷走神经背核、上泌涎核、下泌涎核)和特殊内脏运动核(面神经核、 疑核、三叉神经运动核)的纤维联系。结果 在一般内脏运动核、双侧迷走神经背核、下泌涎核均可

2、 看到少量逆行标记细胞及神经纤维末梢,但上泌涎核未发现任何标记,在特殊内脏运动核的面神经核、疑核、三叉神经运动 核团双侧均见逆行标记细胞及神经纤维终支。 结论 巨细胞网状核与大多数脑干内脏运动核有双向纤维联系。 本文由中国论文范文收集整理。【关键词】  巨细胞网状核;神经示踪剂;迷走神经背核;疑核;大鼠经典神经解剖学清楚地阐述了位于脑干抑制区的巨细胞网状核(gigantocellular reticular nucleus)通过网状脊髓束的神经支配对骨骼肌起抑制效应1-2。根据诸多基础及临床研究,其对肢体协调运动的抑制性  调控作用已被医学界公认。近年来随着人们对功能认识相

3、对空白的脑干网状结构这一区域的深入了解,不断发现巨细胞网状核的其他调控作用。比如其对心血管、呼吸等内脏活动有不同程度的影响3-5,认为该核  团所在区域属于降低血压的“降压区”及调节呼吸节律的吸气中枢6。临床痉挛性脑瘫患者由于中枢抑制与兴奋调节失衡,产生躯体运动及胃肠道功能障碍,这些都说明巨细胞网状核与内脏活动有着某些联系,但目前国内外研究内脏运动核与巨细胞网状核相关联系的资料较少,本实验主要观察该核团与直接调控内脏活  动的脑神经核团间的神经联系,说明它与内脏活动有关联。   1 材料和方法    1.1 动物和试剂

4、60; 180220 g Wistar大鼠30只,雌雄不限。4%WGA-HRP(溶液)购自美国Sigma公司,四甲基联苯胺(TMB)为美国Research公司产品,二甲基亚砜(DMSO)为美国Merck公司产品,亚硝基铁氰化钠(SNF)、钨酸钠(ST)均为美国Sigma公司产品。  1.2 仪器 江湾型C脑立体定位仪,CM1800恒冷冰冻切片机,C09   -   A4772型微量注射器,90型牙科钻,P-30型  微玻管拉制仪,德国Leica光学显微镜及数码摄影  装置。  1.3 方法 大鼠在戊巴比妥钠(50

5、mg·kg-1)或水合氯醛(500   mg · kg-1)腹腔注射全麻下,通过两侧耳杆和齿栓将大鼠头部固定于脑立体定位仪,剪毛,消毒,在大鼠头部  切一正中切口,分离皮下组织,充分暴露颅骨前囟到人字缝后1cm ,按照Paxinos和Watson大鼠脑立体定位图谱定位Gi(图谱中巨细胞网状核的缩写),以颅骨中线左侧或右侧旁开1 mm与外耳道连线后方2.8 mm  交汇处为圆心(Gi中心点坐标)钻一小孔,清除此孔内脑膜及少量溢出的脑脊液,将前端套好微玻管(已吸入WGA-HRP)的1 l微量注射器固定在定位仪推进杆上,按上述坐标使微玻管尖

6、端从脑表面向下小心推进7.6 mm,缓慢注入4%WGA-HRP 0.050.10 l,留针20   min,缓慢起针,缝合。有28只动物存活24 d  (少数为4d ),在麻醉状态下,经左心室快速灌流2025   生理盐水100 ml冲去血液,继而灌入4 体积分数为4%多聚甲醛及1.25%戊二醛的0.1 mol ·L-1磷  酸缓冲液(PBS,pH7.4)固定,打开颅骨,迅速取出整个脑组织,后固定4 h,再入4 20%蔗糖PBS液沉底,截取脑干部分,冰冻冠状连续切片,厚40 m,隔1取1,注射部位附近切片全取,切片收集于装有

7、0.01 mol·L-1PBS液的孵育盒,其中10只动物切片按Mesu-  lam1978年推荐的TMB-SNF法7显色,另外18只动物切片用TMB-ST法8    显色。整个显色反应过程注  意避光。  1.4 切片处理 将反应后的切片顺次贴在涂抹铬钒明胶的载玻片上,避光晾干,切片收集2套,其中1套中性红复染,用于对照观察和定位核团。过梯度酒精、二甲苯,中性树胶封片,光学显微镜下观察并记录、拍片。   2 结  果    2.1 注射区低倍镜下检查注射部位,其中以

8、Gi中心为圆点向周围扩散但未超出该核外围的共23组,观察这23组切片注射部位和相应内脏运动核。注射部位大致呈卵圆形,由内向外分三层环绕中心,最内层的中心有不同程度破溃坏死组织,周围呈浅  蓝色环形区带;毗邻层蓝黑色,含较多显色反应颗粒,但细胞形态难以分辨;最外层颜色较浅,向周围辐射,可见轮廓清晰的神经细胞胞体及突起(图1)。   2.2 标记细胞及纤维终末的分布 一般内脏运动核:迷走神经背核、下泌涎核双侧均可见逆行标记细胞和顺行纤维终末,但上泌涎核没有标记。迷走神经背核标记细胞胞体大致呈镰刀形、椭圆形,个体中小型,标记细胞数目较多,每张切片46个;下泌涎核多为小型梭形细胞,标记细胞数目较少,每张切片13个,两核团顺行标记纤维终末分布稀疏  (图25)。特殊内脏运动核:面神经核、疑核、三叉神经运动  核双侧均见逆行标记细胞和顺行纤维终末。面神经核标记细胞多为镰刀形、扁长形,中等大小,标记细胞和纤维终末较多,每张切片710个;疑核大致为三角形,中等大小,每张13个切片;三叉神经运动核呈叉形、镰刀形胞体,个体较大,每张切片24个;后两者纤维终末标记都不多(图610)。  关键词:研究,纤维,运动,细胞,神经,标记,医学论文,大鼠延髓巨细胞网状核与脑干内脏 运动核间的纤维投射研究 内容摘要:【摘要】 目的 研

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