法洛四联征患者血小板功能状态的研究

1、    法洛四联征患者血小板功能状态的研究        摘要目的：观察法洛四联征(TOF)患者血小板功能状态。方法：采用放射免疫分析法测定26例TOF患者血浆及尿液中血栓素A2(TXA2)的代谢产物尿液中血栓素B2(TXB2)和前列环素(FGI2)的代谢产物6-酮-前列腺素1(6-keto-PGF1)的含量，以及血浆-颗粒膜蛋白(GMP-140)的含量，并与14例年龄相匹配的正常健康者作对照。结果：TOF组患者血浆及尿液中TXB2的水平显著高于对照组(P0.01)；TXB2

2、与6-keto-PGF1的比值明显大于对照组(P0.01)；TOF组血浆GMP-140水平亦显著高于对照组(P0.01)。结论：TOF患者体内TXA2与PGI2代谢失衡，GMP-140释放增加，血小板呈激活状态，有利于血小板的粘附、聚集，参与血栓性疾病的发生。关键词法洛四联征血小板血栓素A2前列环素-颗粒膜蛋白 The states of platelet function in patients with tetralogy of FallotLi YaorongCao LinshengZeng Qiutanget al(Institute of Cardiovascular Disease

3、,Tongji Medical University,Wuhan 430022)AbstractObjective:To investigate the states of platelet function in patients with tetralogy of Fallot(TOF).Methods:In this study,biosynthesis of thromboxane A2,prostacyclin and -granule membrane protein (GMP-140) were investigated in 26 patients with TOF and c

4、ompared with 14 age matched health subjects.The concentration of thromboxane B2(a metabolite of thromboxane A2),6-keto-prostaglandin F1 (a metabolite of prostacyclin)in plasma and urine,and of GMP-140 in plasma were measured.Result:The thromboxane B2 levels in patients with TOF were remarkably highe

5、r than in the health control group(P0.01).The ratio of thromboxane B2 to 6-keto-prostaglandin F1 was greater in the patients than in the normal controls(P0.01).The GMP-140 level in patients was also remarkably higher than in the control (P0.01).Conclusion:The balance between biosynthesis of thrombox

6、ane A2 and of prostacyclin is abnormal in patients with TOF,and the patients have an increased release of GMP-140.The activated platelets favours platelet aggregation and thrombosis.Key wordsTetralogy of FallotPlateletTXA2PGI2GMP-140紫绀型先天性心脏病(CHD)是临床上常见的心血管疾病，其中以法洛四联征(TOF)多见。有人统计紫绀型CHD脑血管栓塞的发生率为1.6%

7、17.7%，TOF为4%1，严重影响患者的预后和生活质量。目前有关血栓前状态血小板及血管内皮功能的研究多集中在肺动脉高压症、冠心病、脑血管疾病、糖尿病、肾病以及血液系统疾病等方面，而在紫绀型CHD患者中的研究甚少，国内目前尚无类似研究报道。本文采用双抗夹心免疫放射分析法分别检测无血栓并发症的TOF患者血浆及尿液中血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列腺素1(6-keto-PGF1)的含量，以及血浆中-颗粒膜蛋白(GMP-140)的水平，并与正常人作对照，探讨其血小板功能状态及其临床意义。1对象与方法1.1研究对象1.1.1TOF组：26例，男21例，女5例，年龄(12.5±5.5)岁。

8、均为导管检查确诊并经手术证实的TOF患者，并除外以下情况：TOF伴有心力衰竭；口服血管活性药物及抗凝剂；有肝、肾功能不全者；伴有感染性疾病者；伴有血栓性疾病者；患有高血压、糖尿病及血液系统疾病者。1.1.2对照组：选择年龄与TOF组相匹配的健康人14例，男12例，女2例，年龄(11.5±6.2)岁。均为经病史询问、体格检查和常规辅助检查无其他疾病者。1.2研究方法心脏超声多普勒检查：在诊断TOF的同时，仔细探查有无心脏内血栓的存在。血液标本收集：TOF组每例均在导管检查术前采外周血5 ml，迅速放入含2%乙二胺四乙酸(EDTA)-消炎痛抗凝剂的试管中，抗凝剂与全血的比例为19(V/V

9、)，低温离心，分离血浆后置-20以下冰箱保存待测，对照组采血方法同TOF组。尿液标本收集：在取血标本前1天收集12 h尿液并防腐，测总量并混匀，取5 ml置-20以下冰箱保存待测，对照组尿标本留取同TOF组。TXA2与6-keto-PGF1含量测定：采用双抗夹心免疫放射分析法检测，试剂盒由北京东亚免疫研究所提供。同时测定血小板计数和血红蛋白含量。GMP-140含量测定：采用双抗夹心放免分析法检测，试剂盒由苏州医学院血栓与止血研究室提供。1.3统计学处理数据以±s表示，组间资料比较采用t检验。2结果TOF组与对照组TXB2、6-keto-PGF1及GMP-140的测定结果见表1、2。表

10、1TOF组与对照组血浆血小板功能指标测定结果血小板功能指标TOF组对照组TXB2(pg/ml)377.75±68.74*89.32±25.626-keto-PGF1(pg/ml)85.07±18.194.82±18.58GMP-140(ng/ml)33.54±8.93*11.43±5.12Hb(g/L)166.38±25.76*113.71±7.34BPC(×109/L)186.92±53.03188.00±51.95与对照组比较*P0.01 表2TOF组与对照组尿液TXB2及6-ke

11、to-PGF1测定结果血小板功能指标TOF组对照组TXB2(pg/ml)522.49±194.58*214.96±63.886-keto-PGF1(pg/ml)474.68±184.99512.60±99.72与对照组比较*P0.01 3讨论3.1血小板激活与血栓形成70年代国外学者研究发现紫绀型CHD患者血小板寿命缩短，活性增加，但没能得出一致结论。CHD患者常发生脑血管栓塞、肺血管栓塞以及心内血栓形成13。因此人们开始重视CHD与血栓性疾病关系的研究。Adatia等4检测了一组CHD伴肺动脉高压患者尿中TXA2及PGI2代谢产物的浓度，结果发现TOF

12、组TXA2浓度显著高于对照组，而PGI2水平低于正常。Adatia等5又分析了16例紫绀型CHD不伴肺动脉高压的患儿，包括TOF、大血管错位伴肺动脉口狭窄和肺动脉瓣闭锁等畸形，其尿中TXA2代谢产物的浓度同样明显升高，TXA2/PGI2比值增加。目前尚未见有TOF患者体内GMP-140水平变化的研究报道。本研究同时测定了紫绀型CHD患者(均为TOF)血浆及尿中TXA2和PGI2代谢产物的浓度，以及血浆GMP-140的水平。不同标本检测均显示TXB2水平较对照组明显升高，而且患者尿液中的TXB2水平增高更为显著，其中最高者达942.0 pg/ml。由于尿液中还含有TXB2的最终代谢产物2，3-去

13、二甲基-TXB2(DN-TXB2)、11-去氢-TXB2(DH-TXB2)以及DN-11-DH-TXB21，3，因此更能真实反映体内TXB2的水平。血浆GMP-140水平亦显著高于对照组，说明血小板激活时GMP-140被释放入血浆。3.2血小板激活产生的可能机制尽管目前一些研究证实CHD患者存在有血管内皮损伤、血小板激活和其它凝血机制的障碍，但其确切机制还不十分清楚。对于右向左分流的紫绀型CHD患者，异常分流的血液对心内膜的冲击，造成心内膜损伤；同时由于右心室流出道的梗阻，肺循环血流量减少，往往伴有严重的低氧血症和红细胞增多症，血液粘滞度增高。本研究发现TOF患者血红蛋白(Hb)含量显著高于对

14、照组，最高者达230 g/L。慢性严重缺氧可使血小板半衰期缩短，活性增加，TXA2释放增加6。TXA2的增加又诱导血小板粘附、聚集，进一步释放TXA2。此外，某些实验研究发现，在低氧状态下，血管内皮损伤，内皮下组织暴露，导致TXA2合成增加，PGI2合成减少6，7。由此可以认为紫绀CHD患者由于长期缺氧，血管内皮细胞受损，血小板呈激活状态，参与了TXA2与PGI2失平衡的发生。同时血小板激活使GMP-140释放增加，血管内皮损伤和血小板激活，为血栓形成提供了条件。作者简介：李耀荣：研究生曹林生：导师作者单位：李耀荣曹林生曾秋棠李裕舒李大主王祥陈志坚毛奕吴桂芳：同济医科大学心血管病研究所(武汉，

15、430022)李耀荣：现在山东滨州医学院附属医院心内科(256603)参考文献1Geva T,Frand M,Bengamin P,et al.Cerebral embolization from an inferior vena cave thrombus in Tetralogy of Fallot.Pediatr Cardiol,1991,11:44462Hart RG.Cardiogenic embolism to the brain.Lancet,1992,339:5895933Belder MA,Tourikis L,Leech G,et al.Risk of patient fo

16、raman ovale for thromboembolic events in all age groups.Am J Cardiol,1992,69:131613204Adatia I,Barrow SE,Stratton P,et al.Thromboxane A2 and prostacyclin biosynthesis in children and adolescents with pulmonary vascular disease.Circulation,1993,88:211721225Adatia I,Barrow SE,Stratton P,et al.Abnormalities in the biosynthesis of thromboxa-ne A2 and prostacyclin in children with cyanotic congenital heart disease.Br Heart J,1993,69:1791826Olson DM,Tanswell AK.Effects of oxygen,caicium inonophore,and arachidonic acid on progtaglandsin prod